Способ антиоксидантной терапии Советский патент 1993 года по МПК A61K31/375 

Изобретение относится к медицине, в частности к проведению антиоксидантной терапии при состояниях, сопровождающихся нарушениями окислительно-восстановительных процессов в организме.

Известно использование унитиола и аскорбиновой кислоты как в отдельности, так и в сочетании для антиоксидантной терапии.

Наличие в молекуле унитола двух суль- фгидрильных групп-с ослабленной связью S-H и подвижного атома водорода, наделяет его выраженными антиоксидантными свойствами. Препарат способствует повышению уровня восстановленных тиолов, концентрации эндогенных низкомолекулярных тиолов (регенерация глютатиона), через глютатион, а также и непосредственно, способствует регенерации аскорбиновой кислоты (АК) (восстановление ДАК); активирует глютатион редуктазу; способен подвергать восстановительному расщеплению доступные белковые SS-группы; по принципу хе- латных связей или комплексообразования связывает избыток металлов с переменной валентностью, катализирующих окисление (медь, железо); восстанавливает окисляющие агенты; сдвигает редокс-потенциал в сторону превалирования восстановленных эквивалентов в небелковой тиол-дисуль- фидной и аскорбатной окислительно-восстановительных системах, что способствует стабилизации структур; обладает гидрофильными и гидрофобными свойствам, чем обеспечивается возможность проявления антиоксидантной активности препарата как в водной, так и липидиой фазах клетки.

Выраженные антиоксидантные свойства аскорбиновой кислоты обусловлены наличием в ее молекуле диенольной группы (). В частности, аскорбиновая кислота предохраняет гемоглобин от окисления и влияет на связывание гемоглобином кислорода, восстанавливает

00

о

Ј

00

ю

адреналин, окисляющийся в процессе его действия, а также увеличивает кислородную емкость крови, препятствует резкому падению уровня кислорода в тканях и органах, уменьшает суммарное потребление кислорода организмом, участвует в регуляции мембраной проницаемости,

Вместе с тем следует особо подчеркнуть, что унитол и аскорбиновая кислота, являясь синергистами, свои антиоксидант- ные свойства наиболее проявляют при использовании их в сочетании.

Однако дозы и соотношение мх в этом сочетании не разработаны.

Цель изобретения - усиление антиокси- дантного эффекта.

Для этого, препараты вводят в соотношении доз унитола и аскорбиновой кислоты 2,5-3,5:1..

Выбор оптимальных соотношений и доз препаратов был определен экспериментально.

При выборе оптимальных соотношений унитола и АК изучалось их влияние на устойчивость липопротемновых комплексов в сыворотке крови практически, здоровых лиц.

С этой целью первоначально в сыворотке крови определяли исходные показатели .устойчивости липрпротеиновых комплексов (ЛПК), Затем в 10 сериях исследований сывороточные липопротеиды инкубировали в- течение 1.0 мин при 37 .± 0,1°С в среде, содержащей унитол и АК в различных соотношениях концентраций: 1-ая серия - 1:1; 2-ая серия - 1,5:1; 3-я -2:1; 4-я - 2,5:1; 5-я - 3:1; 6-я - 3,5:1; 7-я -4:1; 8-ая - 4,5:1; 9-ая - 5:1 и 10-ая 5,5:1.

Динамика изменения прочности ЛПК в сыворотке крови в зависимости от соотношений концентраций антиоксидантных препаратов в инкубационной среде графически изображена, на чертеже. .

Устойчивость ЛПК в сыворотке крови выражали в условных единицах оптической плотности ДИ, причем, чем выше величина ДИ, тем выраженней дестабилизация ЛПК.

Полученные данные свидетельствуют, что присутствие в инкубационной Среде унитола с АК в соотношении от 1:1 до 2:1 и от 4:1 до 5,5:1 приводят к дестабилизации ЛПК по сравнению с исходными показателями устойчивости ЛПК до инкубации с указанными, антиоксидантами. .Тогда как. инкубация препаратов в соотношении от 2,5:1 до 3,5:1 напротив, повышает прочность ЛПК, Именно, при таком соотношении унитола и АК препараты взаимно предохра- . няют друг друга от окисления. При этом, обеспечивается стабильность окислительно-восстановительного гомеостэза препаратов, что исключает накопление избыточных концентраций их оксипроизводных. Вместе с тем, при меньших или больших соотношениях антиоксидантов возникает

дебаланс в окислительно-восстановительном равновесии препаратов, что приводит к значительному увеличению уровня их оксипроизводных - низкомолекулярных дисульфидов и дегидроаскорбиновой кислоты

0 (ДАК). Последние, как известно, обладая ти- олопривным действием, окисляют сульфо- гидрильные группы апопротеиновой части ЛПК, что приводит к дестабилизации ЛПК, Кроме того, дисульфиды и ДАК, окисляя SH5 группы глобулиновой части гемоглобина, снижают способность связывания гемоглобином кислорода и уменьшают его способность диффундировать в ткани.

