Способ прогнозирования течения острого гломерулонефрита Советский патент 1992 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к медицине, а именно к нефрологии, и может быть использовано для прогнозирования течения острого гломерулонефрита (ОГН).

Целью изобретения является повышение точности прогнозирования течения ОГН.

Поставленная цель достигается тем, что при способе прогнозирования течения ОГН в зависимости от особенностей фенотипа HLA (т.е. наличия в фенотипе тех или иных антигенов гистосовместимости) на лимфоцитах периферической крови выявляют антигены гистосовместимости системы HLA (два по локусу А и два по локусу В) и при наличии в фенотипе антигенов А1, А2. A3.

А28. В7. В8. В35 вычисляется прогностический показатель по формуле

Р 0.886А1 + 0.857А2 + 0.314АЗ 0,343А28 - 0.286В7 - 0.629В35 - 0.286В8 0.4А2В8-0.286А2В35-0.343, где Р - значение прогностического показателя:

А1 i А2. A3.... - антигены гистосовместимости;

0,886. 0.857.... - коэффициенты;

0.343 - константа.

и при значении Р О прогнозируют выздоровление, а при Р О - хроническое течение заболевания.

В связи с чрезмерной полиморфностью HLA-антигенов. характеризующих иммуногенетические особенности индивида, и редчайшей повторяемостью фенотипа у людей способ может быть использован для индивидуального прогнозирования течения ОГН.

Способ осуществляется следующим образом.

Типируют лимфоциты периферической крови с помощью микролимфоцитотоксичаского теста.

Из периферической крови выделяют лим.фоциты в градиенте плотности верографина (d 0,10771 Клеточную взвесь в концентрации 2 X раскапывают по 1 мкл в лунки микрокамер для иммунологических реакций с заранее раскапанными типирующими HLA-активными сыворотками типирующей панели. Спустя 30 мИн, в каждую лунку в качестве комплемента добавляют по 5 мкл нормальной кроличьей сыворотки. Спустя 60 мин. содержимое планшеты вытряхивают и окрашивают оставшиеся в лунке лимфоциты 0,1%-ным раствором трипановой сини в течение 10 мин. Затем краску вытряхивают и лунки подвергают микроскопированию для учета лимфоцитотоксического эффекта.

Учет производят по проценту окрашенных (т.е. погибших) лимфоцитов: 0-15% цитотоксический эффект отсутствует, 1620% - цитотоксический эффект на один плюс, 21-50% - на два плюса, 51-75% - на три плюса, 76-100%-начетыре плюса. HLAфенотип определи ют. путем выявления антигенов HLA локусов А и В. согласно специфичности тех сывороток, которые произвели аффект не менее чем на два плюса.

При предлагаемом способе используют прогностический показатель, предложенный в 1978 г. Е.В.Гублером для выяснения возможности дифференциальной диагностики угрожающих состояний с помощью вычислительных методов. Прогностический показатель в позиции Р 0 не использовался 8 связи с тем, что в точке О сосредоточены ошибки, снижающие прогностическую способность способа. Коэффициенты, присутствующие в формуле, являются постоянной величиной для каждого иммунологического показателя, выявленной эмпирическим путем, Константа 0,343 введена в формулу для облегчения рассчетов, так как прогностический показатель удобнее сравнивать с нулем. При наличии в фенотипе больного перечисленных в формуле антигенов HLA в формулу соответственно каждой позиции вводится цифра 1, а при отсутствии этих антигенов - О.

Пример 1. Больной В., 24 года, инженер, поступил в клинику с диагнозом

ОГН, нефротический синдром. Диагноз подтвержден клинически и морфологически (пролиферативный гломерулонефрит, тубулярный компонент). Установлен следующий

набор Н1А-антигенов:А2, AID; В17,В40.

Был вычислен прогностический показатель по предлагаемому способу: Р +0,514, В связи с тем, что Р О, прогнозировали выздоровление. Действительно, в результате проведенной иммуносупрессивной терапии (преднизолон, максимальная доза 60 мг/сут) наступила клинико-лабораторная ремиссия, Н;аблюдение за больным в течение 4 лет дает основание расценивать дан5 ную ремиссию как выздоровление.

В то же время ретроспективный анализ показал, что концентрация IgG, М и А в сыворотке больного в момент обследования была следуюа(ей: G 7,1 г/л, М 1,1 г/л, А 1.,13

0 г/л, на основании чего можно установить, следуя прототипу, неблагоприятный прогноз.

