Способ восстановления жизнедеятельности лабораторных животных Советский патент 1976 года по МПК A61M1/00 

1

Изобретение относится к медицине и может найти применение в клинической нрактике.

jt-i3BecTeH спосоо восстановления жизнедеятельности лаооратор(Ных животных, заключающийся в охлал.дении и искусственном кровоооращении ij.

иднако при известном сиособе восстановления жизнедеятельности живопных удается реанимировать только носле коротких периодов смерти.

1лелью изОбретения является увеличение периода, в течепие которого возможно оживление организма, а также возможность восстановления жизнедеятельности организма мелких животных.

с}то достигается тем, что охлаждение проводят постмортально со скоростью U,o- и,/ОС/мин до 1У-ZiC, а искусственное кровоооращение проводят путем подключения венозной лмагистрали к нижней полой вене через левую почечную вену, а артериальной - через тройник к артерии и к вене.

опособ восстановления жизнедеятельности лаоораторных животных осуществляют следующем образом.

1 этап - предварительная подготовка животного.

Под вводным внутривенным тиопенталовым и основным ингаляционным эфирным наркозом (стадии ;(-ni-i) проводят выделение и

Интубацию трахеи, а затем выделение и канюлирование яремной вены и сонной артерии. К Ьедренной артерии для измерения давления присоединяю г ртутный манометр. Перед этим влутривенно вводят гепарин (U,i-U,io мл/кг веса;. 11осле внутривенного введения реляксантов деполяризующего действия (например, дигилина - 2-3 мг/кг веса) начинают прпнудительную вентиляцию легких, и этом состоянии животному проводят срединную продольную ланароюмию, выделяют левую почку и в.иесте с ней ее вену, через последнюю в заднюю полу вену проксимально на протяжении b-5 см вводят канюлю, диаметр которой 4 мм. Предварительно устанавливают, что при гравитационном (сифонном) методе оттока по канюле упомянутого диаметра в минуту свободно проходит :не менее 300 мл жидкости (крови), оысота сифона при этом должна быть не менее 25-30 см, а длина канюли- /О см. Из задней полой вены наружу канюлю выводят через брющную стенку, орющную полость щвами закрывают наглухо. Животное помещают на весы и к нему (присоединяют электроды электрокардиографа (электрокардиоскопа).

11 этал - умерщвление животного.

выключают искусственное дыхание и производят кровопускание: из задней полой вены через введенную ранее канюлю эвакуируют 60-70 мл крови. При этом артериальное давление быстро снижается до 20 мм рт. ст., а затем и до нуля. В (последующие 2-6 мин наблюдается 15-20 агоналвных дыхательных движений, сердечная деятельность нарушается, вскоре спонтаниое дыхаиие и роговичный рефлекс исчезают, на электрокардиограмме появляется изолиния. Наступает клиническая смерть. От начала кровонуокания до последнего дыхательного движения обычно лроходит 5-6 мин. В последующие 10 мин животное находится в состоянии смерти. За это время от животного отключают электрокардиограф, манометр и аппарат для искусственной вентиляции легких.

111 этае-охлаждение животного.

По проществии 10 мин смерти (а от начала -кровопускания 15-16 мин) животное подвергают искусственному охлаждению. Его проводят в двух видах - или путем внещнего, или виутрисосудистого охлаждения организма.

При внешнем охлаждении заранее подготавливают ванну, в .которую наливают холодную воду и добавляют лед. Темяературу воды доводят до . После 10 мин смерти животное погружают в приготовленную ванну (погружение больщей части головы в воду обязательно). Охлаждение проводят быстро, особенно головы. Для этого слегка перемещивают воду у внеЩНего иокрова животного.

Обязательно измеряют температуру во рту и в прямой кищке, градиент между этими показателями не должен быть более . В течение 25-30 мин температура во рту снижается до 22-23°С, а в кишке - до 24-25 С. Затем животное извлекают из воды, насухо вытирают, фиксируют к станку и помещают на весы. Вновь подключают электрокардиоскои, аппарат для искусственной вентиляции легких, ртутный манометр и заранее подготовленный аппарат для искусственного кровообращения, в который предварительно заливают 140-160 мл кроличьей донорской крови. Кровь предварительно оксигенируют и с номощью теплообменника температуру ее доводят до 24°С.

