Штамм продуцент комплекса пектолитических ферментов Советский патент 1980 года по МПК C12K3/00 

(54) ШТАММ Aspergillus foetidus-26 ПРОДУЦЕНТ ПЕКТОЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ

Изобретение относится к штаммам грибов продуцентов полезных веществ и может быть использовано в микробиологической промышленности. Получae «Ie пектолитические ферменты применяются э пищевой промьшшенности, а производстве вин и соков, в сельсксяк хозяйстве ив других отраслях на pojtHoro хозяйства, где требуется рас (вепление пектиновых веществ. Известен штамм гриба Asp. foetidu М-45 - продуцент пектолитических ферментов. Выделен в результате ступенчатой селекции с применением мута генных факторов химической природы. Показатель общей пектолИтическоЙ активности составляет 1,4-1,6 ед/млпри глубинном культивировании, что в два раза выше исходного штгима 1 Известен также штамм Asp.foetidus применяемый в микробиологической про мшшенности СССР. Общая пектолйтическая активность культурна, выращенной поверхностным способом, составляет 14-18 ед/г 2. Недостатком зтих штаммов являе Тся сравнительно невысокая общая пектолитическая активность. Целью изобретения является новый штамм Asp. foetidus-26, обладающий повышенной способностью к синтезу пектолитических ферментов при поверхностном способе культивирования. I - . . , , Предлагается штамм Asp. foetidus-26. Получен в результате действия температу 100-120с при давле НИИ 1 ати в автоклаве на конидии гриба Asp. foetidus ( 351 музей ВНИИЦрБ) в колбах в слое среды см в течение 40-60 мин. Обработанные высокой температурой и давлением конидии гриба высевают на стерильную питательную среду (свекловичный жом30%, пшеничные отруби - 70%, морковный агар) и проращивают при в течение 15-20 суток, Вьаделенный активный штамм Asp. foetidus-26 подвергают многократным пассажам на морковный агар и питательную среду из свекловичного Жома и пшеничных отрубей и проверяют ферментативную .активность при хранении и пересевах. Примеры сравнения активности ферментов прототипа, и предлагаемого штамма, культивируеьшх в одинаковых условиях. Пример 1. Продуцейт пектолйтйческих ферментов Asp. foetidus культивируют поверхноетным методом на твердой питательной среде, состо 1ей-из пшеничных отрубей 69%, свекловичного жома 30%, сульфата аммония 1%. Питательную среду увлажняют до 62%истерилизуют при 0,8 ати в течение 1 ч. Стерильную среду засевают суспензией конидий гриба Asp. foetidus, раскладывают по кюветам слоев 1,5 см и термостатируют при . Через 48 и по окончании выращ вания культура имеет общую пектолит ческую активность 16 ед/г сухого ве щества (по ГОСТу 20264.3-74). Пример 2. Asp. foetidus-26 культивируют поверхностным методом на питательной среде. Питательную среду увлажняют до 62% и ст рилизуют при 0,8 ати в течение 1ч. Стгерильную среду засевают суспензией конидий гриба Asp.foetidus-26, раскладывают по кюветам слоем 1,5 с и термостатируют при . Через 48 ч по окончании выращивания культура имеет общую пектолитическую ак тивность Д ед/г сухого вещества. Проверкой, проведенной в течение 2 лет, установлено, что при хранени и пересевах высокий уровень ферментативной активности Asp.foetidus-26 не снижается. Asp. foetidus-26 имеет следующую морфологическую и культуральную характеристику. Морфологические признаки. Мицелий субстратный и воздушный, развит, септированный. Кони дйёнЬсцы, поднимающиеся над субстра том, резко обособленные, несептированные, неветвящиеся, очень длинные 0,5-1,0 мм, иногда до 2-3 мм, ширин 12-15 йкм, толстостенные, имейт вези кулу диаметром 25-35 мкм, концы конидиеносцев коричневого цвета. СтеРигмы двурядные, коричневого цйета. Размер первичных стеригм 7-10 мкм, вторичных 3-5 мкм. Конидии круглые, однокистныё с шиповидной оболочкой. цепочки конидий чаще свободно