Способ определения скрытой крови в биологическом материале Советский патент 1992 года по МПК G01N33/72 

Изобретение относится к медицине, а именно к клиническим диагностическим исследованиям, и предназначено для быстрого и безопасного определения крови в экстрементах при диагностике скрытых кишечных кров ото-тений, а ТРК- же может быть использовано при выявлении скрытой крови в моче и другом биологическом материале у обследуемого лица при подозрении на внутреннее кровотечение.

- Определение скрытой крови производится с помощью химической реакции на пероксидазу, поскольку гемоглобин обладает высокой пе.роксидазной активностью. В реакции участвует хромоген - неокрашенное веществе, которое п процессе окисления образует краситель, являющийся индикатором реакции. Другой обязательный компонент - окислитель. Катализатором является гомоглобин крови.

«гаъ&ь

10

15

20

Цель изобретения - повышение точости (правильности результатов), упощение способа.

На основе высокоэффективного, безоасного и рекомендованного к использованию Минздравом СССР реактива азо- иром создается инднкаторная бумага. ля изготовления индикаторной бумаги еактив азопирам следует модифицировать по сравнению с его наиболее распространенным вариантом для обеспечения максимальной сохранности бумаги при ее высокой чувствительности.

Состав азопирама для индикаторной бумаги (мас.%): Амидопирин15-20

Анилин гидрохлорид 0,5-2,0

Этанол 95Остальное

В этот реактив дополнительно вводится стабилизатор следующего состава, мас.%: г-идроксиламин гидрохлорид 1,0- 2,0; дистиллированная вода остальное.

Стабилизатор вводится в предварительно приготовленный азопирам в коли- 5 честве 0,1 от объема азопирама. Стабилизированным азопнрамом пропитывается бумага. Срок использования индикаторной бумаги с азопирамом 12 мес, если в реактив введен стабилизатор, а без него - 1 - 2 мес.

Основу устройства для выявления скрытой крови составляют перфорированные пластинки белого или кремового цвета. Для их изготовления можно использовать плотный картон, пластмассу, дерево (медицинские шпатели) и т.п. материалы. Оптимальные размеры пластинки: длина 75-140 мм, ширина 18- 23 мм, толщина 1,5-2,0 мм. Каждая пластинка имеет 1 - 4 отверстия диа- метром 10 - 15 мм. Отверстия смещены к одному концу пластинки, а другой, неперфорированный ее конец удобно брать рукой при использовании.

Эти отверстия заклеены индикаторной бумагой с одной стороны пластинки. Таким образом, на каждой пластинке образуются лунки (углубления), края которых образованы краями отверстий в пластинках, а дно - индикаторной бумагой.

Две такиг пллстинки склеиваются с помощью бумаги попарно длинными сто- гонам:г и образуют индикаторное устройство, складывающееся, как обложка книги. На одной стороне (поверхности) этого устройства находятся лунки. На другой поверхности - индикаторная бу30

35

40

Д5

50

55

0

5

0

5

0

5

0

Д5

50

55

мага, закрывающая отверстия в пластинках.

К этому складному устройству придается третья пластинка из того же материала, но без отверстий и без бумаги. Эта неперфорнрованная пластинка служит шпателем для нанесения исследуемого материала.

Комплект, состоящий из сложенного индикаторного устройства и шпателя укладывают в отделение (карман) пакета из тонкого прозрачного и бесцветного полиэтилена.

При взятии пробы на анализ отворачивают край липкой ленты, герметизирующей один карман, и извлекают инди7 каторное устройство; вносят исследуемый материал в углубления устройства (лунки) так, чтобы он касался индикаторной бумаги, образующей дно лунок. После нанесения материала во все лунки устройство складывают лунками внутрь, помещают в тот же карман пакета, из которого устройство было извлечено, и вновь заклеивают карман (экскременты) оказываются между пластинками, а снаружи - чистая поверхность пластнчок и индикаторной бумаги. Таким образом, при закладывании устройства обратно в карман пакет не пачкается.

Пакет используют, в зависимости от количества карманов в нем, 1-4 дня. Каждый день вводят материал в лунки одного индикаторного устройства.

Для постановки реакции на скрытую кровь достаточно, не вскрывая пакет, проколоть полиэтиленовую пленку и ввести в карман несколько капель 3%-ной перекиси водорода, которая и является проявляющим раствором. Если в материале, находящемся в лунках, была примесь крови, индикаторная бумага окрашивается в фиолетово-сиреневый цвет. Если крови не было, цветной реакции не будет.

Пример 1. Обследуемый на кишечное кровотечение получает конверт с пакетом. В пакете 3 отделения (кармана) с индикаторными устропстпа- ми. В каждом индикаторном устройстве 4 лунки.