При внутрисосудистом охлаждении заранее готовят аппарат искусственного кровообращения, в который заливают 90-100 мл кроличьей донорской крови. Этот аппарат присоединяют к ранее введенным в сонную артерию и полую вену канюлям после начала смерти животного. С помощью теплообменника температуру крови в аппарате доводят до 7-8°С. По прошествии 10 мин смерти (а от начала «р-овопускания 15-16 мин) включают аппарат искусственного кровообращения, -начинают перфузию организма холодной венозной кровью и внутрисосудистое охлаждение животного. Объемная скорость пер-фузии при этом составляет i60-70 мл/мин. Перфузию проводят без оксигенации крови. За 20-25 мин перфузии температура во рту снижается до 22- 23°С, а в кищке - до 25-26Х; После этого аппарат искусственного кровообращения выключают, пер фузию и дальнейщее охлаждение животного прекращают и выжидают в течение 25-30 мин. Животное продолл4ает находиться в состоянии смерти. За это время в выключенном аппарате искусственного кровообращения проводят предварительную оксигенацию крови и согревание ее с .помощью теплообменника до .

IV этат - реанимация.

Реанимацию начинают через 60 мии после смерти животного. Сначала из аппарата «сердце-легкие по артериальной канюле в животное равномерно, дозированно подают такое количество крови, которое у него было изъято при кровопускании, т. е. 60--70 мл. Затем под животное подкладывают грелку, температура воды в которой 38-40°С. Производят уравновещивание на весах.

После этого включают алпарат искусственного кровообращения к снимают зажим с канюли, идущей из задней полой вены. Начинают искусственную вентиляцию легких. В течение первых 15-20 мин перфузии объемы ее сравнительно небольшие - 50-70 мл/мин. В последующее время объемы перфузии постепенно увеличиваются и их доводят до 100, редко до 120 мл/мин. По мере повышения температуры тела животного .постепенно увеличивают температуру подаваемой в «его крови. При этом градиент между температурами во рту и в кишке «е должен превышать 2-3°С. Б эксперименте стремятся равномерно согревать все тело животного.

Через 30-35 мин от начала искусственного кровообращения появляются отдельные сердечные сокращения, затем они становятся ритмичными и эффективными, артериальное давление повышается до 60-70 мм, а потом и до 90-100-120 мм рт. ст. Через 60-90 мин от начала искусственного кровообращения животное временами удерл ива-ет артериальное давление на уровне 70-80 мм рт. ст. самостоятельно. Иногда животным для получения эффективных сокращений сердца и достаточного уровня артериального давления вводят раствор глюкозы (1 мл 40%-ного раствора/кг веса) и адреналина (0,01 мл 0,1%-ного раствора/кг веса). Введение этих веществ периодически повторяют. Если животное в состоянии самостоятельно длительное время удерживать артериальное давление на уровне 80- 90 мм рт. -ст., то дальнейшее согревание его кровью производят путем вено-венозйой перфузии.

Через 1,5-2,0 час искусственного кровообращения у животного появляются сначала редкие спонтанные дыхательные движ-ения, а затем спонтанное дыхание учащается, Ни третьем часу перфузии появляется корнеальный рефлекс, животное начинает реагировать на болевое раздражение (укол иглой) само произвольно поворачивает голову, стойко держится роговичный рефлекс. Все это свидетельствует о том, что эффект реанимации мелкогб лабораторного животного, находивщегосй Дли

тельное время в состоянии смерти (без дыхания и без кровообращения), является отчетЛИВ1 1М.

Форл1ула изобретения

1. Снособ восстановления жизнедеятельности лабораторных животных, заключающийся в охлаждении и искусственном кровообращении, отличающийся тем, что, с целью увеличения :периода, в течение которого возможно оживление организма, охлаждение проводят постморталы-ю со скоростью 0,5-0,75°С/ /мин до 19-21°С.

2. Способ по п. 1, отл и ч а ю щийся тем, что, с целью возможности восстановления жизнедеятельиости организма мелких животных, искусственеое кровообращение проводят иутем .подключения венозной магистрали к нижней полой вене через левую .почечную вену, а артериальной - через тройник к артерии и к вене.

Источники ИНформации, принятые БО внимание при экспертизе:

1. Долгущии Ю. Генератор чудес. Профтехиздат, 1960, с. 380-401.