Способ получения средства, обладающего антимикробной активностью Советский патент 1993 года по МПК A61K35/78 

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается получения лекарственных препаратов растительного происхождения.

Целью изобретения является расширение спектра действия за счет противовоспалительной и антиоксидантной активности и усилении специфической активности.

Поставленная цель достигается экстракцией отходов производства розмарина лекарственного (Rosmarinus officinalis L) после получения эфирного масла розмарина способом гидродистилляции (шрот), сырье измельчают, проводят вихревую экстракцию горячей водой при температуре 80- 100°С в течение 3 ч, фильтруют, дозированно расфасовывают, подвергают лиофилизации (сублимации) в интервале температур от -25 до 45°С и давлении 1 атм

(замораживатель марки ZA 650/40(50) (ЧССР), сублиматор марки TG - 50 4 (ГДР), укупоривают и получают сухой целевой продукт,

П р и м е р 1, 50,0 кг шрота розмарина лекарственного измельчают, заливают 500,0 кг горячей воды при температуре 70- 80°С, проводят вихревую экстракцию в течение 3 ч, извлечение фильтруют, дозированно расфасовы вают, подвергают сублимации в интервале температур от (-25) до 45°С и давлении 1 атм (замораживатель марки ZA 650/40(50) (ЧССР), сублиматор марки TG - 50 4 (ГДР), укупоривают. Получают 9,9 кг светло-коричневого легкого аморфного порошка. Выход целевого продукта поданному способу составляет 19,8%.

П р и м е р 2. 50,0 кг шрота розмарина лекарственного измельчают, заливают

VI

Ч)

g

СО

СА)

500,0 кг горячей воды при температуре 80- 90°С, проводят вихревую экстракцию о течение З Ч, извлечение фильтруют, дозированно расфасовывают, подвергают сублимации в интервале температур от (-25) до 45°С и давлении 1 атм (замораживатель марки ZA 650/40(50)(ЧССР), сублиматор TG- 50 4 (ГДР), укупоривают. : Получают 10,0 кг светло-коричневого легкого аморфного порошка, Выход целевого продукта по данному способу составляет 20,0%.

П р и м е р З. 50,0 кг шрота розмарина лекарственного измельчают, заливают 500,0 кг горячей воды при температуре 90- 100°С, проводят вихревую экстракцию в течение 3 ч, извлечение фильтруют, дозированно расфасовывают, подвергают сублимации в интервале температур от (-25) до 45°С и давлении 1 атм (замораживатель марки ZA 650/40(50) (ЧССР), сублиматор марки TG -50 4 (ГДР), укупоривают.

Получают 10,0 кг светло-коричневого легкого аморфного порошка. Выход целевого продукта по данному способу составляет 20,0%.

П р и м е р 4, 50,0 кг шрота розмарина .лекарственного измельчают, заливают горячей водой при температуре 100°С, проводят вихревую экстракцию в течение 4 ч, извлечение фильтруют, дозированно расфасовывают, подвергают сублимации в интервале температур от (-25) до 45°С и давлении 1 атм (замораживатель марки ZA - 650/40(50) (ЧССР), сублиматор марки TG - 50 4 (ГДР), укупоривают,

Получают 10,0 кг светло-коричневого легкого аморфного порошка, Выход целевого продукта по данному способу составляет 20,0%.

Влияние кратности экстракции на выход целевого продукта представлено в табл,1.

Влияние температуры и времени экстракции на выход целевого продукта представлено в табл. 2.

Идентификация препарата проводилась методом хроматографического анализа и качественными реакциями Состав препарата: флавоноиды, дубильные вещества, тритерпеноиды, фенолокислоты, розмариновая и никотиновая кислоты, аминокислоты и минеральные элементы.

Исследование стабильности препарата и установление срока годности в процессе хранения проводили по количественному содержанию биологически активных веществ (флавоноиды и дубильные вещества), исследованию структурно-механических и физико-химических параметров, а также биологической активности. Установлено, что сублимат из шрота розмарина лекарственного сохраняет свои биологические свойства в течение 3-х лет (срок эксперимента).

Изучение биологической активности проводилось с использованием общепринятых информативных тестов.

