ную на две части полупроницаемой мембраной; помещают раствор антигена, через который пропускают постоянный электрический ток в определенном режиме.
Изучение иммуностимулирующих свойств антигена приводят путем иммунизации животных и последующей оценки им- муногенностипо изменению титров антител в сыворотках крови. Антигенную активность антигена оценивают методом иммунофер- ментного анализа (ИФА) в реакциях со стандартными диагностическими сыворотками. В качестве антигенов используют антиген, не обработанный электрическим током, и антиген, полученный после электрохимической обработки из катодной части камеры.
По сравнению с прототипом предлагаемый способ повышения иммуногенности антигенов имеет следующие преимущества: 1) повышение специфической активности антигена не сопровождается введением в организм дополнительных, балластных белков (антигенов); 2) сохраняются биологические свойства антигена; 3} повышение специфической активности антигена осуществляется в короткие сроки (5-30 мин).
Изобретение иллюстрируется следующими примерами..
П р и м е р 1. Аллантоисную жидкость, содержащую вирус гриппа А/Ленинг- рад/92/17/89 (НШ1). титр ГА 1:64, в количестве 9 мл помещают в катодную часть камеры, разделенной полупроницаемой мембраной, в анодную часть помещают 9 мл раствора нормальной адлантоисной жидкости куриных эмбрионов. В течение 5 мин пропускают постоянный электрический ток силой 15мА, напряжением 6 В. В дальнейшей работе испол ьзуют раствор антигена из катодной части камеры. Две группы животных (белые мыши) иммунизируют под эфирным наркозом по 0,3 мл внутрибрю- шинно: вируссодержащей жидкостью, не прошедшей и прошедшей обработку электрическим током. Сыворотки крови животных исследовали в реакции торможения ге- магглютинации (РТГА) на наличие специфических антител спустя 5 недель от
момента иммунизации. РТГА ставили по общепринятой методике в плексиглассовых пластинах с 1% взвесью куриных эритроцитов в изотоническом растворе хлорида натрия. Данные РТГА (табл.1) свидетельствуют
о том, что иммуногенная активность вируса гриппа А/Ленинград/92/17/89, обработанного электрическим током, в 2,35 раза превышает иммуногенкую активность необработанного вируса.
П р и мер 2, Стандартный токсоплаз- менный антиген из.ИФА-тест-системы в рабочем разведении разделяют на две части: одну часть оставляют в качестве контроля, а вторую часть подвергают обработке постоянным электрическим током. 10 мл раствора антигена помещают в катодную часть камеры, разделенной полупроницаемой мембраной, в анодную часть помещают 10 мл фосфатного буфера. В течение 10 мин
пропускают постоянный электрический ток силой 2мА напряжением 2 В. Раствор из катодной части камеры отбирают, выдерживают 3 ч при4°С и используют в дальнейшей работе. Одну половину планшеты для ИФА
сенсибилизируют .необработанным раствором токсоплазменного антигена, другую половину - обработанным раствором антигена. После инкубации в течение 16 ч при 4°С и отмывки, в лунки планшета вносят
контрольные сыворотки: положительную и отрицательную. Учет результатов проводят на аппарате Мультискан МСС/340 Р. Результаты опыта (табл.2) свидетельствуют о том, что специфическая активность ооработайного электрическим током токсоплазменного антигена по выявлению специфических антител достоверно превышает соответствующую активность необработанного антигена в 1,5-2 раза.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТЕТРАВАЛЕНТНОЙ СУБЪЕДИНИЧНОЙ ПРОТИВОГРИППОЗНОЙ ВАКЦИНЫ | 2019 |
|
RU2740751C1 |
| ВАКЦИНА ПРОТИВ ГРИППА И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ | 2010 |
|
RU2446824C2 |
| ВАКЦИНА ПРОТИВ ГРИППА | 2014 |
|
RU2546861C1 |
| Пентавалентная субъединичная вакцина против респираторных инфекций и способ ее получения | 2022 |
|
RU2804948C2 |
| ИММУНОГЕННАЯ КОМПОЗИЦИЯ | 2005 |
|
RU2308289C2 |
| РЕАССОРТАНТНЫЙ ШТАММ ВИРУСА ГРИППА RN9/13-HUMAN A(H6N9) ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К НЕЙРАМИНИДАЗЕ ПРИ ГРИППОЗНОЙ ИНФЕКЦИИ И ВАКЦИНАЦИИ | 2014 |
|
RU2587629C1 |
| ВАКЦИНА ПРОТИВ ВИРУСА ГРИППА И СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ | 2000 |
|
RU2164148C1 |
| СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ИНАКТИВИРОВАННОЙ ЭМУЛЬГИРОВАННОЙ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ГРИППА ПТИЦ И ВАКЦИНА ИНАКТИВИРОВАННАЯ ЭМУЛЬГИРОВАННАЯ ПРОТИВ ГРИППА ПТИЦ | 2008 |
|
RU2358760C1 |
| РЕКОМБИНАНТНАЯ ТРЕХВАЛЕНТНАЯ ВАКЦИНА ОТ ГРИППА ЧЕЛОВЕКА | 2012 |
|
RU2485973C1 |
| Штамм вируса гриппа ГКВ N 2263, используемый для приготовления диагностических препаратов | 1991 |
|
SU1756353A1 |
Формула изобретения Способ повышения иммуногенности антигенов, включающий иммунизацию животных предварительно обработанным антигеном, отличающийся тем, что, с
целью ускорения способа, антиген, помещённый в катодную часть камеры, отделенную полупроницаемой мембраной, обрабатывают постоянным электрическим током.
Таблица
Уровень антигемагглютининов в сыворотках крови животных после иммунизации вирусом гриппа А/Ленинград/92/17/89, прошедшим и не прошедшим обработку
электрическим током
Т а б л и ц а 2
Результаты ИФА при использовании в тест-системе обработанного и необработанного электрическим током токсоплазменных антигенов
П р и м е ч а н и е: Контроль антигена (с отрицательной сывороткой): необработанный - 0,069 обработанный- 0,060
