Способ культивирования клеток животной ткани Советский патент 1977 года по МПК C12K9/00 

1

Изобретение относится к технике культивирования клеток животных и человека и может найти /применение в научных исследованиях, а также для получения вирусологических .препаратов.

Известен способ -культивирования клеток ткапи животных и человека, заключающийся в том, что клетки помещают на твердую поаложку, к которой они прикрепляются, и периодически вместе с подлолжой вносят в питательную среду, чем обеспечивают условия аэрации и циркуляции культуральной жидкости ,1.

Однако способ культивирования клеток на твердой (подложке имеет малый выход продукта (биомассы). Кроме того, для него характерна травматизация клеток, а для реализадии свойственны 1громозакость оборудования, ограниченная поверхность .подложки.

Цель изобретения - создать способ культивирования клеток животной ткани, который позволит повысить выход конечного продукта и его качество за счет увеличения межфазной поверхности при одновременном уменьшении травматизации «леток.

Это достигается тем, что 70-90% суспензии культуральной жидкости и клеток вспенивают до образования устойчивого мелкодисперсного пенного столба, располагают его над оставшеися культуральной жидкостью и орошают пенный столб этой культуральной жидкостью.

Способ осуществляют следующим образом.

Культуральную жидкосгь с клетками вспенивают при умеренной подаче небольших объемов газовой смеси, насыщая ее газами и создавая таким образом пенный столб с развнтой устойчивой подлолской, на которой культивируемые клетки закрепляются.

В отличие от газожидкостной эмульсии, которая не является структурированной системой, пена - ячеисто-пленочная дисперсная система, образовапная мнолч;еством пузырьков газа, разделенны.ч сравнительно тонкими пленками л идкости. Эта структурировапиая система, представляющая собой как бы упругий каркас, устойчивой подвижной подлол кой для культивируемых клеток.

Насыщая культуральиую Лчидкость тазами, добиваются того, что 70-90% ее вспенивается до образования пенного столба, который располагается пад оставшейся частью л идкости. Невспененную Лчидкость одновременно перекачивают для орошения верхнего слоя пенного столба, т. е. для питания клеток, закрепившихся на подвижной подложке пенного столба.

Изменение производительности побудителей расхода лчидкости и газа по сигналу от датчика уровня пепы обеспечивает управление иенообразованием. По достижении пеной заданного уровня по сигналу с блока управления уменьшают производительность вспенивания, пена начинает оседать. По достижении пеной нижнего заданного уровня по сигналу с блока управления увеличивают расход газа и поток культуральной жидкости. Культуральная жидкость непрерывно циркулирует через пену, причем лсидкость и газ движутся во встречных направлениях, что способствует интенсивному массооб:мену в пенном столбе.

Создание яодвилсной устойчивой вспененной поверхности позволяет повысить выход продукта за счет увеличения площади культивирования клеток ткани, не требуя при этом существенного увеличения габаритов оборудования, отпадает необходимость в твердой подложке. Выращивание ведут в мягких гидродинамических условиях.

Иапользоваиие способа культивирования клеток ткани по сравнению с известными способами значительно увеличивает выход биомассы, например в системах с перемешиванием- примерно в 2 раза, в системах выращивания на твердой неподвижной подложке - ла 40-50%, и повышает качество продукта.

Формула изобретения

Способ культивирования клеток животной ткани на питательной среде в условиях аэрации и циркуляции культуральной жидкости,

отличающийся тем, что, с целью повышения выхода и уменьшения травматизации клеток, 70-90% суспензии культуральной жидкости и клеток вспенивают до образования устойчивого мелкодисперсного пенного столба,

располагают его над оставшейся культуральной жидкостью и орошают пенный столб этой культуральной жидкостью.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Ж-Данов В. М., Ерщов Ф. И. Молекулярные основы биологии арбовирусов, М., Медицина, 1973, с. 62.