(54) КРАСИТЕЛЬ ДЛЯ ЯДРА КЛЕТКИ ЖИВОГО ОРГАНИЗМА
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОЛОВОЙ ПРИНАДЛЕЖНОСТИ МОЧИ ПРИ СУДЕБНО-МЕДИЦИНСКОЙ ЭКСПЕРТИЗЕ СЛЕДОВ МОЧИ | 2007 |
|
RU2333494C1 |
| Способ донозологической неинвазивной диагностики состояния здоровья работников | 2019 |
|
RU2725291C1 |
| СПОСОБ ОДНОВРЕМЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЛИЗОСОМНЫХ КАТИОННЫХ БЕЛКОВ ГРАНУЛОЦИТОВ И ДНК, РНК ЛИМФОЦИТОВ НА ОДНОМ ПРЕПАРАТЕ В ТКАНЯХ | 2000 |
|
RU2180104C1 |
| СПОСОБ ФОРМИРОВАНИЯ ГРУППЫ РИСКА НЕОПЛАСТИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ В ЭПИТЕЛИИ ШЕЙКИ МАТКИ | 2010 |
|
RU2437096C1 |
| СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА И ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ПОРАЖЕНИЙ ЛЕГКИХ | 2004 |
|
RU2272290C2 |
| СПОСОБ НЕИНВАЗИВНОЙ ДИАГНОСТИКИ ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКОГО И ЦИТОТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ФАКТОРОВ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ НА ОРГАНИЗМ ЧЕЛОВЕКА | 2005 |
|
RU2292027C2 |
| СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ БЕЛКОВ В РАЗНЫХ ТИПАХ КЛЕТОК МЛЕКОПИТАЮЩИХ И ЧЕЛОВЕКА С ПОМОЩЬЮ ФЛУОРЕСЦЕИН-5-ИЗОТИОЦИАНАТА НА МИКРОСКОПИЧЕСКОМ УРОВНЕ | 2013 |
|
RU2547594C2 |
| СПОСОБ ОКРАСКИ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ | 2000 |
|
RU2202776C2 |
| Способ определения полового сношения | 1990 |
|
SU1772750A1 |
| СПОСОБ ВИЗУАЛИЗАЦИИ ФОРМЕННЫХ ЭЛЕМЕНТОВ КРОВИ ПТИЦ НА ОДНОМ МАЗКЕ | 2002 |
|
RU2224235C2 |
1
Изобретение относится к цитохимии, в частности к применению известного акридинового производства в качестве красителя для ядра клетки.
В современной цитологии для окрашивания ядра клетки используют акрихин.
Однако при использовании акрихина окрашенные препараты под воздействием ультрафиолетовых лучей, а также при хранении и работе с ними под люминесцентным микроскопом быстро выцветают. Это объяс-
няется тем, что связи аркидиного кольца и аминогрупп с хроматином ядра слабые.. Стойкость препарата, окрашенного с помощью акрихина, к действию ультрафиолетовых лучей - 3 минуты. Это значительно усложняет работу исследователя. Кроме того, раствор акрихина обладает заметной токсичностью,
Б современной цитологии для окрашивания ядра клетки используют акрихин иприт обшей формулы
2-Метокси- 6 хлор - 9 амино - N -3 - ам1шопропил - N - этил М - (2-гидроксиэтил) - акридиндигидрохлориц.
оси. используемый ранее в качестве мутагена, пригоден для этой цели. Применение аСТ - 170 - (ОН) в качестве красителя позволяет работать с окрашенным препаратом в течение нескольких недель и повышает устойчивость последнего к действию ультрафиолетовых лучей. Ток100
Акрихин
100
Акрихин - иприт
-(ОН)
100
Пример. В качестве примера рассмотрим окрашивание клеток буккального эпителя для выявления Л - хроматина у человека.
РСлетки буккального эпителя из полости рта (можно использовать клетки любых органов) металлическим шпателем наносятся на покровное стекло и высушиваются Мате риал фиксируется в метиловом спирте в течение 2 мин, далее проводится через ряд растворов спиртов понижающейся концентрации ( 96%, 6О%, 30%) по 30 сек в каждом, выдерживается 15 сек в воде и 15 мин в нитратно - фосфатном буфере рН 6,8 (ОД М раствор лимонной кислоты и 0,2 М раствор двузамешенного фосфорнокислого натрия). Затем материал окрашивается в течение 5-10 мин в растворе красктегя (5 ыг растворяются в 0,5 мл воды + 2 г хлористого натрия + 1ОО мл цитратно-фосфатного буфера) споласкивается в вс7е к отмывается 2-4 мин в буфере рН6,8. :осле этого препарат заключается в воду или в смесь воды с глицерином. Под люминесцентным микроскопом МЛ-2Б (обьек тив 90x125 МИЛ, фильтры ФС1иЖС17+
- (ОН) обшей
обозначаемый OCR - 170 формулы
. Сй
СН.2-СН2-ОН
2HOi.
20
60
15
60
15
80
60
+ЖЗС18, лампа ДРШ 250, масло нефлюоресцирующее) наблюдаются клетки с неяркой флюоресценцией цитоплазмы, ядра флюоресцирующие желто-зеленым светом (ярче цитоплазмы) и ярко флюоресцирующие бело - зеленым светом участки Ф-хроматина в ядре клетки. Самый крупный ярко флюоресцирующий участой ядра клетки мужчин соответствует U -хроматину.
Рассмотренный метод применяется в различных областях здравоохранения: в педиатрии для диагностики аномалий половых хромосом новорожденных, в акушерст ве для определения пола плода, в цитогенетике человека, в криминалистике для определения пола клеточного материала.
Данный пример поясняет, но не ограничивает изобретение. Предлагаемое в качестве люминисцентного красителя вещество JCR -1«70- (ОН) может применяться практически для окрашивания любой клетки живого организма и растения. Специфичность его выявляется при окрашивании клеток, ядра которых обладают участками ярко флюоресцирующего хроматина: клеток человека, клеток гориллы и других обезьян. сичностьJC - 170 - (ОН) как красителя значительно ниже токсичности акрихин - иприта и акрихина. Данные по токсичности веществ, применяемых для окрашивания препаратов и устойчивость их к действию ультрафиолетовых лучей сведены в табл; су.
56
клеток фасоли ( Jtcicy-РстЪа ), клеток-м - этил - N - (2-гидроксиэтил) -
дрозофилы и др,-акридиндигидрохлорида общей формулы
Использование предлагаемого вещества
CJCR -170-(ОН) для окрашивания ядра Сн
ки повышает устойчивость окрашенного пре- sif а Я -он пн
парата к действию ультрафиолетовых лучей| S, Z
в 5 раз, а его токсичность снижается в(
4 раза.JJ iylyJ -гнсе
Формула изобретения XQ
Применение 2 - метокси - 6 - хлор -в качестве красителя для ядра клетки жи- 9 - амино - N - 3 - аминопропил -вого организма.
553319