располагаются пр всей поверхности голов ки, образуя шаровидную головку, иног да цепочки склеены S колонки и распо лагаются по верхней полоЕгине пузыря Диалютр конндий 4-5 мкм, ДЙамёт р головки 50-70 мкм. Культуральные признаки. На синтетической среде Чапека с агаром растёт медленно, достигая к 1р-14 дням диаметра колонии 3,5 - 4,5 см. Крдонии плоские или слегка радиальнй- складчатые. чСубстратный ми целий бесцветный или светло-желтый, спороносная зона колонии коричневочерная. Эксудата мало или он отсутст вует. С обратной стороны колонии жел того цвета. Запах сильный,земляной. 54 На естественной среде из солодового сусла с агаром колонии к 10 14 дням достигают 8-9 см в диаметре, имеют мозговидную складчатость. Спороносная зона колонии коричнево-черная, край колонии белый. Обратная сторона колонии светла-коричневая, по краям желтая. . На картофеле растет хорошо, спорообразует, желатину разжижает, молоко пептонизирует. Отношение к углеводному питанию: ассимилирует крахмал,глюкозу, мальтозу, мелибиозу, лактозу, галактозу. Отношение к азотному питанию: растет на нитратных, аммонийных и ррганических источниках азота. Оптимальная температура роста 34:35°С. Азроб. ; . , Таким образом, предложенный штамм по сравнению с ПРОТОТИПОМ обладает преимуществом, заключа(ощимся в повышенной способности к биоминтезу пектолитических ферментов и представляет собой новую культуру со стойкими биохимическими свойствами. Формула изобретения . Штамм Aspergillus foetidus-26 - продуцент пектолитических ферментов. Хранится в коллекции культур микроорганизмов Всесоюзного научно-исследовательского института генетики и селекции микроорганизмов, регистрационный номер ЦМПМ F-106. Морфологические признаки. Мицелий субстратный и воздушный, хорошо развитый, септированный. Конидиеносцы, поднимающиеся над субстратом, резко, обособленные, несептированные, неветвящиеся, очень длинные 0,5-1,0 мм, иногда до 2-3 мм, ширина 12-15 мкм, толстостенные, имеют везикулу диаметром25-35 мкм, кониы конидиеносцев коричневого цвета. Стеригмы двурядные, коричневого цвета. Размер первичных стеригм 710 мкм, вторичных - 3-5 мкм. Конидии круглые, однокистныё с шйповид-. ной оболочкой. Цепочки конидий чаще. свободно располагаются по всей поверхности головки, образуя шаровидную головку, иногда цепочки склеены в колонии и располагаются по верхней пбловине пузыря. Диаметр конидий 4т 5 мкм, диаметр головки 50-70 мкм. . Культуральные признаки. На синтетической среде. Чапека с агаром растет медленно, достигая к 10-14 дням диаметра колонии 3,5 4,5 см. Колонии плоские или слегка радиально-складчатые. Субстратный мицелий бесцветный или светло-желтый, спороносная зона колоний коричневочерная. Эксудата мало или он отсутствует. С обратной стороны колонии желтого цвета. Запах сильный, земляной. 74403 На естественной среде из солодоврго сусла с агаром колонии к 10 14 дням достигают 8-9 см в диаметре, имеют мозговидную складчатость. Спороносная -зона колонии коричнево-черная, край колоний белый. Обратная5 сторона колонии светло-коричневая, . по краям желтая. На картофеле растет хорошо, спорообразует. Желатину разжижает. Молоко п птонизирует. Отношениё к углеводному питанию: ассимилирует- крахмал, глюкозу, мгшьтозу, мелибиозу, лактозу, галактозу. Отношение к азотному питанию: штамм растет на нитратных, аммонийных и органических источниках азота. . Оптимальная температура роста 34-35 С. Аэроб. . Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Авторское свидетельство СССР 538022, кл. С 12 К 3/00, 1976. 2. Лосякова Л.С. и Москвичева Э.П. Регулирование гидролитических ферментов при культивировании гриба Aspergillus foetidus. Тезисы докладов научно-практической конференции по получению и применению пектолитических ферментов. Тбилиси, 1977, с. 77-78 |(прототип).