Таким образом,, данный пример свидетельствует о повышении точности способа.

5Прим ер 2. Больной В., 27 лет, рабочий, поступил в клинику с диагнозом ОГН-, нефротический синдром, артериальная гипертензия, гематурия. Диагноз подтвержден клинически и морфологически

0 {пролиферативный ГН, тубулоинтерстициальный компонент). Фенотип HLA следующий: А1, А2; В8, В17. Расчет прогностического показателя выявил Р -1,058

5 Поскольку прогностический индекс оказалсяменьше О, был установлен согласно предлагаемому способу отрицательный прогноз. Как оказалось в дальнейшем, применяемая иммуносупрессивная терапия

0 глюкокортикоидами и иммуномодулирующая терапия декарисом не смогли изменить прогрессирования заболевания. Через году больного ухудшились функциональные показатели почек и произошла трансформация ОГН в быстропрогрессирующий гломерулонефрит, который еще через 11 мес. завершился летально. Однако проведенный анализ концентрации иммуноглобулинов в сыворотке свидетельствует о том,

0 что она была выше нормы (G 11,3 г/л, М 1,6 г/л, А 1,7 г/л), в связи с чем, согласно прототипу, прогноз должен был быть благоприятным. Таким образом, в данном случае точный прогноз также был установлен пред5 лагаемьы способом.

Необходимость и достаточность всех признаков была подтверждена при ретроспективном прогнозировании 300 брльных ОГН и проспективном прогнозировании 100 больных ОГН. Было выявлено, что без учета

хотя бы одного из перечисленных антигенов (вне зависимости от того, сколько из них в фенотипе представлены),диагностическая ценность способа уменьшается, в связи с чем увеличивается число ошибочных прогнозов. Аналогично этому число ошибок возрастало при внесении других, кроме указанных, HLA-антигенов.

Специфичность способа подтверждается тем, что данная формула определения прогноза может быть использована только для прогнозирования исхода ОГН. При попытке прогнозировать исход других заболеваний данный :Метод оказался несостоятельным, что связано с различной частотой распределения антигенов HLA при других заболеваниях.

В таблице приведены данные распределения HLA у больных при пиелонефрите и заболевании кожи - вульгарной пузырчатке (данные приводятся по материалам лабораторной иммунологии Киевского НИИ урологии и нефрологии)..

Как видно из таблицы, частота встречаемости антигенов, участвующих в вычислеНИИ прогностического показателя при ОГН, при других заболеваниях иная, что обусловливает их иное взаимодействие при определенной патологии. Таким образом, при

различных патологических процессах формируется другая группа антигенов, существенно влияющих на патогенез и исход заболевания..

Таблица является подтверждением того, что данный показатель информативен только при прогнозировании исхода ОГН,

Всего по предлагаемому способу было обследовано 400 больных ОГН. В 83,3% случаев прогноз был установлен правильно. По способу-прототипу правильный прогноз ус-, тановлен лишь у 48,5% больных ОГН. Таким образом, точность прогнозирования повысиласьна 34,5%.

Формула изобретения

Способ прогнозирования течения острого гломерулонефрита путем исследова-ния крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности прогнозирования, на лимфоцитах периферической крови выявляют антигены гистосовместимости системы HLA А1, А2, A3, А28, В7..В8 и В35 с последующим вычислением прогностического показателя по формуле и при его значении больше О прогнозируют выздоровление, а при его значении меньше О прогнозируют хроническое течение заболевания.

Изобретение относится к медицине, а именно к нефрологии. Целью изобретения является повышение точности прогнозирования исхода острого гломерулонефрита. Цель достигается тем. что течение острого гломерулонефрита прогнозируют по антигенам гистосовместимости системы HLA. которые определяются в цитотоксической реакции между типирующими HLA-активными лимфоцитотоксическими сыворотками и лимфоцитами крови и используются для определения результата прогностического niO- казателя по формуле Р = 0,886А1 + 0,857А2 + 0.314АЗ - 0,343А28 + 0.286В7 - 0.629В35 - 0,28688 - 0,4А2В8 - 0.286А2В35 - 0.343. и при значении прогностического показателя Р >& О устанавливают благоприятный исход с выздоровлением, а при значении прогно^ стического показателя Р < О предполагают неблагоприятный прогноз с исходом в хронический гломерулонефрит. Положительный эффект способа состоит в повышении точности прогнозирования с 48,5 до 83.3%. 1 табл.Ё