Способ подготовки биоптата для регистрации инфракрасных спектров при диагностике рака легкого Советский патент 1996 года по МПК G01N33/48 A61B10/00 

ON ON

to

о

00

| Изобретение относятся к медицине, в частности к онкологии, и может быть ис- пользовано при диагностике рака легкого. Целью изобретения является удешевление и повышение безопасности способа с одновременным повышением достоверности диагностики рака легкого за счет увеличения интенсивности анализируемых полос инфракрасного спектра. Для этого взятый био- птат обрабатывают диметилформамидом в течение 1-2 ч на водяной бане, после ди- метилформамида биоптат промывают органическим растворителем и высушивают на воздухе. При диагностике рака легкого регистрируют спектр поглощения веществ биоптата в инфракрасной области и по отношению величины показателей, оптических плотностей выносят суждение о наличии заболевания. СО С 00 о Сл VO VO о.

р

и

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано при диагностике рака легкого.

Известен способ подготовки образцов для инфракрасной спектроскопии при диагностике рака легкого, включающий взятие биоптата, обработку его органическим растворителем гексаметилдисилазаном в течение 1-2 ч при температуре 120-140°С, удаление растворителя и высушивание биоптата. Для диагностики рака легкого регистрировали спектр поглощения вещества биоптата в инфракрасной области (ИК- спектр), рассчитывали отношение максимума поглощения при к максимуму поглощения при 1065 , по величине которого выносили суждения о наличии заболевания.

Вместе с тем способ требует повышенной точности анализа ИК-спектров. Кроме того, в процессе подготовки образцов используют повышенные температуры, пожароопасные теплоносители (масло, глицерин), сложную химическую аппаратуру. Стоимость гексаметилдисилазана высока.

Целью изобретения является повышение безопасности и удешевление способа с одновременным повышением достоверности диагностики рака легкого за счет увеличения интенсивности анализируемых полос инфракрасного спектра.

Способ осуществляют следующим образом.

Биоптат ткани легкого в количестве 0,05-0,3 г помещают в пробирку с 2-5 мл диметилформамида и нагревают на водяной бане 1-2 ч. Диметилформамид сливают, промывают органическим растворителем (гексан, диэтиловый эфир, высушивают на воздухе и снимают ИК-спектр в тонком слое вещества в виде суспензии в вазелиновом масле между крышками из бромистого калия или в таблетках с бромистым калием на спектрофотометрах, позволяющих регистрировать поглощение в инфракрасной области спектра. По полученным спектрам рассчитывают отношения оптических плотностей полос поглощения с максимумами при 1160-и 1065 см 1 и при значении этого показателя, равном 0,4 и менее, диагностируют рак легкого.

Пример 1. Больной М, доставлен с проникающим ранением грудной клетки слева с ранением нижней доли легкого. То- ракотомия, ушивание раны легкого.

0,5 г биоптата ткани легкого нагревали с 3 мл диметилформамида на кипящей водяной бане 2 ч. После окончания нагревания образец промывали гексаном и высушивали на воздухе. Часть образца размельчали на вибрационной мельнице и снимали ИКспектр образца в виде суспензии в вазелиновом масле между крышками из КВг на приборе PerKIn - Elmer - 577. Определяли соотношение оптических плотностей полос поглощения с максимумами при 1160 и 1065

0 .

Д

5

ИБО

Найденно .д-- о, 6, Вывод: не рак.

1065

Пример 2. Больной М., 59 лет. Клинический диагноз: центральный рак левого нижнедолевого бронха, осложненный кровотечением, метастазы в бронхопульмо- нальные лимфоузлы. Пневмонэктомия

Q слева.

Биоптат опухолевой и здоровой ткани обрабатывали аналогично в течение 1,5 ч. Образец промывали диэтиловым эфиром, высушивали, снимали ИК-спектр на прибо5 pe PerKln-Elmer-577. Найдено для здоровой

ПВО

ткани: ™-- - и, ь

Д

1065

Частный вывод:

не рак. Найдено для опухолевой ткани:

Д1160

-- 0,4. Частный вывод: рак. Общий

1065

вывод: рак.

Гистологическое исследование: в легком имеет место проскоклеточный рак без ороговения с перибронхиальным распространением и одиночными отсевами в периферическую легочную ткань. В лимфоузлах - метастазы рака.

Примерз. Больная Е., 36 л. Клинический диагноз: периферический рак верхней доли правого легкого, ТзМтМо. Операция - расширенная верхняя лобэктомия справа.

