Способ получения противовирусного средства Советский патент 1993 года по МПК A61K33/00 

Изобретение относится к способу получения препарата для профилактики, лечения вирусных заболеваний.

Известен способ получения противовирусного средства путем растворения нитрата калия в воде для получения 2 %-ного раствора.

Изобретение заключается в том, что получают продукт, обладающий противовирусной активностью, путем смешения морской воды и белого уксуса с последующей стерилизацией фильтрованием в холодных условиях на пористом фильтрующем элементе. Белый уксус представляет собой водный раствор уксусной кислоты, содержащий 6-8 вес. % уксусной кислоты, Этот раствор не содержит никакой неорганической кислоты и может быть получен из белого вина крепости 11° спирта минимально, типа муската Banyuis, Frentignan или Lunel.

Раствор согласно изобретению может быть введен парентеральным путем, в частности, путем внутреннего или внутримышечного влияния, в этом случае он должен быть должным образом пробуферирован и/или разведен для того, чтобы стать изотоническим по отношению к плазме крови.

Раствор может быть введен клизмы в виде клизмы кишечника.

Изобретение иллюстрируется следующим примером: ..

Смешивают при перемешивании и при комнатной температуре 1 л морской воды и 1 л белого уксуса. Получают гомогенный раствор. Ниже представлены данные испытаний полученного средства:

Материал и методы.

Мышиные клетки L, культивированные в монослое, использованы для испытания вируса HSV-1. штамм S/HD Е 16/84 013084.

1 ампулу HSV-1 используют для инфекции слившихся L клеток. После клеточного лизиса, надосадочную жидкость культур отделяют центрифугированием и вирус затем осаждают полиэтиленгликолем (ПЭГ) в присутствии NlaCI (4 М). Вирусный осадок затем суспендируют в 4 мл Трис-NaCI (50 моль, рН 7,4).

Аликвоты по 1 мл вирусной суспензии инкубируют в течение 60 минут при 20° С в присутствии 2 мл A (PBS, Б) раствора нитрата калия с концентрацией 1 часть на 500, В (смеси морской воды и белого уксуса (50 : 50), 0 белого уксуса.

По окончании инкубации, каждую алик- воту разбавляют 30 мл PBS и вирус снова осаждают с помощью ПЭГ в присутствии NaCt. Каждый из таким образом полученных

со

С

1 ссо о ю

XI О

ел

IGO

осадков клеток снова суспендируют в 1 мл Трис-NaC (50 моль, рН 7,4). 0,2 мл этих вирусных суспензий добавляют к монослоям клеток L, культивируемых на пластинках COSTAR. (Экспериментирование осуществляют в тройном экземпляре). После инкуба ции в течение 60 минут при 37° С добавляют 2 мл RPMI, содержащего 10 % зародышевой телячьей сывооотки. Культуры затем инкубируют яри 37° С в атмосфере, содержащей 5 % ,:СО, в течение 5 дней.

По.окончании этого периода, клеточные монослои на пластинках COSTAR промывают с помощью PBS и фиксируют с помощью 10 %-ного раствора формалина в течение 10 минут, при комнатной температуре. После дополнительной промывки с помощью PBS пластинки COSTAR окрашивают с помощью

0

5

Giesma в течение 12 часов и затем промывают дистиллированной водой.

Бляшки клеточного лизиса, полученные за счет вируса, подсчитывают с помощью лупы. Вирусный титр выражают в единицах лизиса на мл (pfu: plaque - forming units).

Таким образом, предложенный способ позволяет получить более активный продукт, чем согласно известному способу.

Формулаизобретения Способ получения противовирусного средства обработки активного начала, о т г личающийся тем, что, с целью повышения активности конечного продукта, морскую воду смешивают с 6-8 %-ным водным раствором уксусной кислоты и стерилизуют полученную смесь холодной фильтрацией.

Область использования: изобретение относится к способу получения лекарственного препарата для профилактики и лечения, вирусных заболеваний. Сущность изобретения: смешивают морскую воду с белым уксусом, полученную смесь стерилизуют холодным фильтрованием.

20 Результаты