Способ лечения ожогов глаз Советский патент 1993 года по МПК A61F9/00 

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и касается лече- ния ожоговой болвзни глаз.

Цель изобретения - ускорение репара- тивных процессов в роговице.

Это достигается тем, что животным с экспериментальными ожогами роговицы 3-4 степени на фоне внутримышечного введения иммуномодулятора тимогена дополнительно вводят тимоген под коньюнк- тиву глаза ежедневно в течение 7 дней.

Используемый препарат тимоген-глу- тамил-триптофан (CiebteoNaOs) (производство ВКНЦ АМН СССР) утвержден фармакологическим комитетом и допущен к клиническому изучению.

Инструкцией по клиническому изучению препарата рекомендовано внутримышечное введение препарата в дозе 50-200 мкг в течение 10 дней.

Пример. Кролику породы шиншилла. весом 2 кг наносили стандартный термический ожог роговицы 3-4 степени по методике, предложенной Багдаш С. совместно с Травкиным А.Г. Лечение начинали с первого дня после получения травмы. Ежедневно вводили тимоген внутримышечно в дозе 10 мкг/кг и субконъ- юнктивально в дозе 2 мкг/кг (1/5 от дозы, вводимой вунтримышечно). Лечение проводили в течение 7 дней. На 7 сутки после лечения по предло,- женному способу индекс меченых ядер эпителия роговицы поданным авторадиографии составил 13,15. Размер ожогового дефекта по данным морфометрии - 10.8 мм2. По результатам гистологического исследования наблюдалась интенсивная пролиферация фибробластов, дифференцировка их в зрелые клеточные формы, васкуляризация регенерирующей стромы за счет новообразования тонкостенных кровеносных сосудов, что позволяло сделать вывод об активным проЁ

00

ю

VI

ю ю ел

цессе регенерации стромы и ускорении процесса эпителизации раны.

Исследование проводилось на 72 кроликах породы шиншилла. Всем животным наносился стандартный термический ожог роговицы 3-4 степени. Изучение осуществлялось по 3 группам, В первой группе изучалось течение репаративных процессов без лечения, во второй лечение осуществлялось внутримышечным введением иммуно- модулятора тимогена по 10 мкг/кг ежедневно в течение 28 дней. В третьей группе животных лечение экспериментальных ожогов проводилось по предлагаемому способу.

Для сравнительной оценки эффективности лечения использовались показатели количественной оценки пролиферативных процессов эпителия роговицы, регистрируемые методом авторадиографии, морфометрии, проводилось гистологическое исследование роговицы во всех трех группах животных.

С целью количественной оценки клеточной пролиферации использовали метод авторадиографии. Это исследование позволяет судить об активности пролиферации, основываясь на подсчете количества клеток синтезирующих ДНК (индекс меченых ядер - ИМЯ). В качестве меченого изотопа инстил- лировали в конъюнктивальный мешок Н - тимидин в дозе 5 мкк зз 45-60 мин до умерщвления животного. Материал фиксировали в смеси Карнуа, заливали в парафин. Депарафинированные срезы покрывали фо- тоэмульсией и экспонировали 3 недели. Препараты проявляли обычным способом и окрашивали гематоксилином. Количество ДНК - синтезирующих ядер подсчитывали в базальном и шиповатом слоях. После про- смотра 2500-3500 клеток определяли индекс меченых ядер (ИМЯ) в процентах. Меченым считалось ядро клетки, если над ним проецировалось не менее 5 треков.

Определение размеров дефекта эпи- телия энуклеированных глаз кроликов производилось после предварительного окрашивания роговиц раствором метиле- нового синего, используя бинокулярную лупу МБС-1 с морфометрической сеткой.

С целью гистологического изучения де- парафинироаанные срезы окрашивали гематоксилин-эозином.

Исследование проводилось в динамике ожогового процесса на 3,7,14 и 28 день.

Наблюдения за животными показали, что при сочетанном применении тимогена в видесубконъюнкшвальных и внутримышечных инъекций значительно снижаются клинические проявления воспалительных

явлений в тканях глаза, снижается число перфорацией (табл. № 1), по сравнению с контролем и группой животных, получавших внутримышечные инъекции препарата.

По данным радиоавтографических исследований (табл. Ns 2) на 3 сутки после нанесения ожога субконъюнктивальное применение тимогена в сочетании с внутримышечным его введением привело к увеличению ИМЯ (13.2±0,58) по сравнению с группой, где препарат вводился только внутримышечно (10.39+1,21) ,05.