Для выбора оптимальных доз использо0 вали консервированную кровь циркулирующую в замкнутом контуре с мембранным оксигенатором. Кровь донора насыщали кислородом до Ро - 300 мм рт.ст. при различных длительностях экспозиции. Затем

5 повторяли то же на фоне вводимого в кровь унитола и АК в различных дозах и соотношениях, До и в процессе оксигенации определяли оксигемоглобин (HbChz), Р02, а также проводили биохимический, анализ следую0 щих параметров: в цельной крови определяли содаржание небелковых, белковых и общих сульфгидрильиых (SH) и дисульфид- ных (SS,SH) групп, а в сыворотке крови - концентрацию АК и сумму ее окисленных

5 форм (ОФ), устойчивость ЛПК и уровень одного из конечных продуктов ПОЛ - малоно- вого диальдегидз (МДА).

Оптимальная доза вводимых антиоксидантов соответствует для раствора унитола

0 из расчета 5,0-7,0 мг/кг массы циркулирующей крови. . :.

В эксперименте на животных установлено, что продолжительность действия препаратов составляет до 4 часов. Вместе-с тем,

5 при добавлении животным половинной дозы унитола и АК каждые 2-3 часа позволяет поддерживать антиоксидантный фон в организме на стабильном уровне.

Таким образом, экспериментально бы0 ли определены оптимальные соотношения и дозы препаратов, а также тактика их введения, Полученные результаты подтвердили получение выраженного защитного эффекта для крови при гипероксии, а также сущест5 венного от 25 до 40% увеличения газотранспортной функции крови при использовании заявляемого способа.

Пример 1. Больной М., 63 лет. История болезни № 2584. Поступил в Ленинградскую городскую больницу N° 17 14.02.90. в тяжелом состоянии с диагнозом: острый холецистит. По срочным показаниям была произведена холецистэктомия. Выявлен, флегмонозно-калькулезный холецистит, разлитой перитонит.

В ближайшем послеоперационном периоде состояние крайне тяжелое: больной адинамичен, кожные покровы бледные, сухие, отмечается цианоз видимых слизистых, небольшой дистальный акроцианоз. Пульс - 124 удара в 1 мин, ритмичен, слабо наполненный. АД-90/50 мм рт.ст. Дыхание частое, поверхностное, 32 в 1 мин, при аускультации ослабленное в нижнебоковых отделах. Р-грамме усиление легочного рис., шоковое легкое. Язык сухой, обложен желтоватым налетом. Живот вздут, болезнен при пальпации, перистальтика кишечника отсутствует, Лабораторные данные: гемоглобин. 106 г/л, эритроциты 3,2 хЮ12 л, лейкоциты 11,6 х 109 л, гематокрит 34%, палочкоядерных нейтрофилов 18%, сегмен- тоядерных 73%, лимфоцитов 5%, билиру- бин 120,3 ммоль/л.

Исследование антиоксидантной, тиол- дисульфидной и аскорбатной окислительно- восстановительных систем выявило снижение небелковых Н-групп на 51,6% от нормы (при нормальном содержании 251,3 мкмоль/л), повышение SH-rpynn в 3 раза по сравнению с нормой 316,2 мкмоль/л, коэффициент SH/SS уменьшился до 0,64 (при норме 3,96). Одновременно, снизился и белковый коэффициент SH/SS до 1,71 (при норме 2,63) за счет уменьшения белковых SH-rpynn и возрастания белковых SS-rpynn. Аналогичные изменения претерпела и ас- корбатная окислительно-восстановительная система. Так, уровень АК снизился до 0,045 мг/л (при норме 0,063 мг/л) и уровень ОФ увеличился до 0,090 мг/л (при норме 0,066 мг/л).

. Таким образом, у больного отмечалось снижение сульфогидрильных групп и АК и преобладание дисульфидных групп и окисленных форм АК.

На фоне безуспешной традиционной терапии на третьи сутки после операции проведено лечение предложенным способом, Экстракорпоральную мембранную ок- сигенациюосуществляли по венозно-артериальному контуру через катетеризированную подключенную вену и ка- нюлизированную лучевую артерию. Забор крови производился из вены, возврат - в артерию. В качестве оксигинатора использовался диализатор ДИП-02-02. Скорость перфузии крови через оксигенатор 120-150 мл в мин, а скорость газотока 02 через оксигенатор 0,75-1,0 л в мин, Длительность экс- тракорпоральной оксигенации 4,5 ч.

За 10-15 мин до процедуры введен 5%- ный раствор унитола (из расчета 1 мл/10 кг) 5 и 5%-ый раствор АК (из расчета 0,4 мл/10 кг массы тела). В процессе экстракорпораль- ной оксигенации через каждые 2 ч в/венно вводилось 1 /2 первоначально рассчитанной дозы унитола и витамина С.

