Вакцина против инфекционного бронхита кур Советский патент 1993 года по МПК A61K39/215 C12N7/00 

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии, а именно к способам получения живых аттенуированных вакцин, в частности против инфекционного бронхита кур.

Целью изобретения является получение на основе доступного отечественного сырья (эмбрионов из благополучных по инфекционным заболеваниям племенных птицехо- зяйств) эффективной вирус-вакцины против инфекционного бронхита кур, более имму- ногенной и с более широким антигенным спектром, создающим надежную защиту от вирулентного вируса инфекционного бронхита различных серотипов.

Поставленная цель достигается тем, что вирус-вакцину против инфекционного бронхита кур готовят из аттениурованного отечественного штамма AM.

Для приготовления вакцины эмбрионы 9-суточной инкубации из СПФ-хозяйств или хозяйств, благополучных по инфекционным болезням птиц, заражают в аллантоисную полость вакцинным штаммом AM вируса

инфекционного бронхита кур в объеме 0,2 мл. Зараженные эмбрионы инкубируют при 37,0 ± 0,5°С в течение 72 ч. Эмбрионы, погибшие в течение 24 ч после заражения, удаляют и утилизируют. Остальные эмбрионы просматривают через каждые 12 ч. Погибшие эмбрионы удаляют из инкубатора и помещают в бытовой холодильник при 2- 4°С. Через 72 ч после заражения все живые и павшие эмбрионы собирают, охлаждают и используют для сбора экстраэмбриональной жидкости. Затем ее проверяют на стерильность, отсутствие контаминации микоплазмами и посторонними вирусами, биологическую активность и иммуноген- ность. Вируссодержащая жидкость должна быть стерильна, не контаминирована микоплазмами и посторонними вирусами. Биологическая активность вируссодержащей жидкости должна составлять не менее 6,5 в 1 мл. В дальнейшем вируссодержащую жидкость смешивают с наполнителем (защитной средой, содержащей пептон, желатин и

00

ю ю

V4 Ю

ГО

сахарозу) в соотношении 1:1, расфасовывают в ампулы по 2,0 мл или пенициллиновые флаконы по 5,0 мл и лиофилизируют.

Готовую сухую вирус-вакцину проверяют на стерильность, контаминацию микоп- лазмами и посторонними вирусами, биологическую активность, безвредность и иммуногенность.

Вакцина должна быть стерильна, не контаминирована микоплазмами, вируса- ми, безвредна и иметь биологическую активность не ниже 1055 ЭИДво в 1 мл;

Иммуногенность вакцины проверяют на 15-20-дневных СПФ-цыплятах. Вакцина считается иммуногенной, если после зара- жения вирулентным вирусом все вакцинированные цыплята остаются здоровыми без проявления клинических признаков поражения органов дыхания. Допускается наличие слабо выраженного ринита у 2 из 10 зараженных цыплят.

Вирус-вакцину против инфекционного бронхита кур из штамма AM используют для вакцинации цыплят и взрослой птицы методом выпаивания, интраназально и крупнодисперсным аэрозолем.

У цыплят иммунитет наступает через 21 день после вакцинации и сохраняется в течение 3 месяцев. У цыплят, ревакциниро- ванных в 90-100-дневном возрасте и старше, а также у взрослых кур иммунитет сохраняется до окончания периода эксплуатации.

Вирус-вакцина против инфекционного бронхита кур из штамма AM испытана в экспериментальных условиях на 2887 цыплятах 10-15-дневного возраста при многократных повторностях и в производственных условиях на 8 млн. птицы разного возраста. Кроме того вакцина двукратно испытывалась в производственных условиях государственной комиссией в сравнении с зарубежной вирус-вакциной из штамма Н-120. В первом комиссионном опыте на птицефабрике Дружба Брест- ской области отечественной вирус-вакциной из штамма AM было вакцинировано 43528 цыплят 9-10-дневного возраста, размещенных в двух птичниках. Зарубежной вирус-вакциной из штамма Н-120 вакци- нировано 43575 цыплят того же возраста и размещенных в двух таких же птичниках. В одном птичнике в качестве контроля было оставлено 21764 невакцинированных цыпленка.

Следует отметить, что при вакцинации цыплят вирус-вакциной из штамма AM на

одного прививаемого цыпленка затрачивали 1905 ЭИДзо вируса, а вирус-вакциной из штамма Н-120 -5636 ЭИДзд, т.е. в 2,9 раза больше, За привитыми цыплятами вели клиническое наблюдение, приводили вскрытие павших птиц и учитывали хозяйственные показатели. Через 21 день после повторного вакцинирования определяли напряженность иммунитета путем заражения отечественным вирулентным штаммом вируса инфекционного бронхита кур (штамм Чапаевский).

Примеры конкретного применения.

Из табл. 1 видно, что в неблагополучном по инфекционному бронхиту хозяйстве цыплята, привитые отечественной вирус-вакциной из штамма AM, лучше росли и развивались. В среднем по этой группе на одного цыпленка был получен прирост массы тела на 49 г больше, чем в контрольной группе, и на 62 г больше, чем в группе цыплят, привитых зарубежной вирус-вакциной из штамма Н-120.

Для определения напряженности иммунитета брали по 20 цыплят из каждого птичника и заражали вирулентным вирусом инфекционного бронхита кур штамм Чапаевский. Результаты контрольного заражения представлены в табл. 2.

Из табл. 2 видно, что цыплята, иммунизированные отечественной вирус-вакциной из штамма AM, в 60 и 70% случаев были устойчивыми к заражению вирулентным вирусом, т.е. они имели такую же устойчивость, как и естественно переболевшие инфекционным бронхитом.

Цыплята, привитые зарубежной голландской вакциной из штамма Н-120, имели устойчивость только в 25% случаев от числа зараженных.

Кроме того, за период опыта средний прирост массы тела каждого цыпленка, привитого отечественной вирус-вакциной из штамма AM, был на 34 г больше, чем в контрольной группе, и на 11 г больше, чем у привитых зарубежной вирус-вакциной из штамма Н-120.

Формула изобретения Вакцина против инфекционного бронхита кур, содержащая штамм Coronavlrus и защитную среду, состоящую из пептона, желатина и сахарозы, отличающаяся тем, что, с целью повышения иммуногенности, в качестве штамма она содержит Coronavlrus ВГНКИ № 65 с титром 106-107 ЭЙД so/мл в равном соотношении с защитной средой.

Таблица 1

Использование: ветеринария, биотехнология, вирусология. На основе доступного отечественного сырья получена эффективная вирус-вакцина против инфекционного бронхита кур. Вирус-вакцину против инфекционного бронхита кур готовят из аттенуи- рованного отечественного штамма AM, который депонирован в коллекции ВГНКИ под номером 65. В состав вакцины входят пептон, желатин и сахароза. 2 табл.

Хозяйственные показатели по группам привитых и контрольных цыплят на птицефабрике Дружба Брестской области

Таблица 2 Результаты контрольного заражения вирулентным вирусом инфекционного бронхита