Штамм гриба продуцент нематотоксина Советский патент 1977 года по МПК A01N15/00 C12K3/00 

1

Изобретение относится к микробиологии, в Частности к производству средств борьбы с фитоиематодами.

Иззестно, что хн.мические средства борьбы t вредителями се.льского хозяйства обладают существенными недостатками, связанными с их влиянием на естественные биоценозы. Поэтому представляют определенный интерес работы, направленные ка разработку биологических методов защиты растений.

Особое вни.чание привлекают микроорганиз.мы, выделяющие .метаболиты, угнетающие развитие вредителей сельскохозяйственных культур. Известен гриб Dendrodochium toxicum Pidopl. et. Bilai.

Однако указанный микроорганизм не обладает способностью синтезировать токсические метаболиты, обладающие не.атоцидными свойствами.

Целью изобретения является получение штамма гриба Dendrodochium toxicum-301, выде.1яющего нематотокин. Штамм Dendrodochium toxicum Pidopl. et. Bilai 30 выделен из целинного участка сероземной давно орошаемой почвы Карабахской степи Азербайджанской ССР в мае I960 г. и поддерживался в музее Сектора микробиологии АН Азербайджаиской ССР на косяке сусло-агар.

Предложенный шгамм гриба имеет следующие морфологические и фнзиолого-биохимические признаки. Органическая среда. На -сусло-агаре колонии вначале белые, бархатистые, нежные, позднее отчетливо видны последовательно серые и почти черньте ксниентрические зоны. На седьмой день диа.метр колонии равен 5,2 см. В центре колонш белые, пушистые. ,На расстоянии около 2 см от центра развиваются концентрические круги, которые по мере образования -споролож приобретают

окраску серую или почти черну.ю, края колонии гладкие, -светло-серые. На двадцатый день роста колонии покрывают всю поверхность агара. Мицелий между концентрически расположенными спороложам визуально еле

заметен. В средней части чашки Петри концентрические круги, сливаясь, образуют сплошную серую поверхность. На десятый- пятнадцатый день роста на поверхности колонии выступают едва заметные, прозрачные,

слегка окрашенные капли эксудата.

Спороложи многочисленные, скученные, более или менее округлые или неправильные, поверхрюстиые, светло-серые, после образоза-ния конидий темно-оливковые или -почти черные, 0,1 -1,0 мм в диаметре.

Конидиеносцы расположены плотным слоем, неправильно древовидные мутовпато разветвленные, до 3,2 мк в средней части, конечные ответвления часто мутовчатые, размеро.м

13-20x2,4-3,9 мк. Конидии удлиненно 5Ллиптпческне, эклиптические, часто на обоих концах заостренные, обычно с диумя каллями жира, расположенным б, к концам, светло-зеленые, S ijacce оливковые, темно-оливковые, 6,5-8,4X3-3,6 . Синтетическая С))еда. На а арлзоБанной среде Чапека колонии растут медленнее, чем на органической -среде (сусло), края колоний неровные, концентрические круги отсутствуют, -на седьмой день роста дна.ме1р колонии равен 4 см. На двадцатый день роста колонии покрывают только 75% поверхности агара. Начиная « пятого- шестого дня, на поверхности солонни появляются лшогочнсленные прозрачные, бесцветные или зеленоватые капли эксудата. Спо)оложи 1лотно скученные, образуют сплошную черную массу, -поверхностные, 0,2-1,3 мм в диам-етре, Неправильной формы.

Отношение к источникам углерода. Усваи-вает глюкозу, мальтозу, крахмал, хулсе сахарозу, лактозу, маннит, галактозу. Не сбраживает арабинозу. Активно разлагает целлюлозу.

Отношение к источникам азота. Усваивает нитраты, м 1неральные ,и органические соли аммония, а.минокнслотн, а .вещества, содержащие азот в виде -протеидов-пептон, дрожл евой эк-ст-ракт, сусло. Желатину разжижает. Oптимav ьный рост при температзре 25- 27°С.

Оптимальный рН среды 5,5-6,0.

Формула изобретения

Штамм гриба Dendrodochium toxicum Pidopl. et Bilai 301-продуцент нематотоксина. Хранится в музее культур Сектора микробиологии Академии Наук Азербайджанской ССР.

Морфологичес-кие признаки. Органическая среда. На сусло-агаре колон Ш вначале белые, бархатистые, нежные, поздаее отчетливо видны пос.1едовательно серые и почти черные концентрические зоны. На седьмой день диаметр колонии равен 5,2 см. В центре колонии белые, пушистые. На расстоянии около 2 см от центра развиваются концентрические круги, которые по мере образования споролож приобретают серую или почт черную окраску. Края колонии гладкие, светло-серые.

На двадцатый день роста колонии покрывают всю поверхность агара. Мицелпй между

центрически расположенными сггоролон.ами визуально еле заметен. В средней части чашки Петри концентрические круги, слнвая-сь, образуют сплошную серую яоверхность. 5 На десятьи -пятнадцатый день роста на :оверхиости колонии выступают -едва заметные, прозрачные, слегка окрашенные капли эксудата. Спороложи многочисленные, скученные, более или менее округлые и неправильные, 0 поверхностные, светло-серые, после образования конидий темно-оливковые или черные, 0,1-1,0 мм в диаметре. Колиднекосды расположены -плотным споем, кепразильыо древовидные, мутовчато разветвленные, ло

5 3,2 мк в средней части, конечные ответвлен 1я часто мутовчатые, раз.м-ером 13-20x2,4- 3,9 мк, конидии удлиненно эллиптические, зл-. липтические, часто на обоих концах заостренные, обычно с двумя каплями жира, расположенными ближе к концам, светло-зеленые, з массе оливковые, темно-оливковые, 6,5-8,4X X 3-3,6 мк.

Синтетическая среда. На агаризованной среде Чапека колонии растут медленнее, 4eii

5 на органической среде (сусло), края колонки неровные, концентрические круги отсутствуют, на седьмой день роста диаметр колонии равен 4 см. На двадцатый день роста колонии покрывают 75% поверхности агара. Начиная с пятого - шестого дня, на поверхности колонии появляются многочисленные прозрачные, бесцветные или зеленоватые капли эксудата. Спороложи плотно скученные, образуют сплошную черную массу, по5 верхност-ные, в диаметре 0,2-1,3 мм, неправильной формы.: Физиологические -признаки. Отношение к источникам углерода. Усваивает глюкозу, мальтозу, крахмал, хуже сахарозу, лактозу, маннит, галактозу. Не сбраживает арабинозу. Активно разлагает целлю,лозу.

Отношение к источникам азота. Усваивает нитраты, минеральные и органические соли

5 аммония, аминокислоты, а также вещества, содержащие азот в виде протеидов - пептон, дрожжевой экстракт, сусло. Желатину разжижает. Оптимальный рост при температуре 25-

0 27С.

Оптимальный рН среды 5,5-6Д