ПЛОСКАЯ КАМЕРА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КЛЕТОКИ ТКАНЕЙ Советский патент 1971 года по МПК C12M3/04 

,1

Изобретение относится к оборудованию для культивирования клеток и тканей, а именно к плоским камерам для культивирования клеток и тканей.

Известны плоские камеры Для культивироВания клеток и тканей, содержащие основание, охватывающее его поворотное кольцо и покровные стекла, между которыми имеются прокладки. Недостатком известных камер является то, что эксплантаты, выращиваемые на общей поверхности, нельзя извлекать из камеры отдельно от других, а наличие большого числа прокладок усложняет сборку и разборку камеры.

С целью независимой установки и удаления покровных стекол с эксплантатами в предлагаемой камере внутри основания расположены сообщающиеся между собой радиальные рабочие камеры, а на наружной боковой поверхности поворотного кольца расположена горизонтальная прорезь по размерам рабочей камеры, что также позволяет устанавливать и извлекать из нее отдельные эксплантаты неза1висимо друг от друга на любой стадии культивирования.

На фиг. 1 показана предлагаемая плоская камера в поперечном сечении по диаметру; на фиг. 2 - то же, вид в плане.

горизонтальной прорезью 2 и отверстиями 3. Кольцо охватывает основание 4 камеры, снабженное штифтами 5. ВнутрИ камеры расположены рабочие камеры 6, связанные между собой кольцевой канавкой 7 и отверстиями 8. Рабочие камеры, над .которыми наклеены полоски целлофана 9, снабжены пазами 10 для покровных стекол. К основанию камеры приклеены диск // и кольцо 12.

Перед использованием камеры конические поверхности кольца и основание 4 камеры смазываются глицерином, после чего на основание камеры плотно надевают кольцо, чем достигается герметизация рабочих камер 6, доступ к которым возможен только со стороны боковой поверхности основания камеры. Далее поворотом основания камеры с помощью штифтов 5 относительно кольца совмещают одну из рабочих камер 6 с горизонтальной прорезью в кольце, устанавливают в паз 10 покровное стекло с прикрепленным к нему эксплантатом. Аналогичным образом покровные стекла устанавливают во все рабочие камеры, последовательно совмещая каждую из них с горизонтальной прорезью 2. В дальнейшим поворотом основания 4 камеры горизонтальную прорезь 2 устанавливают таким образом, чтобы она не совпадала с рабочими камерами 6 и была наглухо перекрыта конической поверхностью основания 4 камеры. При этом необходимо следить, чтобы рабочие полости совпадали с отверстиями 3, через которые выходит воздух при заполнепии камеры, для чего необходимо подключить штуцер 13 к магистрали с питательной средой. Высота кольца выбирается такой, чтобы при наклоне камеры на 10-15° жидкость из нее не вытекала через отверстия. Для герметизации рабочих камер после их заполнения необходимо поворотом основания 4 камеры относительно кольца вывести отверстия за пределы рабочих , следя за тем, чтобы горизонтальная прорезь в кольце по-прежнему оставалась наглухо перекрытой конической поверхностью основания камеры. После этого камеру помещают в термостат с заданной температурой для дальнейшего культивирования. Для смены среды необходимо совместить отверстия с рабочими камерами 6, а штуцер 13 подключить к магистрали с питательной стедой. Поступаюш,ая под давление.м из .магистрали среда выталкивает использованную среду через отверстия 3 и заполняет рабочие камеры. Герметизации камеры после смены среды осуществляется вышеописанным способом. Для И31влечения нужного эксплантата камеру устанавливают под углом 10- 15° так, чтобы прорезь 2 в кольце находилась в верхней точке, поворачивают основание камеры до совмещения рабочей камеры, в которой находится избранный эксплантат, с прорезью и извлекают покровное стекло с прикрепленным к нему эксплантатом. В освободившуюся камеру при необходимости помещают новый эксплантат и герметизируют камеру. Таким образом, в данной камере можно получать препараты одной и той же культуры на разных этапах ее развития. Поскольку основание камеры выполнено из прозрачного материала, например из плексигласа, а высота ее в .месте расположения эксплантатов не превышает, например, 4 мм, оказывается возможным проводить наблюдение и фотографирование развиваюш,ихся культур с помощью фазовоконтрастной оптики. Так как фокусное расстояние применяемых объективов не превышает 0,3 мм, необходимо, чтобы общая толщина покровного стекла и верхнего покрытия рабочих камер не превышали эту

величину. Толшина применяемых покровных стекол находится в пределах 0,17-0,2 мм. В связи с этим в качестве верхнего покрытия рабочих ка.мер может быть применена эластичная целлофановая пленка толщиной

0,06-0,08 мм, которая приклеивается к основанию камеры.

Предмет изобретения

Плоская камера для культивирования клеток и тканей, содержащая основание, охватывающее его поворотное кольцо, и покровные стекла, отличающаяся тем, что, с целью независимой установки и удаления покровных стекол с эксплантатами, внутри основания расположены сообщающиеся между собой радиальные рабочие камеры, а на наружной боковой поверхности поворотного кольца расположена горизонтальная прорезь по размерам рабочей ка.меры.

/л

3