,1
Изобретение отпосится к области животноводства и ветеринарии, в частности к способам отбора сельскохозяйственных животных, преимущественно свиней.
Известен способ отбора животных по специфическим белкам сыворотки крови 1.
Этот способ рекомендуется использовать с целью установления истинного происхождения животных, и он не позволяет отбирать свиней - доноров клеток красного костного мозга с повышенным содержанием этих клеток.
Целью изобретения является разработка способа, позволяющего производить отбор при жизни наиболее продуктивных свиней - доноров клеток красного костного мозга для увеличения выхода клеток на 15-26%.
Указанная цель достигается тем, что устанавливают генотип животных с учетом быстрых типов амилазы (Аш 1 - 1, Am 1-2, Am 2-2). Установленная зависимость между генетнческп контролируемыми типами амилазы и выходом клеток красного костного мозга свпней позволяет в течение суток из имеющегося поголовья нри жизни животных отобрать нанболее продуктивных доноров, увеличить на 15-26% выход указанных вынте клеток, уменьшить потребпость в животныхдонорах и сннзнть за счет этого себестоимость получаемой культуры или суспензии клеток.
В результате анализа выхода клеток красного костпого мозга и генотипов животных но амилазе крови свпней трехмесячного возраста крупной белой и муромской пород устаповлена линейная зависимость между выходом клеток красного костного мозга (при концентрации 4-10 кл/мл) и генетическим статусом животного по амилазе (см. чертел). От животных, подлежащих отбору, из хвостовой, ушной или передней полой вены берется 5 мл крови. Иосле ее свертывания сгусток обводится пастеровской петлей или пипеткой, пробирка или флакон со свернувшейся кровью помещается на 1 час в термостат
при 37°С, после чего - на 1 час в холодильник при +4°С. Затем центрифугированием нри 3000 об/мии в течение 5 минут отделяется сыворотка крови, в которой методом электрофореза в 14,5%-иый крахмальном геле (Смитис,
1955) определяются типы амилазы. Режим электрофореза 2-2,5 V/CM, 5 часов, крахмал по Смитису, трпс-цитратиый гель-буфер по Гана и боратно-литиевый электролит но Остер., гофу (1963). После электрофореза гель разрезается на 2-3 нолосы - фореграммы, которые на 3 часа помещаются в 0,1 М ацетатном буфере pli 5,7 в термостат прп 37-28,5°С. Затем на 1 час - в холодильник при +4°С в 15%-ный охлажденный этанол, от этанола
отмывают тенлой водопроводной водой
(35-40°С), и через 15-20 минут в проходящем свете читают полосы типов амилазы
(Am) по скорости движения в крахмальном геле от анода (-) к катоду ( + ), самый быстрый тип амилазы Am 1 - 1, затем в порядке убывания скорости движения Am 2-2 и Am 3-3. После установления генотипа животного по амилазе отбираются доноры, содержащие быстрый тип амилазы: Am 1-1, Am 1-2 и Am 2-2 и нспользуют для получения указанных выше клеток. Средний объем клеток красного костного мозга от животных с быстрыми типами амилазы составляет 9,9- 10,2 л на животное (,001).
Животные нежелательного типа с медленными тинами амилазы (Am 2-3, Am 3-3), от которых получают на 15-26% клеток меньше (от 8,2 до 8,6 л на животное), выбраковываются и используются для других нелей.
На чертеже приведена зависимость выхода суспензии клеток красного костного мозга от
генотипа животного по амилазе сыворотки крови. Объем клеток, 8 л. (4-105 кл/мл).
Для проведения исследования по установлению типов амилазы требуется в общей сложности 0,1 мл сыворотки крови, срок определения не более 24 часов.
Формула изобретения
Способ отбора животных-доноров клеток красного костного мозга, преимущественно свиней, включающий установление генотипа животных по специфическим показателям крови, отличающийся тем, что, с целью повышения эффективности отбора доноров, генотип животных устанавливают с учетом быстрых типов амилазы: Аш 1 - 1, Am 1-2, Am 2-2.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Авторское свидетельство СССР №330842 кл. А 01К 67/00, 1973.
1-22-22-33-3
Геноптипы uMiJflosbi сь/Воротпг и крови 2 JJПS
t Oj}U- ec-/77eo о6следо8а/ нь/х жиВотпных соотпёетлстёуюг его генотипа
