Способ прогнозирования плацентарной недостаточности Советский патент 1993 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству.

Способ осуществляют следующим образом. Определение малонового диальдегида (МДА) производят в утренней порции мочи у женщин с привычным невынашиванием в НИ триместрах беременности. Перед исследованием мочу в количестве 7-10 мл центрифугируют при 3000 оборотах в течение 10-15 мин. А последующем в работе используется 0,5 мл аликвоты осадка, из этого количества 0,2 мл смешивают с 1,8 мл трис-амина. HCI-буфера, рН 7,4 и инкубируют в течение 25 мин при 37°С при постоянном встряхивании. Подбор времени и температуры инкубации был осуществлен экспериментально при выходе реакции на плато с максимальными значениями образования МДА. После инкубации добавляют 0,25 мл 100%-ной трихлоруксусной кислоты, 2 мл 5-ти молярной HCI и 2 мл 0.75%-ного раствора тиобарбитуровой кислоты. Параллельно с основным опытом осуществлялась постановка реакции с введением в реакци-- онную смесь 20% дибунола. Для этого на первом этапе перед прогреванием добав- ляют 1,8 мл буфера, содержащего дибунол. Выбор концентрации дибунола был установлен экспериментально путем многократных добавлений его различных концентраций в реакционную среду. При этом показано, что при величине более 20% содержания дибунола в растворе дальнейший прирост МДА не наблюдается. В последующем постановка реакции .осуществлялась аналогично предыдущей. После добавления тиобарбитуровой кислоты смеси активно перемешивают и инкубируют на водяной кипящей бане в течение 15 мин. По окончании инкубации смесь центрифугируют при 3000 оборотах в течение 10- 15 мин. Оптическую плотность надосадка измеряют против воздуха в 1-сентиметро- вой кювете при 535 нм. Содержание МДА рассчитывали в соответствии с молярным

00

о XI

о

коэффициентом экстинции (е 1,56x10 М см) и выражали в мкмоль/л. Далее устанавливали разницу между содержанием МДА в присутствии дибунола и без него. Увеличение содержания МДА более чем на 4,2 мкмоль/л в присутствии дибунола прогнозирует развитие плацентарной недостаточности.

Под наблюдением находились 94 беременных с привычным невынашиванием группы риска развития плацентарной недостаточности и 20 беременных с физиологическим течением беременности, Обследование наблюдаемых женщин по заявляемому способу проводилось в сроки от 8 до 25 недель беременности.

Результаты исследования представлены в. табл.1.

Как следует из таблицы, величина, отражающая разницу в содержании МДА, достоверно увеличивалась в группе женщин с привычным невынашиванием ЗР 0,01 при. развитии ПН, вместе с тем достоверной разницы между группами женщин с физиологической беременностью и с привычным невынашиванием без признаков ПН.отме- ч ено не было.

С целью определения прогностической значимости выявленных изменений проанализирована частота развития ПН в группе беременных с привычным невынашиванием в зависимости от диагностического уровня содержания МДА до и после добавления дибунола, которое равнялось 4,2 мкмоль/л. Результаты анализа представлены в табл.2.

Таким образом, как следует из представленных в таблице результатов, при значениях диагностического уровня МДА более 4,2 мкмоль/л плацентарная недостаточность была отмечена более чем в 70% слу- Чаев и наоборот при значениях МДА менее 4,2 мкмоль/л в большинстве случаев (78,9 и . 75%) плацентарная недостаточность не диагностировалась.

П р и м е р 1. Беременная Н., 36 лет. В анамнезе 5 самопроизвольных выкидышей, которые прерывались по типу неразвивающейся беременности. Настоящая беременность шестая. При обследовании в сроке 10 недель беременности по предлагаемому способу в анализе мочи на содержание МДА разница в содержании его до и после добавления цибунола составила 3,9 мкмоль/л. В последующем при обследовании в III триместре беременности по данным динамической сцинтиграфии плаценты маточно-плацентарный кровотек (МПК) не изменен (Ti - время заполнения радионуклидом крупных сосудов, TI 16с; Та- время

заполнения радионуклидом межворсинчатого пространства (МВП) Т2 72 с, PI-- плацентарный индекс,Р1 0,681), поданным КТГ - состояние плода соответствует норме, медикаментозный токолиз партусистеном выявил сохранность функциональных резервов МПК, уровень эстриола в 34-35 недель - 54470 нмоль.