Перед табором пробы экскрементов обследуемым открывает одно из отделений полиэтиленового пакета (карман), снимая липкую ленту. Достает комплект индикаторного,, устройства, непр.пфорированнон пластинкон (шпателем) ианосит Л порции экскрементов (из разных мест общей массы кала) D лунки на поверхность индикаторной бумаги. Затем обследуемый скла- , дьгеает пластинки устройства так, что экскременты в лунках оказываются внутри сложных и прижатых друг к другу пластинок. Шпатель, которым был взят материал, выбрасывают, а сложенные ю пластинки с порциями экскрементов Внутри (между ними) обследуемый укладывает обратно в карман полиэтиленового пакета и вновь заклеивает той же липкой лентой.15

На следующий день аналогичным способом используется содержимое второго кармана, на третий день - третьего кармана.

После окончания использования гер-20 метизнровлннпй липкой лентой пакет укладывают в конверт, на котором написаны необходимые сведения об обследуемом. Конверт с пакетом сдается (отсылается) в лабораторию.25

В лаборатории полиэтиленовый пакет вынимают из конверта. Лаборант, не вскрывая пакет, прочалывает полиэтиленовую плечку концом стеклянной пи

5W6

макетом доставляют (отсылают) в лабораторию, где индикация крови проводится аналогично примеру 1.

В случае необходимости обследуе1 :нй может сам произвести анализ, нанеся на смоченную мочой индикаторную бумагу по 1-2 капли 3%-ной перекиси водорода. .Результаты анализа записывают HR конверте, который сдают в лабораторию или врачу.

Использование предлагаемого решения обеспечивает по сравнению с известными способами высокую точность (правильность результатов) за счет информативности, надежную изоляцию инфицированного материала от окружающей среды и медицинского персонала, использование безопасных в работе,легкодоступных и недоропгх отечественных реактивов и материалов, а также простоту изготовления и применения.

Формула изобретения

1. Способ определения скрытой крови в биологическом материале путем взаимодействия пробы с реактивом, содержащем раствор амидопирина 15-20%, раствор анилина гндрохлорида 0,5-2%

Изобретение относится к медицине, а именно к клиническим диагностичес- , ким исследованиям, и предназначено для быстрого и безопасного определения крови в экскрементах и другом биологическом материале при диагностике внут- ренних кровотечении. Цель изобретения - повышение точности способа определения, упрощение, изоляция инфицированного материала от окружающей среды. Цель достигается путем помещения пробы в лунки, образованные плас- . тиной с толщиной 1,5-2 мм, содержащей отверстия диаметром 10-15 мм, и приклеенной к пластине индикаторной бумагой, которая пропитана реактивом, содержащим раствор амидопирина 15-20%, раствор анилина гидрохлорида 0,5-27 и этанол 95%, с последующим закрыванием лунок другой пластиной; Полученный комплект помещают в пакет из прозрачного полимерного материала и герметизируют. Проявление реактива осуществляют раствором перекиси водорода, вводимого путем прокола пакета. Реак-- тив стабилизируют путем добавления к нему предварительно раствора гидрок- силамина 0,1-0,2%. При наличии в пробе. 0,1-0,2% и более крови появляется яркое фиолетово-сиреневое окрашивание. Способ обеспечивает высокую точность определения, надежную изоляцию инАн- цированного материала от окружающей среды и медицинского персонала, использование безопасных в работе легкодоступных и недорогих реактивов, простоту применения. 1 з.п. А-лы. (Ј О J ел 4Ь -U

петки, через котирую и вводит в каждый ) „ этанол 95% с последукщим проявленнкарман ка индикаторную бумагу несколько капель 3%-ной перекиси водорода. Если исследуемый материал содержал 0,1% и более кропи, немедленно или в течение ближайшей минуты появляется 5 фиолетово-сиреневое окрашивание, хорошо заметное на светлом Лоне пластинок через прозрачную пленку полиэтилена. Около порций экскрементов, не содержавших кровь, окрашивание не проявляется.э пробы и закрывают неперЛориропанной

Пример 2. Обследуемый на наличие микрогематурии получает конверт с пакетом. В пакете 3 кармана, в каждом кармане индикаторное устройство. Обращение с пакетом аналогично при- 45 меру 1, только в каждую лунку вводится не порция экскрементов, а капля мочи. Далее конверт с использованным

пластиной, комплект помещают в пакет из прозрачного полимерного материала и герметизируют, а проявление осуществляют путем прокола пакета.

ем продукта реакции раствором перекиси водорода, отличающийся тем, что, с целью изоляции инфицированного материала, повышения точности и упрощения способа, реактивом пропитывают индикаторную бумагу, которая приклеена к пластине толщиной 1,5- 2,0 мм с отверстиями диаметром 10- 15 мм, в образовавшиеся лунки пносят

пластиной, комплект помещают в пакет из прозрачного полимерного материала и герметизируют, а проявление осуществляют путем прокола пакета.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что, с целью стабилизации реактива, он дополнительно содержит 0,1-0,2% гидроксиламина.