Способ заражения овец сибирской язвой Советский патент 1992 года по МПК C12Q1/00 

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии и может найти применение в научно-исследовательских учреждениях для определения этиологической роли микроорганизмов и изучения патогенеза заболевания, а- также на предприятиях по производству специфических биологических препаратов (вакцин, сывороток) для контроля их иммунологической активности.

Известен способ заражения овец сибирской язвой, при которой споровую йорму возбудителя скармливают животному с кормом или втирают его в слизистую оболочку ротовой полости.

Недостатком известного способа является то, что в естественных условиях содержания животных, нельзя дать

объяснения о причинах появления сильных травм на слизистых оболочках в период эпи-зоотии на большом контингенте животных. Кроме того, в условиях эксперимента локальная форма сибирской язвы была вызвана у свиней лишь при наличии у них сильной травмы слизистой оболочки ротовой полости. При нормальном состоянии слизистой или ее легкой травме эксперимен- та.льно заразить Тки вот ных не удалось.

t,

Известен также способ ;заражения овец сибирской язвой после предварительной травматизации слизистой ро

товой полости и языка с добавлением столченного стекла в инфицированный корм животных.

VJ XI

со со

V4

Недостатком Дсжного способа явпя- ется то, что лаже при наличии травма- тмческих повреждений слизистых оболочек и использовании столченного стек- па - заразить животных сибирской язвой исследователям не удалось.

Кроме того, известен способ заражения овец сибирской язвой путем пе- рорального заражения животных при различных катаральных состояниях и дисбактериозах органов пищеварения.

Недостатком данного способа является то, что в естественных условиях объяснить этиологию катарального соетояния и дисбактериоза органов пищеварения у животных в период эпизоотии невозможно. Кроме того, нет 100% летальности у подопытных животных-от сибирской язвы при данном способе заранения (64% при заражении через зонд и при выпаивании пипеткой).

Целью изобретения является повышение эффективности способа заражения.

Это достигается тем, что заражают овец 5-6-месячного возраста суспензией , содержащей.

2 млрд. микробных клеток культуры возбудителя,

15 г стерильной, мелкоистолченной, пылевой почвы,

100 мг, воды.

В подготовительном этапе, перед проведением комиссионного эксперимента, проводилась подтитровка трехком- понентов смеси:

количества стерильной, мелкоистолченной, пылевой почвы,

количества воды,

количества микробных клеток сиби- реязвенной культуры.

Подтитровку проводили на 15 кроликах с живой массой кг и овцах казахской полутонкоруиной породы, в возрасте месяцев с живой массой кг.

Исходная смесь для проведения заражения кроликов состояла из 6 мл воды, 1 г почвы к которой добавляли 500 тыс. микробных клеток вирулентной сибиреязвенной культуры. При про ведении подтитровки компонентов микробной взвеси провели 5 опытов на кроликах. Результаты данных экспериментов отражены в табл. 1.

При проведении подтитровки компо- нентов микробной взвеси на овцах, исходным показателем для проведения орального заражения - был взят за ос

5 0

5

0

д

Q

5

5

0

нову показатель орального заражения кроликов, который состоял из 30 мл воды, 5 г стерильной, мелкоистолченной, пылевой почвы и 1,5 млод микробных клеток вирулентной, сибиреязвенной культуры. Результаты экспериментов отражены в табл. 2.

В результате проведенных исследовании выявили следующие заражающие дозы компонентов микробной взвеси (табл. 3).

Пример 1. Лести кроликам с живой массой 3-4 кг готовили взвесь состоящую из 30 мл воды и 5 г стерильной, мелкоистолченной пылевой почвы. Вышеуказанную смесь тщательно перемешивали и задавали через рот с помощью зонда. Через 48 часов, после дачи вышеуказанной смеси, произвели забой кроликов, в результаты которой выявили серозно-катаральное воспаление слизистой оболочки тонкого и толстого отдела кишечника, а такие точечные кровоизлияния в месте перехода тонкого в толстый отдел кишечника. При наблюдении за оставшимися тремя кроликами в течение 10 дней никаких отклонений в физиологическом состоянии животных, видимых визуально - ненаблюдали, Температура тела колебалась в пределах нормы.

Пример 2. Семи кроликам с живой массой 4-5 кг задавали через рот микробную взвесь споровой формы вирулентной сибиреязвенной культуры, в дозе 1,5 млрд микробных клеток в 30 мл воды. В течение 10 дневного наблюдения за животными, видимых визуально клинических нарушений функции органов желудочнокишечного тракта - не наблюдали. Аппетит у животных сохранялся. Температура тела колебалась в пределах нормы. Появление возбудителя в крови не регистрировали.

