ШТАММ ОДНОКЛЕТОЧНОЙ ЗЕЛЕНОЙ ВОДОРОСЛИ Советский патент 1969 года по МПК C12N1/12 

Известен штамм одноклеточной зеленой водоросли chlorella terricola Hollerb, используемый для получения биомассы.

Предлагаемый штамм chlorella vuigaris Beyer 62/56 отличается от известного своими морфологическими и культуральными признаками, а также высокой термотолерантностыо.

Предназначен он для получения биомассы, которая быть использована в качестве корма для животных, -как субстрат для выраш,И|вания других микроорганизмов, s замкнутых экологических системах.

Штамм chlorella vuigaris Beyer 62/56 был получен из исходного штамма хлореллы N° 62 методом последовательных термошмпульсов в проточных условиях культивирования.

Штамм имеет следуюш,ую характеристику.

Морфология. Клетки овальной или шаровидной формы диаметром 3-9 мк на твердых питательных средах. В жидких питательных средах клетки одиночные диаметром 2-

12 ;li/v,

Минеральная среда. Агаризованная среда Пратта. Колонии темно-зеленого цвета Диаметром до 1 мм.

Отношение к у .г л е р о д а м. Используют в качестве углеводного питания глюкозу и пировиноградную «ислоту.

Оптимальная температура для роста 30- 4FC, максимальная - 43°С.

Технология культивировання.

Для выраи;иБания данного штамма хлореллы ирименяют различные приборы и установки с принудительным иеремешизани.ом жидкости (барботаж, перекачка насосами, мешалки) и с дополнительным снабжением углекислым газом. Отделяют клетки хлореллы от среды сепарированием, флотаиией, обычным отстаиванием.

При выращивании водорослей без перемешивания и без подкормки СОо резко снижается скорость роста культуры.

Штамм выдерживают на онтимальной среде следующего состава: КН2Р04 150 .иг, MgSO.i 1 г, FeSO4 30 мг; моча 20 лг./; трилон Б 90 мг; Н-Ю 1 и; микроэлементы: Со (NO-i)--бИаО 0,08 .иг, CuS04-5I-bO 0,04 .иг, 7п504-7П.;0 0,16 .иг, MnSOj-ZnoO 4,0 .иг, HBOj 5,6 .иг, Мо70о4 2,0 .иг.

слсвия: круглосуточное продувание воздуха, обогащенного до 1% СОо, непрерывное освещение лампами накаливания (30000- 40000 лк) в проточных условиях культивирования (равномерной подаче питательного раствора и равномерно сливающихся порциях урожая). Максимально достигаемое число клеток на 1 .ил суспензии 400-600 млн, максимально

достигнутый oec водорослей в 1 с/,;з суспензпп 9 мг, в среднем 2-4 :лг.

Предлагаемый штамм одинаково хорошо растет и на жидких средах, например iia среде Та,мийя с KNO; в качестве источника азота: KNOa 170 лг, MgSO, 7Н,О 30 .«г, КИ-РО 30 мг, СаСЬ 5 мг, FeS04-7H.nO 3 лгг; IbO i л; набор микроэлементов тот же.

Примечание. Данный штамм растет на среде с 5% мочи.

Состав среды: MgSOi 1,3 г, FeSO., 7Н90 0,02 г, KFLPOi 0,45 s; моча 50 мл микроэлементы; ЬЬО 1 л.

На этой среде урожай по cyxo: iy весу 2,87 г/л при выращивании в колбах с перемешиванием.

pFI среды в начале и в «онне развития Хультуры.

Нри выращивании в колбах на шгатель-апиарате (освещенность 15000 л/с, темнература 37°С) на среде следующего состава: КГЬРО. 650 мл, MgSO.-71120 1300 мл, СаСЬ 15 мг, FeS04-7H2O 10 мг, трилон Б 37 мг мнкроэлементы; 1 л, с мочевиной в качестве источника азота начальное значение j)H 6,4, на десятые сутки рН изменяется до 7,8. Выращивание хлориллы лучше вести при рН от 7 до 8, при рН ниже 7 водоросли 1)астуг нлохо.

Быстрота оседания и легкость взмучивания, пени ость.

Суспензия водорослей плотностью 150- 200 млн/лгл, налитая в высокий цилиидр, после 40-60 мин отстаивания оседает с;1едующим образом: /з чаеть вверху бесцветная, еледующая Vs часть светло-зеленого цвета с небольшим количеством клеток и последняя /з часть темно-зеленого изета с большнм количеством клеток; на дне рыхлый осадок, легко взмучиваемый.

При неблагоприятных условиях (рН ннже 7, перегрев) культура водорослей начинает пенить и выпадать в осадок.

Устойчивость культуры, наличие сезонности.

При ненрерывноМ зыращизанни в различные времена года существенных излюнений в культурах не наблюдается.

Устойчивость к ба.ктериальному и грибному заражению.

При нестерильном выращивании в культиваторах происходит заражение водорослей бактернями, которые относятся в основном к рода.д Pseudomonas и Bacterium. Бактерии не оказывают существенного влияния на рост водорослей. Ррнбного заражения в культурах не наблюдается. Но хлорелла может быть вытеснена другими прото-кокковыми водорослями из рода Scenedesmus при елучайном заражении.

Наличие автолиза.

Снонтанного автолиза в культурах не наблюдается; нрн температуре 55°С с добавленне.м антисептика толуола автолиз проходит на 25%.

Длительность культуры.

На среде Тамнйя водоросли поддерживались в течение 2,5 лет в культиваторе при непрерывиом продувании воздуха с 1% СОо в нестерильных условиях культнвирования.

Условия хранення и поддержания :культуры в коллекции.

На твердой ереде Нратта на косом агаре; иосле пересева водоросли выращивают при температуре 37-39°С при освещенности 4000 Л/-0 (лампы ЛБЦ-30). После того как водоросли вырастут, они хранятся в темноте при кол натной телнературе. Пересев производят один раз в 3-4 месяца.

Предмет изобретения

Шта.дш одноклеточной зеленой водороелн. Минеральная среда. Агарнзованная среда Пратта. Колонии темно-зеленого цвета диаметро.м до 1 мм.

Морфология. Клетки овальной или шаровидной формы, диаметром 3-9 мк. на твердых питательных ередах. В жидких иитательных средах клетки одииочные диаметром 2- 12 мк.

О т н о щ е н и е к углеводам. Использует в качестве углеводного питания глюкозу н пнровииоградную киелоту.

Отношение к иеточннкам азота. Пспользует пептон.