На 7 сутки число меченых клеток на фоне местного введения препарата достоверно повышается (13,15±1,3), составляя при внутримышечном применении 8,3±0,62, .

На 14 и 28 сутки показатели ИМЯ в группе кроликов, пролеченных по предложенному способу и способу-прототипу достоверно не отличались.

Таким образом, проведенные сравнительные исследования показали, что суб- конъюнктивальные инъекции тимогена в сочетании с внутримышечным его применением вызывают более выраженную стимуляцию пролиферативных процессов в эпителии роговицы кроликов по сравнению с контролем и группой животных, которым проводилось только внутримышечное введение препарата, после 7-дневного курса лечения.

Результаты морфометрических исследований (табл.МгЗ) показывают, что местное введение тимогена в сочетании с внутримышечным его применением приводит к сокращению площади дефекта более чем в 2 раза (14,08±3,18) по сравнению с внутримышечным применением (39,8±2,02), .

На 7 сутки также отмечается статически достоверное уменьшение размеров ожогового дефекта в группе кроликов при сочетанном применении тимогена (11,3±1,01) по сравнению с внутримышечным введением препарата (1&,0±0,9) и контролем, ,05.

На 14 сутки отмечается дальнейшее уменьшение средней площади окрашивания эпителиального дефекта роговицы в группе с дополнительным применением тимогена в виде субконьюнктивальных инъекций (9,68±1,17), при внутримышечном введении тимогена средняя площадь дефекта равна 13,5±2,4, ,05.

Сравнительные результаты гистологических исследований свидетельствуют о су- щественных различиях в характере морфологических изменений в роговицах трех групп кроликов на 7 сутки после начала лечения.

В группе животных, не получавших ти- могена, отмечается распространенный некроз коллагеновых волокон стромы, более полное формование струпа. Отмечалось обширное слущивание эпителия и эндотер- лия. У кроликов, леченых тимогеном только внутримышечными инъекциями, некротические процессы в строме роговицы ограничены, наблюдается пролиферация кератобластов на фоне умеренной нейро- фильной и плазмоклеточной инфильтрации стромы, десквамация эпиталия носили частичный характер. В группе животных, пролеченных предлагаемым способом, наблюдалась более интенсивная пролифе- рация и их дифференцировка в зрелые клеточные формы. Наряду с более ранним восстановлением коллагеновых волокон стромы роговицы происходила более интенсивная васкуетяризация регенерирующей стромы за счет новообразования тонкостенных кровеносных сосудов, уменьшение распространенности клеточной инфильтрации. В целом это позволяет судить об интенсификации пролиферативных процессов в ро- говичной ткани кроликов, пролеченных по предлагаемому способу.

Данные радиоавтографических, мор- фометрических и гистологических исследований подтверждают эффективность

предложенной совокупности признаков - дополнительно введения тимогена субконь- юнктивально в течение 7 дней. Из табл. № 2 и № 3 видно, что лечение по предлагаемому способу позволяет ускорить репаративные процессы в роговице в первые 7 дней лечения, что позволяет добиться эффективности лечения - сократить сроки эпителизации ожоговой раны и значительно снизить число осложнений. Сравнительные данные эффективности лечения по предлагаемому способу и прототипу представлены в табл. №1.

Лечение тяжелых экспериментальных ожогов по предлагаемому способу хорошо переносилось животными и не вызывало никаких побочных реакций.

Эффективность предложенного способа в эксперименте позволяет представить рекомендации для фармакологического комитета по внедрению данного способа в клиническую практику.

Формула изобретения Способ лечения ожогов глаз путем внутримышечного введения тимогена, отличающийся тем, что, с целью ускорения репаративных процессов в роговице, дополнительно вводят тимоген под конъюнктиву глаза ежедневно в течение 7 дней.

Таблица 1

Таблица 2

Использование: в медицине, а именно в экспериментальной офтальмологии, и может быть использовано при лечении тяжелых ожогов глаз у животных. Сущность: одновременное внутримышечным введением иммуномодулятора тимогена вводят ти- моген под конъюнктиву в течение 7 дней. Положительный эффект: повышается эффективность лечения за счет воздействия на местный иммунитет органа зрения. 3 табл.

Таблица 3