Пример 3. иести кроликам с живой массой 4-5 кг в день заражения готовили взвесь, состоящую из 30 мл воды + 5 г стерильной, мелкоистол- ченной, пылевой почвы, к которой добавляли 1,5 млрд микробных клеток вирулентной сибиреязвенной культуры. Вышеуказанную смесь тщательно перемешивали и задавали через рот с помощью зонда. 1

Аппетит у лабораторных животных сохраняйся. Повышение температуры тела у кролик. 1 г-к.люцали на oiopi- e сутки, которая у отдельных животных доходила до 39,1 - 41° С. Затем наблюдали постепенное понижение температуры тела до Зб,(°С, Появление возбудителя в крови регистрировали через 28-3& часов после заражения. Смерть животных наступала через 8-72 часа от сибирской язвы. Диагноз подтвержден микроскопическими и бактериологическими методами исследовании.

Пример

h

Трем овцам в возрасте месяцев, с живой кассой 25- 35 кг индивидуально задавали через рот взвесь, состоящую из 100 мл воды и 15 г стерильной, мелкоистолченной, пылевой почвы. В течение 10 дней проводили клинические наблюдения за овцами, при этом измеряли температуру тепа, частоту пульса и дыха чип, которые были в пределах Физиологичес- кой нормы. Видимых визуально клинических нарушений функции органов желудочно-кишечного тракта не наблюдали .

Пример 5. Трем невакцинированным опцам в возрасте 5-6 месяцев, с живой массой 23-35 кг в день заражения готовили взвесь, состоящую из 100 мл воды и 2 млрд микробных клеток вирулентной сибиреязвенной культуры. Вышеуказанную смесь тщательно перемешивали и задавали через рот. Появление возбудителя в крови не регистрировали. Температура тела была в пределах нормы, Наблюдения за животными вели в течении 10 дней. Подопытные овцы сибмрсой язвой не заболели.

Пример 6. Шести невакциняро- ванным овцам в возрасте 5-6 месяцев и с живой массой 25-35 кг в день за- решения готовили взвесь, состоящую, из 100 мл воды + 5 г стерильной, мелкомс ол1 Онной, пылево добавпяли 2 млрд. мик вирулентной сибиреязв Вышеуказанную смесь т мешивали и задавали ч ление возбудителя в к ровали через 20-М ча ра тела у отдельных ж малась до 41,1 - 2°С вотных сохранялся. См от сибиоской язвы в т сов после дачи микроб агноз подтвержден мик и бактериологическими дования .

Таким образом, тол нии животным перораль формы микробной взвес сибирской язвы в смес ной, мелкоистолченной вой удается воспроизв ное заражение животны вой .

Способ позволяет и нез и эпизоотический тия болезни, на основ будет разработать доп филактические меропри

15

20

25

30

формула

о

35

40

Способ заражения о

лзвой путем персральн культуры возбудителя, ц и и с я тем, что, ния эффективности спо приближения к естеств заражения, заражают о гс возраста суспензие 2 млрд„ микробных кле возбудителя, 15 г сте истолченной, пылевой

воды.

Таблица Результаты подтитровки компонентов микробной взвеси на кроликахз

78187 . 6

комс ол1 Онной, пылевой почвы. К ней добавпяли 2 млрд. микробных клеток вирулентной сибиреязвенной культуры. Вышеуказанную смесь тщательно перемешивали и задавали через рот. Появление возбудителя в крови регистрировали через 20-М часов. Температура тела у отдельных животных поднималась до 41,1 - 2°С. Аппетит у животных сохранялся. Смерть наступала от сибиоской язвы в течение й-89 часов после дачи микробной взвеси. Диагноз подтвержден микроскопическими и бактериологическими методами исследования .

Таким образом, только при введении животным перорально, споровой формы микробной взвеси возбудителя сибирской язвы в смеси со стерильной, мелкоистолченной, пылевой почвой удается воспроизвести перораль- ное заражение животных сибирской язвой .

Способ позволяет изучить патогенез и эпизоотический процесс развития болезни, на основе которой можно будет разработать дополнительные профилактические мероприятия.

10

15

20

25

30

формула

обретения

Способ заражения овец сибирской

лзвой путем персрального введения культуры возбудителя, отличаю ц и и с я тем, что, с целью повышения эффективности способа за счет приближения к естественным условиям заражения, заражают овец 5 6-месячно- гс возраста суспензией, содержащей 2 млрд„ микробных клеток культуры возбудителя, 15 г стерильной, мелкоистолченной, пылевой почвы и 100 мл

1

Использование: ветеринарная микробиология, сибирская язва, контроль активности биопрепаратов. Сущность изобретения: культуру возбудителя сибирской язвы задают орально овцам в смеси со стерильной, мелкорастолченной, пылевидной почвой. Способ обеспечивает естественное воспроизведение заболевания и повышает его надежность, 3 табл. ё

1 2 3 k

Таблица 2

Результаты подтитровки компонентов микробной взвеси на овцах

Вид животных Поды (мл) (Почвы (г) Микробных клеток

Кролики30,05,01,5 млрд.

Овцы100,015,01,7 - 2,0 млрд.

Таблица 3