Способ дифференциальной диагностики серозной и гнойно-деструктивной форм острого пиелонефрита у беременных Советский патент 1992 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно урологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики серозной и гнойнодеструктивной форм острого пиелонефрита у беременных.

Целью изобретения является повышение точности способа и сокращение сроков диагностики.

Указанная цель достигается тем, что в сыворотке крови больных определяют содержание иммуноглобулинов, бета-лизинов, пропердина и при уровне IgA от 1,0 до 2,1 г/л,. IgM от 0.6 до 1,7 г/л, бета-лизинов от 12 до 27%, пропердина от 50 до 105 мг/л диагностируют серозную форму острого пиелонефрита, а при уровне IgA от 2,2 до 4,0 г/л, IgM от 1,8 до 3,5 г/л, бета-лизиноэ от 28

до 46%. пропердина от 110 до 180 мг/л диагностируют гнойно-деструктивную форму острого пиелонефрита у беременных.

Способ осуществляется следующим образом.

У больных сухим стерильным шприцем берут из локтевой вены кровь в количестве 3,0-3,5 мл и выливают в пробирку, которую для ускорения свертывания помещают в термостат при 37°С на 30 мин. После свертывания крови и центрифугирования в течение 10 мин при 2000 об/мин прозрачную сыворотку отсасывают пипеткой и используют для анализа.

Определение иммунохимических показателей проводят общепринятыми методами.

Содержание иммуноглобулинов классов А и М проводят методом простой радиальной иммунодиффузии по Манчини и соавт. на стеклянных пластинах размером 9 х12 см, на которые наносят смесь 3%-ного агара с соответствующими моноспецифическими антисыворотками к иммуноглобулинам крови человека (в данном случае к IgA и IgM) в соотношении 1:1. Толщина слоя агара

1см. На стеклянной пластине размещается 35 лунок диаметром 2 мм. В 12 лунок для построения калибровочного графика вносят

(в трех повторностях) по 2 мкл каждого разведения стандартной сыворотки с известным содержанием иммуноглобулинов (берется исходная неразведенная сыворотка и разведенная в 2,4 и 8 раз). В остальные лунки вносят по 2 мкл испытуемых сывороток, предварительно разведенных 0,9%ным раствором хлорида натрия в соотношении 1:1. Пластины с нанесенными пробами оставляют во влажной камере для инкубации при комнатной температуре для IgA на 24 ч, для IgM на 48 ч. Затем измеряют диаметры зон преципитации, строят калибровочный график на полулогарифмической бумаге и определяют содержание иммуноглобулинов в испытуемой сыворотке. Результат выражают в граммах на литр.

Определение бёта-лизинов проводят ускоренным фотонефелометрическим методом (О.В.Бухарин и соавт.). Для анализа ис пользуют 0.4 мл сыворотки крови. Ход ооределения: 18-20-часовую агаровую тесткультуру сенной палочки (штамм 83. ГКИ им.Тарасевича) смывают 0,75 М раствором сахарозы (рН 6,2) и готовят микробную взвесь, степень мутности которой стандартизируют на фотозлектроколориметре КФК2до величины оптической плотности 0,500 (кювета 3 мм. длина волны 536 мм). В один ряд пробирок (опыт) помещают 0,4 мл микро ной взвеси и 0.2 мл сыворотки крови и проводят инкубацию в термостате при37°С

в течение 2 ч. Во второй ряд пробирок (контроль) вносят 0,4 мл микробной взвеси. 0.2 мл сыворотки крови и 0.6 мл 0.75 М раствора сахарозы и определяют оптическую плотность проб на КФК-2 в кювете с расстоянием между рабочими гранями 3 мм при длине волны 536 мм (зеленый фильтр). В опытные пробы по окончании инкубации также добавляют 0.6 мл 0,75 М раствора сахарозы и измеряют их оптическую плотность. Расчет проводят по формуле

Ек

X 100 % .

Лизис

где ЕК- оптическая плотность контрольных проб;

Еоп - оптическая плотность опытных проб.

Определение содержания пропердина проводят инулииовым методом в модификации, предложенной ГС.Томилка и И.С.Старостиной. Принцип метода заключается в избирательном связывании пропердина инулином с последующим определением в этом пропердин-инулиновом комплексе белка методом Лоури. К 0.5 мл сыворотки крови добавляют равное количество 0.5%ного водного раствора инулина. Смесь инкубируют в термостате при 37°С в течение 1 ч, затем охлаждают в ледяной бане или проточной воде. Образовавшийся комплекс (инулин-пропердин) отмывают охлажденным вероналмединаловым буфером (рН 7.4) с центрифугированием в течение 10 мин при 3000 об/мин. Эту операцию повторяют трижды. Отмытый осадок растворяют в 0,5 мл 0.9%-ного раствора хлорида натрия, после чего проводят определение белка (пропердина) по методу Лоури. Расчет проводят, используя калибровочный график, построенный по нескольким разведениям стандартного раствора альбумина, содержащего 1 мг белка в 1 мл. Результат выражают в миллиграммах на литр.

Результаты обследования больных пиелонефритом беременных женщин приведены в таблице.

Полученные данные свидетельствуют о том. что изученные иммунобиохимические показатели достоверно различаются у больных серозной формой и гнойно-деструктивной формой острого пиелонефрита на фоне беременности. Так. средние уровни IgA, бета-лизинов, пропердина при гнойно-деструктивной форме острого пиелонефрита у беременных превышают аналогичные показатели при серозной форме в 1,7 раза, а средний уровень IgM при гнойно-деструктивной форме превышает таковой при серозной фо0ме более чем а 2 раза.

