Способ консервирования эритроцитов Советский патент 1978 года по МПК A01N1/02 

(54) СПОСОБ КОНСЕРВИРОВАНИЯ ЭРИТРОЦИТОВ

Изобретение относится к медицине, а именно к низкотемпературному консервированию эритроцитов человека для длительного хранения, и может найти применение на станциях переливания крови. Известен способ консервирования эритроцитов путем смешивания их с криоконсервирующим раствором с последующим замораживанием до - 196°С и оттаиванием 1. Однако известный способ не обеспечивает высокой жизнеспособности эритроцитов. Целью изобретения является повышение жизнеспособности эритроцитов. Эта цель достигается тем, что замораживание проводят сначала со скоростью 25- 40°С/мин до -40(-57°С), затем выдерживают при этой температуре в течение 1-2 мин. а далее ведут замораживание со скоростью 18 22°С/мин до -196°С. Способ осуществляют следующим образом. Пример I. Кровь О (1) группы на цитратном стабилизаторе № 76 центрифугируют в течение 15 мин при 3000 об/мин. После отделения плазмы эритроциты смешивают в соотношении 1:1 с консервирующим раствором следующего состава: Этиленгликоль 400 мл Сахароза150 г NaCl6 г Вода бидистиллированная600 мл Полученную эрнтровзвесь заливают в алюминиевый гофрированный контейнер конструкции ЦОЛИПК, объемом 160 мл. Контейнер погружают на 3 мин в ванну с температурой -55°С, чем достигают скорость замораживания 25°С /мин и необходимую выдержку контейнера при этой температуре в течение 1 мин. Затем контейнер п мещают в металлический кожух с воздушным зазором, который погружают в жидкий азот и охлаждают до те.мпературы -196°С со скоростью 20°С /мин. Отогрев образца проводят в воле с темпе,.атурой 20°С. После размораживания эритровзвесь отмывают одноэтапно: к разморожегрной эритровзвеси в соотношении 1:1 непрерывно в течение 5 мин добавляют первый от.мываюший раствор, состоящий из сахарозы (100 г), хлористого натрия (7 г), воды бидистиллиро-. ванной (850 мл). Затем, не центрифугируя, непрерывно в течение 5 мин добавляют второй от.мывающий раствор, состоящий из сахарозы (50 г), хлористого натрия (7 г) и воды, дистиллированной (920 мл), до соотношения

размороженная эритровзвесь: отмывающий раствор - 1:3. После центрифугирования удаляют надосадочную жидкость и к эритромассе добавляют в соотно.шении 1:1 взвешивающий раствор ЦОЛИПК № 8 б. С помощью радиоактивной метки с определяют содержание этиленгликоля в отмытой эритровзвеси, которое не февышает 1,6%.

В процессе отмывки дополнительного разрущения клеток не происходит.

Предлагаемый способ обеспечивает возможность сохранения большого числа неповрежденных клеток до 98%, упрощение методики замораживания, отогрева и отмывания эритроцитов. Это позволяет получить экономию средств приблизительно 3,5-4 руб. на 1 л эритромассы.

Формула изобретения

Способ консервирования эритроцитов путем смешивания их с криоконсервирующим раствором с последующим замораживание.м до -196°С и оттаиванием, отличающийся тем, что, с целью повышения жизнеспособности эритроцитов, замораживание проводят сначала со скоростью 25-40°С (мин до -40-(-57°С), затем выдерживают при этой температуре в течение 1-2 мин, а далее ведут замораживание со скоростью 18-22°С /мин до -196°С.

Ис1очники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1. Методы долгосрочного хранения в замороженном состоянии эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов, предназначенных для трансфузий. Методическое письмо. М., ЦОЛИПК, 1969.