СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТОКСИЧНОСТИ ПРЕПАРАТОВСЕЛЕНА Советский патент 1971 года по МПК G01N33/48 

1

Известные способы определения токсичйости препаратов селена, основанные на изменении активности ферментов, не обеспечивают выяв.ления субклинических случаев отравления препаратами селена.

Отличительные особенности описываемого способа заключаются в том, что определяют активность двух ферментов: аспартат-аминотрансферазы и фруктозо-1-монофосфат альдолазы в сыворотке крови, а о токсичности судят по одновременному снижению активности первого и повышению активности второго; опре,деление активности указанных фер1ментов проводят на первые, третьи и седьмые сутки после введения (поступления) в организм селена. Это позволяет выявить субклинические (сшзчаи отравления препаратами селена.

Токсичность препаратов селена согласно дэБиому способу определяют следующим образом.

Берут кровь животных, подвергшихся воздействию селена, и производят определение активности аспартат-аминотрансферазы и фруктозо-1-монофосфат альдолазы в сыворотке крови, устанавливая наличие отклонений активности ферментов от нормальных величин.

При этом в сыворотке крови животных, подвергшихся действию селена, наблюдается снижение активности аспартатаминотрансферазы

и повышение активности фруктозо-1-монофосфат альдолазы.

Определение ферментов, активность которых меняется в противоположных направлениях, позволяет исключить случайные изменения их активности под влиянием других факторов.

Способ обладает высокой чувствительностью и позволяет улавливать изменения активности определяемых ферментов уже при введении в организм овец терапевтических доз. Так, уже минимальная терапевтическая доза 0,1 лг/кг веса вызывает снижение активности аспартатаминотрансферазы, наиболее ярко выраженное через сутки после введения препарата (с 0,033+0,002 до 0,014±0,0009), затем отмечается повышение активности до седьмых суток (0,039±0,002) и в последуюш,ем CHHXveние до исходных величин. Активность фруктозо-1-монофосфат альдолазы при этой дозе возрастет, ностепенно новышаясь к седьмым суткам после введения препарата (с 0,011 ±0,001 до 0,0037±0,002) и снижаясь до нормы. Увеличение же доз селена даже в пределах, не превышаюших физиологически допустимые, вызывает значительные изменения активности этих ферментов, что и служит подтверждением чувствительности способа. Действительно доза 0,5 мг/кг веса, также являюш,аяся терапевтической (терапевтический индекс селена-1 :5), вызывает последовательное и продолжительное угнетение активности аснартат-аминотрансферазы. Реакция организма ярко проявляется на первые, третьи и седьмые сутки после введения препарата селена. Так же, как и при минимальной терапевтической дозе, через сутки после введения препарата активность фермента снижается (с 0,046+0,007 до 0,030+0,001), но далее характер изменений меняется -до третьих суток активность удерживается примерно на уровне первых суток (0,028±0,001), затем продолжает понижаться до седьмых суток (0,018±0,001). Активность фруктозо-1-монофосфат альдолазы при этой дозе резко возрастает уж:е через сутки (с 0,012±0,001 до 6,055+0,003), достигая максимума (0,066+0,007) на третьи сутки, после чего отмечается заметное снижение активности к седьмым суткам (0,045+0,002) и постепенное возвращение к исходным величинам.

Учитывая описанную динамику изменений; определение активности ферментов наиболее

целесообразно производить на первые, третьи и седьмые сутки, хотя проведение исследований в другие сроки тоже допустимо.

Предмет изобретения

1.Способ определения токсичности препаратов селена, например, для овец, основанный на изменении активности ферментов, отличающийся тем, что, с целью достоверного выявления субклинических случаев отравления, определяют активность двух ферментов: аспартат-аминотрансферазы и фруктозо-1-монофосфат альдолазы в сыворотке крови, а о токсичности судят но одновременному снижению активности первого и повышению акгивности второго.

2.Снособ по п. I, отличающийся тем, что онределение активности указанных ферментов нроводят на нервые, третьи и седьмые сутки носле введения (поступления) в организм селена.