Приме р 1. Больная Ш.И.П.. 21 год. Беременность 32 нед. Поступила в нефрологическое отделение с жалобами на боли в пояснице справа, ознобы, слабость, дизурию. Больна 3 дня, в анамнезе заболеваний почек нет. При осмотре: температуре 38,6°С. гиперемия лица, АД 120/80, пульс 96 уд./мин. Болезненность при пальпации правой Иочки, резко положительный симптом Пастернацкого, Анализ крови : НЬ 138 г/л,эритроциты 4,1х , лейкоциты 11.3 109/л. палочкоядерные 7%. сегментоядерные 73%, лимфоциты 14%, моноциты j6%. СОЭ 27 мм/ч. Анализ мочи: уд.вес 1012,

лейкоциты 30-60 в поле зрения, эритроциты 1-2 в поле зрения, белок 0,31 г/л, бактерии. Результаты УЗ И: правая почка увеличена в объеме, паренхима утолщена до 1,8 см, полостная система расширена. Диагноз: острый пиелонефрит справа.

Для уточнения диагноза проведены иммунобиохимические исследования. Установлено: IgA 1,46 г/л, IgM 1,6 г/л, бета-лизины 20%, пропердин 83 мг/л. Полученные результаты позволили уточнить диагноз - острый серозный пиелонефрит справа на фоне беременности.

Проведена катетеризация лоханки правой почки, начата массивная антибактериальная терапия. В течение 3 сут температура снизилась, в последующем .нормализовалась. Больная выписана на амбулаторное лечение.

П р и м е р 2. Больная К.Г.Л., 21 гбд. Беременность 29 нед. Поступила в нефрологическое отделение с жалобами на боли в пояснице с обеих сторон, ознобы,высокую температуру. Больна 3 сут, заболевание началось остро, лечилась амбулаторно. При поступлении: температура 39,6°С, кожные покровы бледные, АД 80/40, пульс 140 уд./мин. При пальпации болезненность в проекции правой почки, напряжение мышц живота и поясницы справа, олигоурия. Анализ крови: НЬ 130 г/л, эритроциты 3,8х ,лейкоциты 6,5 10 /л, палочкоядерные 8%, сегментоядерные 79%, лимфоциты 11%, моноциты 3%, СОЭ 65 мм/ч. Анализ мочи без патологических изменений. Поставлен диагноз: острый пиелонефрит. Для уточнения диагноза в соответствии с предлагаемым способом проведено исследование в Сыворотке крови иммуноглобулинов, бета-лизинов, пропердина. Получены данные: IgA г/л, IgM 16 г/л, бета-лизины 28,8%, пропердин 187 мг/л. На основании клинико-иммунобиохимических показателей поставлен уточненный диагноз: острый гнойный пиелонефрит. В связи с этим и отсутствием эффекта от консервативного лечения больная оперирована. Обнаружены карбункулы почек с обеих сторон. В дальнейшем проводилась интенсивная терапия. Больная выписана в удовлетворительном состоянии.

Эффективность данного способа дифференциальной диагностики серозной и гнойно-деструктивной форм острого пиелонефрита у беременных апробирована в клинике урологии и нефрологии Хабаровского медицинского института. Обследованы 134 беременные женщин во втором - третьем триместрах беременности, поступившие в стационар с диагнозом: острый пиелонефРИТ. В результате клинических наблюдений, лабораторных и иммунобиохимических исследований серозная форма острого пиелонефрита выявлена у 64 беременных больных, гнойно-деструктивная форма - у

70 беременных. G помощью предлагаемого способа правильный диагноз был поставлен у 122 из 134 больных, т.е. в 91% случаев.

Таким образом, использование способа дифференциальной диагностики серозной и

гнойно-деструктивной форм острого пиелонефрита у беременных по конкретным уровням иммунобиохимических показателей (иммуноглобулинов А и М, бета-лизинов, пропердина) может служить

надежным тестом для правильнбго и своевременного распознавания этих форм острого пиелонефрита у беременных. Способ прост в выполнении, не требует дефицитных и дорогостоящих реактивов иоборудования и может быть применен в любой клинико-биохимической лаборатории.

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики Серозной и гнойно-деструктивной форм острого пиелонефрита у беременных путем исследования сыворотки крови больных, о тличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, сокращения сроков диагностики, в сыворотке крови больных определяют содержание иммуноглобулинов, бета-лизинов, пропердина и при уровне IgA от 1,0 до 2,1 г/л, IgM от 0,6 До 1,7г/л, бета-лизинов от 12 до 27%, пропердина от 50 до 105 мг/л диагностируют серозную форму острого пиелонефрита, а при уровне IgA от 2,2 до 4,0 г/л, IgM от 1,8 до 3,5 г/л, бета-лизинов от 28 до 46%, пропердина от 110 до 180 мг/л диагностируют гнойно-деструктивную форму острого пиелонефрита у беременных.

П р и м е ч а н и е: В скобках даны границы показателей, используемые для дифференциальной диагностики.

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики серозной и гнойно-деструктивной форм острого пиелонефрита у беременных. Целью изобретения является повышение точности и сокращение сроков диагностики. Цель достигается тем, что в сыворотке крови больных определяют содержание иммуноглобулинов, бета-лизинов, пропердина и при уровне IgA 1,0-2,1 г/л, IgM 0,6-1,7 г/л, бета-лизинов 12-27%, пропердина 50- 105 мг/л диагностируют серозную форму острого пиелонефрита, а при уровне IgA 2,2-4.0 г/л, IgM 1,8-3,5 г/л, бета-лизинов 28-46%, пропердина 110-180 мг/л - гнойно-деструктивную форму острого пиелонефрита у беременных. Положительный эффект способа заключается в повышении точности диагностики до 91 %. 1 табл.•^ ••^^