Антимикробную активность исследовали методом серийных разведении препарата в диапазоне от 62 до 2000 мкг/мл, в питательном агаре.Контролем служили аналогичные питательные среды не содержащие и содержащие растворитель, но не влияющие на жизнедеятельность тест-культур.Микробная нагрузка составляет 100 млн мкг/мл суточной культуры. Инкубация осуществляется в термостате при37°С. Наблюдение вели в течение 2-х суток, Антимикробное действие проверялось на 50

штаммах представителей кокковой, кишечной, спорообразующей и грибковой флоры, Staphylococc.us-1, Streptococcus-4, Ps, aeruglnosae-15, Proteus-2, Provldencla-1, Morganella-1, Esch. , Sa monelia-5,

Shcigeila-3, Citrobacter-2, Serratli-5, Mlcrococcus-luteus-7, Klebstella-1, Candlda- 1.

Наиболее чувствительным к действию сублимата из шрота розмарина лекарственного оказались 1-17 культуры, приведенные в табл.3, чувствительность остальных лежит в пределах 500-2000 мкг/мл. Препаратсрав- нения хлорофиллипт активен только в отношении Staphylococcus,

Было установлено, что сублимат из шро- т-з розмарина лекарственного обладает противовоспалительной активностью. Противовоспалительную активность исследовали на формалиновой и каррагениновой

моделях воспаления у белых мышей обоего пола массой 16-18 г. в дозе 100 мг/кг. Установлено, что противовоспалительная активность сублимата из шрота розмарина лекарственного сравнима с официальными

препаратами,

Результаты исследований представлены в таблице 4.

Было также установлено, что сублимат из шрота розмарина лекарственного обладает антиоксидантной активностью и по действию превышает действие витамина Е. Так, скорость снижения малонового диаль- дегида в условиях нашего опыта составила у витамина Е 54.9 иМ МДА/г с, а у сублимата из шрота розмарина лекарственного - 109.4 нМ МДА/г с, или 200% по отношению к препарату сравнения.

Определение токсичности по Kerbery показало, что введение сублимата из шрота

розмарина лекарственного в дозе 4000 мг/кг не вызывает гибели животных, что указывает на его безвредность.

Таким образом, заявляемый способ позволяет получить дозированное средство, отличающееся постоянством состава (срок годности 3 года) и широким спектром биологического действия, а именно антимикробной (в т.ч. против Ps. aeruginosae), противовоспалительной и антиоксидантной активностью, что обеспечивает его широкое применение в медицине. При этом прбисхо- дит расширение спектра и усиление специфической активности препарата в сравнении с хлорофиллиптом, амидопирином и витамином Е.

Использование: изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается способа получения средства, обладающего антимикробной активностью. Целью изобретения является расширение спектра действия за счет противовоспалительной и антиоксидантной активности, а также усиление специфической активности. Сущность изобретения заключается в вихревой экстракции шрота розмарина лекарственного после получения эфирного масла розмарина методом гидродистилляции при температуре 80-100°С в течение 3 ч при соотношении сырья и экстрагента 1:10, а сублимацию проводят при температуре от (-25) до 45°С и давлении 1 атм. Положительный эффект заключается в получении препарата, одновременно обладающего высокой антимикробной, противовоспалительной и анти- оксидантной активностью на уровне активностей у аналогичных синтетических препаратов. 4 табл.

Формула изо б. ре тения Способ получения средства, обладающего антимикробной активностью путем экстракции растительного сырья, фильтрации и сушки, отличающийся тем, что, с целью расширения спектра действия за счет противовоспалительной и антиоксидантной активности, а также усиления специфической активности, в качестве растительного

Влияние кратности экстракции на выход целевого продукта

Влияние температуры и времени экстракции на выход целевого продукта

сырья используют шрот розмарина лекарственного (Rosmarlnus offlclnalis) после получения эфирного масла розмарина методом гидродистилляции, вихревую экстракцию проводят при температуре 80-100°С в течение трех часов при соотношении сырье: экс- трагент 1:10, а сублимацию проводят при температуре от (-25) до 45°С и давлении 1 атм.

Т а б л и ц а 1

Т a G л и ц а 2

Антимикробная активность сублимата из шрота розмарина лекарственного и хлорофиллипта

Тест - культура

Противовоспалительная активность сублимата из шрота розмарина лекарственного (М ±гл,

п-7)

ТаблицаЗ

Антимикробная активность, мкг/мл

Сублимат из шрота розмари- на лекарственного

Хлорофиллипт

125 250 250 250 не активен

Таблица 4