I
Изобретение относится к медицине, а именно к биохимическим диагностическим исследованиям.
Известен реактив для определения скрытой крови в биологических объектах, содержащий амидопирин и
нол
Однако реактив обладает низкой чувствительностью (л/1%), и количество неопределенных результатов достигает до 30%.
Цель изобретения - повьппение чувствительности определения.
Указанная цель достигается тем, что реактив для определения скрытой крови в биологических объектах, содержащий амидопирин и этанол, дополнительно содержит ароматический амин, выбранный из группы: солянокислый аналин, парафенилендиалиен, ортофенилендиамин при следующем соотношении компонентов, вес.%:
2
Амидопирин
15-25 Ароматический
0,4-5.0 амин Этанол Остальное
Реактив для определения скрытой крови фиолетово-- сиреневый, если введен анилин, зеленовато-черный в присутствии парафенилендиамина и сине-черный в присутствии ортофенилендиамина.
Окрашивание стойкое, не исчезающее в течение 1 ч. Соотношение компонентов в составе является оптимальным. Меньшие количества снижают чувствительность реактива, а введение большего количества нецелесообразно, так как не влияет на повышение чувствительности.
Для приготовления реактива смешивают сухие вещества: амидопирин и один из вышеперечисленных ароматических аминов в нужной пропорции.
Так, для приготовления основного рабочего реактива берут 20 вес.% амидопирина и 5,0 вес.% анилиза солянокислого, смешивают их, затем до. бавляют 96% этайола и размешивают с те клянной палочкой до полного растворения. Если,ароматическийамин берут в форме основания (орто- и пара-фенилендиамин) к раствору добавляют 1н, соляную кислоту (4-5 вес.%. Если ароматический амин используют в форм кислой соли, добавления... кислоты не требуется. Для проведения, реакции к исследуемому материалу добавляют 1-2 капли {0,05-0,1 мл 7 реактива 1-2 капли окисляющего раствора. Если проба содержит 0,1-0,2% и более крови, немедленно или в течение ближайших 2-х мин появляется окрашивание. Реактив, может бь1ть изготовлен в виде индикаторной бумаги. Пример 1. Реактив содержит вес.%: амидопирин 20, анилин содянокислый 5,0, 96%-ный этанол 75, ;0кисляющий раствор - 3%-ная перекись водорода содержит 40% этанола. На чистое преметное стекло наносят мазок экскрементов, которые необ ходимо исследовать на скрытую кровь На мазок наносят 1-2 капли (0,050,1 мл) реа;ктива и 1-2 капли окисля ющего раствора. В течение 2 мин появляется быстро усиливающееся фиоле тово-сиреневое окрашивание в присут ствии в экскрементах 0,1-0,2% и более крови. Если крови нет, цвет экскрементов и стекающей с них жид. кости не меняется. .Пример 2. Реактив, как в примере 1, окисляющий раствор 3%-на перекись водорода. На инструменты или иной материал, которые помещают в чистую белую кювету, наносят 1-4 капли (0,050,2 мл) реактива и столько же капель перекиси водорода. При наличии скрытой крови не позже чем через 2 мин появляется усиливающееся фиолетово-сиреневое окрашивание. Если крови нет, стекающая с инструментов жидкость остается бесцветной или слегка желтоватой. Пример 3. Реактив содержит вес.%: амидопирин 20, пара-фенилендиамин 0,5 и этанол 79,5. К реактиву добайляют 1н. соляную кислоту 4-5% (1 капля на 1 мл раствора) ОкисляющкА раствор - 3%-ная перекись водо оода, содержащая 40% этанола. 1 .4 На фильтровальную бумагу наносят каплю исследуемой жидкости, в которой 0,1% крови, каплю реактива и каплю окисляющего раствора. В течение 1 мин появляется зеленоватое окрашивание. Пример 4. Реактив содержит, вес.%: амидопирин 20, ортофенилендиамин 5.и этанол 75. К реактиву добавляют 1н. соляную кислоту 4-5%. Окисляющий раствор - 60 вес.% 3%-ной перекиси водорода и 40вес.% этанола. На фильтровальную бумагу наносят последовательно каплю исследуемой жидкости, содержащей 0,1% крови, каплю реактива и каплю окисляющего раствора. В течение 1 мин появляется синее, быстро-чернеющее пятно. Пример 5. Реактивы, как в примере 1. Исследуемая жидкость содержит старую, в значительной степени раз.ложившуюся, кровь в количестве 1:200000 (0,0005%). Во флаконы наливают около 1 мл исследуемой ж щкости, 1 каплю основного реактива и 1 каплю окисляющего раствора. Б течение ближайших 2 мин появляется бледно-сиреневое окрашивание. Предлагаемый ре.актив обладает высокойчувствительностью - 0,1-0,2% позволяет определять следы крови в любом исследуемом материале независимо от того, находится исследуемый материал в пробирке в виде, раствора или эмульсии, или в виде мазка, капли на бумаге, соскоба. Реактив может быть широко применен в различных лечебных учреждениях прост, надежен и удобен в работе и по чувствительности выше известного в 10 раз. Формула изобретения Реактив определения скрытой крови в биологических объектах, содержащий амидопирин и этанол, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности определения, он .дополнительно содержит ароматический амин, выбранHbrii из группы солянокислый анилин, парафёнилендиамин, ортофенилендиа5мин при следующем соотношении компонентов, вес.%: Амидопирин 15-25 Ароматический -амин 0,4-5,0 Этанол Остальное 885881 6 Источники инфохмации, принятые во внимание при экспертизе I. Справочник по клиническим ла5 бораторным методам исследования. М., Медицина, 1975, с. 276-277.