0 К концу процедуры состояние больного значительно улучшилось. Одышка уменьшилась до 24 дыхания в 1 мин, улучшился цвет кожных покровов, АД поднялось до 115/70 мм рт.ст., частота пульса снизилась до 108 в

5 1 мин. Исследования антиоксидантной, ти- олдисульфйдной и аскбрбатной окислитель-. но-восстановительных систем показало увеличение сниженных небелковых и белковых SH-групп (небелковых - до 1034,2

0 мкмоль/л, белковых - до 7695 мкмоль/л) и уменьшение увеличенных SS-групп (небел- ковых-до380мкмоль/л, белковых-до2814 мкмоль/л). При этом небелковый коэффициент SH/SS повысился до 2,72, а белковый 5 до 2,73.

Экстракорпоральная мембранная окси- генация проводилась ежедневно. Общее число процедур 4. Через 12 дней после операции больной в удовлетворительном состо0. янии переведён в хирургическое отделение. Выздоровление.

П р и м е р 2. Больной К., 68 лет. История болезни №14718. Поступил в Ленинградскую городскую больницу №17 22.07.90. с

5 диагнозом: острый панкреатит, абсцесс брюшной полости, разлитой гнойный перитонит, В день поступления произведена ла- поратомия, дренирование полости абсцесса и брюшной полости. Состояние в послеопе0 рационном периоде крайне тяжелое. Сознание спутанное, кожные покровы серого цвета, сухие, видимые слизистые бледные, пульс 140 в 1 мин, ритмичен, малого наполнения. Тоны сердца глухие, АД-80/50 мм

5 рт.ст. В легких дыхание жесткое, 38 дыхательных движений в 1 мин. На Р-грамме типичная картина шокового легкого. Живот вздут, перистальтика отсутствует. Лабораторные данные: умеренная анемия (3,5х

0 хЮ -л), выраженныйлейкоцитоз(16,7х 10 -л) со сдвигом формулы влево до появления юных форм нейтрофилов. Билирубин - 76 ммоль/л, креатинин - 1,31 ммоль/л, мочевина - 27,7 ммоль-л/. Исследование тиолдисульфидной и

5 аскорбатной окислительно-восстановительных систем выявило резкое снижение SH- rpynn небелковой природы (до 421,5 мкмоль/л при норме 1251,3 мкммоль/л) и возрастание SS-групп в 6 раз (по сравнению с нормой).

Небелковый коэффициент SH-SS снизился

до 0,22 (при норме 3,96). Белковый коэффициент SH/SS снизился до 1.58 (при норме 2.63), в основном за счёт увеличения SS- групп до 4631 мкмоль/л (при норме 3005 мкмоль/л). Содержание АКсоставляло 0,026 мг/л (при норме 0,063 мг/л), а ОФ увеличилось до 0,161 мг/л (при норме 0,66 мг/л). Коэффициент АК/ОФ уменьшился до 0,16 (при норме 0,95). На фоне безуспешного традиционного лечения проведена ЭМО по венозно-артериальному контуру, с забором крови из подключичной вены, и ее возвратом в лучевую артерию, В качестве оксиге- натора использовался диализатор ДИП-02-02. Скорость перфузии крови через оксигенатор - 120-150 мл в 1 мин, скорость газотока Ог через оксигенатор 0,5-1,0 л в 1 мин. Длительность ЭМО - 5 ч. За 15 мин до ЭМО в/венно были введены: 5%-ный раствор унитола (из расчета 1 мл/10 кг массы тела) и 5%-ный раствор АК из расчета 0,4 мл/10 кг массы тела). В процессе ЭМО через каждые 2 ч в/венно вводилось 1 /2 первоначально рассчитанной дозы унитола и АК.

К концу ЭМО состояние больного улуч- шилось, пришел в сознание. Восстановился нормальный уровень АД (110/70 мм рт.ст.), снизилась частота сердечных сокращений

до 110 уд в 1 мин, число дыхательных движений уменьшилось до 26 в 1 мин. Небелковый коэффициент. SH/SS повысился до 1,16 за счет увеличения SH-rpynn и снижения SS-rpynn (728,4 и 627.2 мкмоль/л, соответственно). Белковый коэффициент после окончания ЭМО составил 2,18, в основном, за счет снижения SS-rpynn до 2986 мкммоль/л. Почти вдвое (до 0,057 мг/л) увеличилось ранее сниженное содержание АК и уменьшился уровень ее окисленных форм (0,089 мг/л). Ежедневное пятикратное применение ЭМО вывело больного из крайне тяжелого состояния. Через 12 дней после операции в состоянии средней тяжести больной переведен из реанимации в хирургическое отделение. Выздоровление.

Таким образом, как экспериментальные, так и клинические данные демонстрируют высокий антиоксидантный эффект предлагаемого способа.

Формула изобретения Способ антиоксидантной терапии, включающий введение унитиола в сочетании с аскорбиновой кислотой, отличающийся тем, что с целью усиления антиок- сидантного эффекта, препараты вводят в соотношении доз 2,5-3,5:1.

Изобретение относится к медицине, в частности к антиоксидантной терапии, и может быть использовано для лечения патологических состояний, сопровождающихся нарушением окислительно-восстановительных процессов в организме. Цель - повышение антиоксидантного эффекта. Для этого используют унитиол в сочетании с аскорбиновой кислотой в соотношении доз (2,5-3,5): 1. 1 ил. s fe