СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ОСТРОГО ПИЕЛОНЕФРИТА Российский патент 2005 года по МПК G01N33/68 

Изобретение относится к медицине, в частности к урологии, и может быть использовано для объективной оценки форм острого пиелонефрита.

Известен традиционный способ диагностики острого пиелонефрита, предусматривающий анализ клинических проявлений заболевания, лабораторные, ультразвуковые, рентгенологические методы исследований мочевыводящих путей (см. Руководство по урологии под ред. Лопаткина Н.А., Том 2, С.400-431).

Недостатком этого способа является то что, несмотря на возможность постановки диагноза пиелонефрита, он не позволяет диагностировать гнойную форму этого заболевания.

Доказано, что инфекционно-воспалительный процесс в почках приводит к снижению активности специфических и неспецифических защитных факторов.

В настоящее время широко проводится иммунодиагностика у больных на всех этапах лечения пиелонефрита (см. Неотложная урологии и нефрологии, под редакцией А.В.Люлько, 1996, стр.57-58).

Наиболее близким по технической сущности к заявляемому способу по достигаемому эффекту и выбранным в качестве прототипа является способ диагностики острого пиелонефрита путем иммунологических исследований сыворотки крови (см. Тиктинский О.Л., Калинина С.Н., 1996, стр.36-43).

Задачей настоящего изобретения является повышение точности объективной диагностики гнойных и серозных форм пиелонефрита.

Техническим результатом изобретения является определение иммунологических показателей в сыворотке крови, характерных для данного заболевания.

Указанная задача решается за счет того, что в известном способе диагностики острого пиелонефрита путем определения иммунологических показателей в сыворотке крови, согласно изобретению, определяют уровень иммуноглобулина A (Ig А) и уровень трансферрина и при повышении уровня Ig А до 2,99 г/л и уровня трансферрина до 5,97 г/л диагностируют серозную форму пиелонефрита, а при понижении уровня Ig А до 0,9 г/л и уровня трансферрина до 1,29 г/л диагностируют гнойную форму.

Проведенные исследования по патентным и научно-техническим источникам информации показали, что предлагаемый способ не известен, и не следует явным образом из научного уровня техники, то есть соответствует критериям "новизна" и "изобретательский уровень".

Предлагаемый способ можно применить в любой иммунологической лаборатории клиник, поликлиник и отделений урологии, снабженных типовым оборудованием, выпускаемым как отечественной, так и зарубежной промышленностью.

Таким образом, заявляемый способ является доступным, а следовательно, "практически применимым".

Все данные сведены в таблицу:

При определении этих показателей в сыворотке крови отмечается возможность выявления прямой зависимости между активностью воспалительного процесса, то есть, чем выше уровень Ig А и трансферрина, тем менее выражен воспалительный процесс.

Таким образом, снижение уровня Ig А и трансферрина в сыворотке крови свидетельствует об активности (гнойного) воспалительного процесса.

Заявленные способы осуществляются с помощью "TURBOX Utm" (белковый ализатор) - для определения трансферрина и метод Манчини (1995) в модификации Тихомирова А.А. (1977) - для определение иммуноглобулина А.

Для определения иммуноглобулина А использованы реактивы:

1) IgA буфер - 30 мл,

2) IgA пустой буфер - 30 мл,

3) IgA антисывороточный вешество - 2,0 мл,

4) калибратор - 0,5 мл,

5) магнитная карта - 2 prs.

Стеклянные пластины размером 9·12 см покрывают равномерным слоем смеси "агар+моноспецифеческая антисыворотка". Для этого на пластину помешают латунную П-образную рамку толщиной 1 мм, сверху помещают вторую стеклянную пластину, смоченную гидрофобной жидкостью; и пространство между пластинами заливают смесью агара и антисыворотки в количестве 9 мг.

Для получения смеси 3% агар или агаразу на 0,1 вероная-мединаловом буфере рН 8,6 смешивают при 56°С в соотношении 1:1 с антисывороткой, в которой концентрация антител вдвое превышает титр, указанный на ампуле.

В слое агара с антисывороткой пробойником вырезают лунки диаметром 2 мм на расстоянии 15 мм одна от другой. На пластине делают несколько рядов лунок.

В лунке 1-го ряда вносят с помощью микрошприца по 2 мкл стандартной сыворотки неразведенной и в разведенной 1:2, 1:4, 1:8.

Лунки следующих рядов заполняются испытуемыми препаратами.

Пластины инкубируют во влажной камере в течение 24 часов при +4 С, а пластины с антииммуноглобулиновой сывороткой - 48 часов.

По окончании инкубации измеряют диаметр колец преципитации.

Уровень иммуноглобулинов определяют по калибровочной кривой, выражающей зависимость между уровнем иммуноглобулинов и диаметром колец преципитации.

