Способ консервирования деминерализованных костных трансплантантов Советский патент 1993 года по МПК A01N1/02 

Изобретение относится к области медицины, а именно к трансплантологии, и может быть применено при консервации деминерализованных костных трансплан та- тов для последующей пересадки их при костнопластических операциях при лечении травм и ортопедических заболеваний.

Цель изобретения - сохранение остео- индуктивных свойств деминерализованных костных трансплантатов при хранении их без охлаждения.

Эта цель достигается тем, что деминерализованные костные трансплантаты предварительно обрабатывают детергент- кальциевым раствором с добавлением хлористого натрия, а затем помещают в консервирующий раствор мочевины с добавлением детергента и хлористого кальция, причем в качестве детергента используют додецилсульфат натрия.

Предварительная обработка деминерализованных костных трансплантатов в детергент-кальциевом растворе, обладающем способностью стабилизировать белковые структуры, с последующим хранением трансплантатов в консервирующем растворе мочевины с добавлением опять же стабилизирующего комплекса дает возможность сохранить остеоиндуктивную активность трансплантатов в течение трех месяцев при комнатной температуре.

Способ осуществляют следующим образом: костный трансплантат освобождают от мягких тканей, надкостницы и костного мозга и помещают в 1,2 н. раствор соляной кислоты. После окончания процесса деминерализация трансплантаты промывают дистиллированной водой и на 30-40 мин заливают 5% раствором двууглекислого натрия для нейтрализации остатков кислоты. После этого деминерализованные костные

Р°

to

ON Ю О СП

трансплантаты переносят в стерильную посулу и заливают детергент-кальциевым раствором с добавлением хлористого натрия, имеющего следующий состав:

Хлористый натрий0,9 г

Хлористый кальций0,3 г

Додецилсульфат натрия 10,0 мг Вода дистиллированная До 100 мл. Трансплантаты заливают раствором так, чтобы они были полностью погружены в раствор. Посуда с трансплантатами плотно укупоривается и помещается в холодильник при 4°С. Через 16-20 ч посуда с трансплантатами извлекается из холодильника, раствор сливается и трансплантаты заливают консервирующим раствором следующего состава;

Мочевина20 г

Хлористый кальций0,3 г

Додецилсульфат натрия 10мг Дистиллированная вода До 100 мл. Посуду герметично закрывают и хранят при комнатной температуре. Максимальный срок хранения, в течение которого сохраняются остеоиндуктивные свойства - 3 месяца,.

Пример реализации способа: фрагменты бедренных и большеберцовых костей крыс очиа1ены от мягких тканей, надкостницы, и костного мозга, в стеклянном сосуде залиты 1,2 н, раствором соляной кислоты и помещены в холодильник при 4°С. Через 16 ч деминерализованные кости извлечены из раствора кислоты, промыты дистиллированной водой и залиты 5% раствором двууглекислого натрия. Через 30 мин раствор двууглекислого натрия слит, костные фрагменты разделены на две группы, одна из которых залита 0,5% раствором формалина и в дальнейшем хранилась при комнатной температуре - контроль. Оставшиеся транс- плантатц залиты стабилизирующим детергент-кальциевым раствором и помещены в холодильник при 4 С. Через 16 ч стабилизирующий раствор слит, костные фрагменты залиты консервирующим раствором мочевины с добавлением стабилизирующего комплекса. В дальнейшем эти трансплантаты хранились при комнатной температуре - опыт.

После трех месяцев хранения трансплантаты пересажены в мышцы бедра 8 белым крысам. Трансплантаты, хранившиеся в 0,5% растворе формалина, пересажены в мышцы правого бедра, а хранившиеся в предложенном нами консервирующем растворе, - в мышцы левого бедра. Через месяц после операции 4 крысы забиты. На рентге0

5

0

5

0

5

0

5

0

5

нограмме (фиг.1) видна тень костного фрагмента в левом бедре. В мышцах правого бедра тени трансплантата нет. Трансплантаты извлечены. Методом озоления в муфельной печи определено содержание в них минеральных веществ. Перед пересадкой содержание минеральных веществ в трансплантатах равнялось 1,2±0,3%. Минерализация трансплантатов, хранившихся в растворе мочевины со стабилизирующим комплексом, равнялась 10±2,1%. Минерализация трансплантатов, хранившихся в 0,5% растворе формалина, равнялась 0,9 ±0,3%.

Через два месяца после операции забиты оставшиеся четыре крысы. На рентгенограммах задних лап крыс (фиг.2) в мышцах левого бедра видна отчетливая тень костного фрагмента. В мышцах правого бедра тени нет. Минерализация трансплантатов, извле- ченных из левого бедра, равнялась 21 ±0,8%. Трансплантаты в правом бедра практически полностью рассосались.

При пересадке трансплантатов, хранившихся в растворе мочевины со стабилизирующим комплексом при комнатной температуре в течение 4 месяцев, степень их минерализации через два месяца после операции равнялась 8±3,2%, что свидетельствует о значительном снижении остеоин- дуктивных свойств костного матрикса.

Таким образом, способ консервации деминерализованных костных трансплантатов путем обработки в течение 16-20 ч- стабилизирующим раствором при 4°С с последующим хранением в консервирующем растворе мочевины с добавлением стабилизирующего комплекса позволяет при комнатной температуре сохранить остеоиндуктивные свойства костного матрикса в течение трех месяцев, что устраняет трудности при транспортировке костных трансплантатов в лечебные учреждения и хранении их до операции;

Формула изобретения

Способ консервирования деминерализованных костных трансплантатов путем помещения в 20%-ный раствор мочевины, отличающийся тем, что, с целью сохранения остеоиндуктивных свойств костного трансплантата при комнатной температуре, трансплантат предварительно обрабатывают 0,3%-ным раствором хлористого кальция с добавлением додецилсуль- фата натрия и хлористого натрия, а в консервирующий раствор добавляют доде- цилсульфат и хлористый кальций.

Изобретение относится к области медицины, а именно к трансплантологии, и может быть использовано при консервировании деминерализованных костных трансплантатов. Цель изобретения - сохранение остеиндуктивных свойств костных трансплантатов при хранении их без охлаждения. Способ консервирования деминерализованных костных трансплантатов заключается втом, чтотрансплантаты предварительно обрабатывают детергент-кальциевым раствором с добавлением хлористого натрия, а затем помещают в консервирующий раствор мочевины с добавлением детергента и хлористого кальция, причем в качестве детергента используют додецилсульфат натрия. 2 ИЛ:

фиг. I

фиг.2.