СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГРАВОГОРМОНА Советский патент 1971 года по МПК A61K38/22 A61K35/14 

Изобретение относится к способам получения гормональных препаратов.

Известны способы получения сывороточного гонадотропина, заключающиеся в осаждении балластных белков в сыворотке крови. В качестве исходного сырья используют сыворотку, которую получают из крови жеребых кобыл с выходом около 60%.

Предложенный способ отличается тем, что в качестве исходного сырья берут кровь жеребых кобыл и фракционное осаждение проводят спиртом или ацетоном при значении рН 4,0- 4,5. Первое осаждепие проводят при концентрации растворителей 20-50%, отделяют балластные белки, а активное вещество получают из надосадочной жидкости путем дальнейшего осаждения его повышением концентрации растворителей до 70-80%. Полученный осадок активного вещества лиофильпо высушивают. Для дальнейшей очистки осадок экстрагируют водой, обессоливают фильтрацией через молекулярные сита и первую фракцию повторно фракционируют органическими растворителями.

Активность препарата первой ступени очистки составляет 50-100 мыш. ед., а препарата второй ступени очистки 1800-2400 мыщ. ед./лг.

ед./лгл подкисляют ледяной уксусной кислотой до рН 4,0-4,5 и при перемешивании добавляют 20 л 96%-ного этилового спирта. Через 12 час суспензию фильтруют на нутч-фильтре

под вакуумом, осадок отжимают на прессе, затем на фильтре его еще раз промывают 6 л 50%-ного этилового спирта и отбрасывают. К фильтрату при перемешивании добавляют 60 л 96%-ного этилового спирта. Через 3 час

верхнюю часть раствора декантируют, а нижнюю центрифугируют или фильтруют. Полученный осадок лиофильно сушат. Выход 30 г, активность 80 мыш. ед./.иг.

При м е р 2. 30 г осадка, полученного в примере 1, растворяют в 200 мл воды, нерастворимую часть отделяют центрифугированием (выход 4,8 г, активность 40 мыш. ед./лгг), а раствор пропускают через колонку, наполненную сефадексом Г-25 и уравновешенную водой. Первые 600 мг элюата, содержащего активное вещество, доводят до рП 4,5 н добавляют 500 мл спирта. Через 2 час раствор центрифугируют, осадок сушат, выход 2,32 г, актпвность 100 мыш. ед./.;/г. i надосадочной жидкости добавляют еще 1500 мл спирта и через час раствор центрифугируют. Осадок промывают спиртом, суспендируют в воде и лиофилизуют. Выход 730 мг, активность

Предмет изобретения

1. Способ получения гравогормопа путем фракционного осаждения его в гонадотропиносодержащем сырье с последующим отделением примесей молекулярным фильтрованием, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода гравогормона и упрощения процесса, в качестве исходного сырья берут кровь жеребых кобыл.

2.Способ по п. 1, отличающийся ТбМ, что фракционное осаждение крови спиртом проводят при рН 4,0-4,5.

3.Способ по пп. 1 и 2, отличающийся тем, что, с целью дальнейшей очистки препарата, после молекулярного фильтрования проводят повторное фракционное осаждение и лиофилизацию.