Биоптат опухолевой ткани обрабатывали аналогично в течение 1 ч диметилформа- мидом (промывание гексаном, высушивание, съемка ИК-спектра).

Д Найдено: ii Вывод: рак. Гистоло1065

гическое исследование в периферической ткани легкого имеет место инфильтратив- ный рост альвеолярноклеточного рака с метастазами в лимфоузлы.

Пример 4. Больной К. Клинический диагноз: центральный рак верхней доли правого легкого с метастазами в бронхо

пульмональные лимфоузлы. Операция - лневмонэктомия справа.

Биоптэты опухолевой и здоровой ткани обрабатывали аналогично в течение 1 ч. ИК |спектры снимали на приборе PerKln-Elmer- |577. Найдено для здоровой ткани: Д

1160 пЈ ..

g---Up. Частный вывод: не рак. Найдено

1 ПССТТ

1065

д

для опухолевой ткани:

1160

Д

0,3

1065

Частный вывод: рак. Общий вывод: рак. Ги- Јтологическое исследование: катетер-био- тат - отдельные клетки и комплексы |1лоскоклеточного рака без ороговения. Тра- еобронхобиопсия: эндобронхиальный рак справа.

i П р и м е р 5. Больной У., 46 л. Клиниче- диагноз: туберкулез верхней доли лег- ||ого с подозрением на рак. Операция - Правая резекция второго сегмента левого Легкого.

Биопаты здоровой и опухолевой ткани Обрабатывали диметилформамидом .знало- Нично в течение 2 ч. ИК-спектры снимали на $pecord-75-1R. Найдено для здоровой ткани Д :jfc-- - 9. Частный вывод : не рак.

;1065

1160

0,7

10Б5

Найдено для опухолевой ткани:

u астный вывод: не рак. Общий вывод: не рак. Гистологическое исследование: в пре- г арате очаги казеоза в окружении фиброз- його кольца с проявлениями хронического воспаления, преимущественно в виде лим- | оидно-клеточной инфильтрации, видны единичные гигантские клетки Пирогова- / агганса и редкие мелкие скопления элите- 4 ллальных клеток. Заключение: туберкулез лэгких.

Формула изобретения одновременным повышением достовер- СПОСОБ ПОДГОТОВКИ БИОПТАТА45 ности Диагностики Рака легкого за счет ДЛЯ РЕГИСТРАЦИИ ИНФРАКРАСНЫХ Увеличения интенсивности анализируе- фПЕКТРОВ ПРИ ДИАГНОСТИКЕ РАКА ЕГКОГО, включающий взятие биоптата

мых полос инфракрасного спектра, в качестве растворителя используют димеv обработку его растворителем, отлта- кп ™лФ°Рмамид. а обработку биоптата пщийся тем, чтб, с целью повышения 50 осуществляют в течение 1-2 ч на водя- Сезопасности и удешевления способа с ной 6ане

Составитель Ю.Кононенко Редактор Н.КозловаТехред М.Моргентал Корректор М.Керецман

15

«ц

5 0

Примерб. Больная Г., 55 л. Клинический диагноз: хроническая пневмония. Операция - резекция средней доли правого легкого.

Биоптат опухолевой ткани обрабатывали диметилформамидом в течение 1 ч. ИК- спектр снимали на Specord-75-1R. Найдено:

10 И60 п „ а

g-- 0,9 . Вывод: не рак. Гистологиче1065;

ское исследование: в ткани легкого признаки фиброза. Видны полости, выстланные цилиндрическим бронхиальным эпителием. ПопавТиие в препарат стенки бронхов без существенных особенностей.

Таким образом, способ позволяет достоверно и объективно различать здоровую ткань легкого или ткань легкого, пораженную заболеванием, не связанным со злокачественным заболеванием перерождением от раковой ткани.

Способ точен (вероятность ошибки - 2%), требует малого количества биоптата ткани легкого (0,05-0,3 г), осуществляется за короткое время (1-2 ч), анализ обработанного образа может быть воспроизведен через продолжительные промежутки времени (до 3 лет), поскольку обработка образца ткани легкого по данному способу приводит к фиксации его химического состава.

Обработка биоптата ткани предлагаемым способом позволяет повысить качество ИК-спектров за счет увеличения интенсивности аналитических полос поглощения. Способ дешев, т.к. диметилформамид является недорогим и доступным химическим продуктом. Кроме того, способ безопасен, т.к. исключает применение высокотоксичных и легковоспламеняющихся веществ.

0