На полулогарифмической бумаге по оси абсцисс откладывают диаметры колец стандартной сыворотки, а по оси ординат - известное количество иммуноглобулина в МЕ/мл, содержащееся в стандартной сыворотке каждого разведения. Образовавшиеся точки соединяют прямой. Таким образом, строят графики для каждого иммуноглобулина в отдельности.

Для определения уровня иммуноглобулинов в испытуемой сыворотке поступают следующим образом.

На оси абсцисс откладывают диаметр кольца преципитации испытуемой сыворотки. Восстанавливают перпендикуляр до пересечения с кривой, и точку пересечения проектируют на ось ординат.

Полученное значение соответствует уровню иммуноглобулина, выраженному в МЕ/мл или МГ/мл.

* Для определения трансферрина использованы реактивы:

1) трансферриновый буфер,

2) пустой трансферриновый буфер,

3) магнитная карта,

4) калибратор (указатель).

Взятую натощак кровь из вены, 3 мл, центрифугируют в течение 5-10 минут при скорости 1500 об/мин, затем берут 2 пробирки, в одну добавляют буфер 0,5 мл, в другую буфер 0,5, который смешен в антисыворотке.

В каждую пробирку добавляют 1:5 трансферрина, легко перемешивают, оставляют на 30 минут при комнатной температуре, затем инкубируют при комнатной температуре, периодически деликатно встряхивая, затем определяют концентрацию трансферрина в сыворотке больного способом торбометрии. Таким способом обследовано 33 больных.

Пример 1: Больная Ш., 18 лет, обратилась в клинику урологии Уральской государственной медицинской академии дополнительного образования с жалобами на боли в правой поясничной области, гипертермию до 39,7°С, озноб в течение 3 суток. Антибактериальной, противовоспалительной терапии не получала.

При обследовании: локально - резкая болезненность в зоне правой почки, положительный симптом Пастернацкого справа, напряжение мышц передней брюшной стенки.

В OAK: лейкоциты - 10,2,10/л, П/Я - 7%, СОЭ - 19 мм/ч.

В ОАМ: лейкоциты - 10-15 в п / зрения,

Бак. пасев: роста нет.

Ультразвуковое исследование: почки без структурных патологий.

Обзорная и экскреторная урографии: без патологии.

Иммунологические показатели: Ig A - 0.8 г/л,

Трансферрин - 1,2 г/л.

Экстренная операция: Ревизия правой почки. Декапсуляция. Иссечение карбункулов.

Диагноз: Острый первичный правосторонний гнойный пиелонефрит (Карбункулы правой почки).

Пример 2: Больная П., 26 лет, обратилась в ГКБ с жалобами на сильные боли в левой поясничной области, гипертермию (до 38-39°С), озноб, слабость, умеренную дизурию. Болела в течение 4-х дней. При поступлении: резкая болезненность в зоне левой почки, положительный симптом Пастернацкого слева.

OAK - лейкоциты=17,0, 10/л, СОЭ -26 мм/ч

ОАМ - лейкоциты - 30-35 в п/зр.. Эр.-8-10.

УЗИ - опущение левой почки. Киста верхнего полюса правой почки (2,5 см).

Обзорная и экскреторная урографии: теней конкременты не выявлено. Функция обеих почек своевременная. Нефроптоз слева 1-П стадии.

Иммунологические исследования:

IgA-3,1 г/л

Трансферрин - 6,0 г/л

В связи с отсутствием эффекта от консервативной терапии в течение 3-х суток, решено в экстренном порядке оперировать. Ревизия. Декапсуляция левой почки. Биопсия. Диагностирован острый серозный пиелонефрит.

Гистологические исследования - острый серозный пиелонефрит.

Таким образом, заявленный способ диагностики позволяет более точно поставить диагноз.

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для объективной оценки форм острого пиелонефрита. Для осуществления способа диагностики острого пиелонефрита в сыворотке крови определяют уровень иммуноглобулина А(Ig A) и уровень трансферрина. При повышении уровня IgA до 2,99 г/л и трансферрина до 5,97 г/л диагностируют серозную форму пиелонефрита. При понижении уровня IgA до 0,9 г/л и трансферрина до 1,29 г/л диагностируют гнойную форму пиелонефрита. Показатели нормы составляют для IgA 1,7 г/л, для трансферрина - 3,1 г/л. Способ позволяет повысить точность диагностики. 1 табл.

Способ диагностики острого пиелонефрита путем определения иммунологических показателей в сыворотке крови, отличающийся тем, что определяют уровень иммуноглобулина А (IgA) и трансферрина, и при повышении уровня IgA до 2,99 г/л и трансферрина до 5,97 г/л диагностируют серозную форму пиелонефрита, а при понижении уровня IgA до 0,9 г/л и трансферрина до 1,29 г/л диагностируют гнойную форму пиелонефрита при норме для IgA 1,7 г/л и для трансферрина 3,1 г/л.