Камера для культивирования клеток Советский патент 1982 года по МПК C12M1/00 

(54) КАМЕРА ДЛЯ КУЛЬТИВИЮВАНИЯ КЛЕТОК

I

Изобретение огносится к иммунологии к микробиологии и может быть использовано для культивирования клеток животных и человека и изучения их взаимодействия с микроорганизмами.

Наиболее близкой к предлагаемой является камера для культивирования клеток, содержащая корпус, патрубок для введешш питательной среды и клеток и покровные стекла 1.

Однако покровные стекла в известной камере уложены на ее дне, что создает определенные неудобства при работе с ней, поскольку при смене отработанной среды часть ее из-за капиллярного эффекта задерживается в щелях между стеклами (пластинками), к которым прикрепляются культивируемые клетки, и корпусом камеры. Остающиеся в задерживающейся при смене отработанной культуральной среде внеклеточно расположенные микробы и продукты их распада вызывают быструю гибель культивируемых клеток. В связи с этим в такой

камере нельзя осуществлять изучение взаимодействия клеток с микробами.

Кроме того, стеклянные пластинки, на ко-, торых фиксируются культивируемые клетки, не закреплены и в ходе культивирования при замене среды или при извлечении их из камеры могут смещаться, переворачиваться, накладываться друг на друга, что ведет к повреждению клеток и соответственно к их гибели.

10

Цель изобретею Я - пролонгация жизни клеток путем облегчения полной смены ереды.

Цель достигается тем, что камера для

ts культивирования клеток, содержащая , патрубок для введения питательной среды и клеток и покров Hbie стекла, снабжена вкладышем, состоящим из вертикальных радиально расположенных пластин, соединешп.1х

20 по периметру и в центре перемычками, расположенными на высоте, исключающей задержку при сливе, и имеющими в сечении форму треугольника, направленного

вершиной вверх, а покровные стекла размещены на этих перемычках.

При такой конструкции вкладыша и таком расположении стекол на вкладыше объем и количество капиллярных пространств, в которых задерживается при смене отработанная среда, зараженная кшкробами, сводится до минимума. Это создает возможность путемчастой (подобранной для каждого вида микробов) смены среды практически освободить культуральную жидкость от внеклеточно расположе1шых микробов и тем самым исключить губительное влияние их самих и продз тов их распада на культивируемые клетки и значительно прод)тить сроки культивирования клеток.

На фиг. 1 изображена камера с вкладышем в собранном виде; на фиг. 2 - вкладыш, диаметралыаш разрез; на фиг. 3 - то же, вид в плане; на фиг. 4 - перемычка, поперечный разрез; на фиг. 5 - покровное стекло, вид в плане.

Камера для культивирования клеток содержит корпус 1, пробку 2, патрубок 3 для слива отработанной яреды, патрубок 4 для введения свежей шпательной среды, патрубок 5 ддя OTBOJG воздуха. В полости корпуса 1 рашоложен вкладыш 6, который состоит из вертикальных ряр альяо расположенных пластин, нижняя часть 7 которых служит ножками, а верх1 яя 8 - бортиками. Пластины соеданены по периметру и в центре перемычками 9, которые в сечении имею форму треугольника направленного вершиной вверх. На перемычках расположены покровлые стекла 10, имеюш:ие форму трапеции. Перемычки расположены на высоте, кс1слючающей задержку среды при сливе.

Наилучшим материалом для вкладо 1шеЗ является химически инертный фторопласт, который выдерживает стерилизацию в автоклаве при 1 ати..

Культивирование клеток в камере осуществляется следующим образом.

Первоначально ее заполняют питательной средой, содержащей культивируемые клетки и оставляют на несколько часов в термостате для того, чтобы клетки фиксировались на стеклах 10. Затем в камеру вводят культуру микробов и инкубируют в течение 1,5 ч для взаимодействия микробов с культивируемыми клетками После этого среду

сливают. Стекла 10 в камере трижды промьшают свежей средой для удаления нефагоцитированных микробов. Затем камеру подключают к устройству, производящему автоматическую смену среды в следующей последовательности; полный слив отработанной среды, заполнение камеры свежей средой. В такой последовательности смену среды, осуществляют с частотой, позволяющей освободится от внеклеточно расположенных микробов и продуктов их жизнедеятельности (подбирается для каждого вида микробов отдельно). В случае работы с брюшнотифозными микробами эта частота равна примерно 20 мин. По мере необходимости стекла 10 с культивируемыми клетками извлекают из камеры для исследования.

Пролонгация жизни культивируемых клеток с сохранением их функциональной активности значительно расширяет возможности в решении ряда актуальных проблем инфекционной патологии. Камеру можно использовать для изучения патогенеза инфекций, механизмов формирования бактерионосительства, механизмов иммзшитета и роли клеточных факторов иммунитета в борьбе с возбудателем, для изучения вопросов, раскрываюцдах взаимодействие возбудителя с клеточными и внутриклеточш 1ми структурами организма при различных инфекциях.

Формула изобретения

Камера для культивирования клеток, содержаа{ая корпус, патрубок дня введения питательной среды и клеток и покровные стекла, отличающаяся тем, что, с целью пролонгации жизни клеток путем облегчения полной смены сркцц, камера снабжена вкладьш1ем, состоящим из вертикальных радиально расположенных пластин, соединенных по периметру и в центре перемычками, расположенными на высоте, исключающей задержку среды при сливе, и имеющими в сечении форму треугольника, направленного верцошой вверх, а покровные стекла размещены на этих перемьпжах.

Источники информации, принятые JBO внимание при экспертизе 1. Авторское свидетельство СССР № 180759, кл. С 12 К 9/00, 1965.

ue, 1

е. 5