При сроке 39-40 недель беременности.

учитывая отягощенный акушерский анемнез, осложненное течение беременности, возраст первородящей было произведено кесарево сечение в плановом порядке. Излечен живой доношенный мальчик, массой

5 4000,0 ростом 54 см. Оценка по шкале Апгар 8-9 баллов.

П р и м е р 2. Беременная М., 34 года. В анамнезе 5 самопроизвольных выкидышей, которые прерывались по типу неразвиваю0 щейся беременности. Настоящая беременность шестая. При обследовании в сроке 10-11 недель беременности разница в содержании МДА в моче до и после добавления дибунола составила 4,3 мкмоль/л. В

5 последующем при обследовании в III триместре (в сроке 30 недель) выявлены признаки плацентарной недостаточности: сниженная экскреция эстиола - 28454 нмоль, по данным динамической сцинтиграфии плацен0 ты: умеренное замедление кровотока в области крупных сосудов, замедление кро- вотока в области МВП (Ti 24 с, Т2 94 с, РЧ 0,43). Функциональные резервы в области крупных сосудов сохранены, в области МВП

5 - снижены, по данным КТГ: начальные признаки гипоксии плода.

В результате проведенной комплексной терапии плацентарной недостаточности уровень эстриола повысился до 56240 нмоль

0 в сроке 35 недель беременности; по данным сцинтиграфии плаценты отмечена значительная положительная динамика (Ti 18 с, Та 70 с, PI 0,62), по данным КТГ - положительная динамика, состояние плода в

5 норме.

В сроке 39 недель беременности произошли своевременные роды живой доношенной девочкой, массой 3350,0, рост49 см, оценка по шкале Апгар 8-9 баллов.

0 П р и м е р 3. Беременная Р., 32 лет. В анамнезе 5 самопроизвольных выкидыша, прерывавшиеся по типу неразвивающейся беременности. Настоящая беременность пятая. При обследовании в I триместре бе5 ременности (в сроке 9-10 недель) разница в содержании МДА в моче до и после добавления дибунола составила 6,4 мкмоль/л.

В последующем в сроке 29-30 недель беременности выявлены признаки плацентарной недостаточности: низкий уровень

экскреции экстриола - 22000 нмоль. По данным сцинтиграфии плаценты: выраженное замедление кровотока в области МВП (Ti 22 с, Т2 108 с, Р 0,56), медикаментозный токолиз партусистеном выявил снижение функциональных резервов во всем маточно- плацентарном бассейне; по данным КТГ - начальные признаки гипоксии плода.

Несмотря на проводимую комплексную терапию фето-плацентарной недостаточно- сти уровень экстриола оставался сниженным (в 36 недель - 40394 нмоль); по данным КТГ - сохраняются признаки гипоксии пло- да; по данным сцинтиграфии плаценты отмечена отрицательная динамика СП 10 с, Та f26 с, Pi 0,41), В сроке 37-38 недель в связи с явле ниями антенатальной гипоксии плода произведено плановое кесарево сечение, извлечен плод мужского пола с признаками гипотрофии 1 ст., массой

2500, ростом 48 см. Оценка по шкале Апгар 6-7 баллов.

Предлагаемый способ позволяет в отличие от известного проводить прогнозирование плацентарной недостаточности в НИ триместрах беременности в 70% случаев и, кроме того, он исключает инвазивность.

Формула изобретения Способ прогнозирования плацентарной недостаточности при привычном невы- нашивании беременности путем биохимического исследования, отличающийся тем, что, с целью снижения трав- матичности, определяют в моче содержание малонового диальдегида до и после добавления дибунола, и при увеличении содержания малонового диальдегида более чем на 4,2 мкмоль/л прогнозируют плацентарную недостаточность,

Использование: в акушерстве. Сущность изобретения: путем биохимического исследования в моче определяют содержание малонового диальдегида до и после добавления дибунола и при увеличении содержания малонового диальдегида более чем на 4,2 мкмоль/л прогнозируют плацентарную недостаточность, Положительный эффект: позволяет прогнозировать плацентарную недостаточность у 70% беременных с привычным невынашиванием беременности. 2 табл.

Разница содержания МДА в моче после добавления дибунола

у женщин с привычным невынашиванием и с

физиологической беременностью

Прогностическая значимость заявляемого способа

Таблица1

Таблица2