Способ поддержания жизнеспособности микроорганизмов в процессе их хранения Советский патент 1979 года по МПК C12K1/08 

Изобретение относится к микробиологическим видам исследований, связанных с сохранением жизнеспособности микроорганизмов, и может быть использовано для хранения микроорганизмов в музеях коллекционных культур и бактериологических лабораториях.

В настоящее время с целью хранения микроорганизмов используется целый ряд приемов, например периодические пересевы микробных культур на свежие питательные среды, хранение микроорганизмов под минеральным маслом или в сухих стерильных почвах, песке, каолине и солевых растворах.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату является способ Ноддержаимя жизнеспособности микроорганизмов при их хранении, предусматривающий выращивание, их высущивание путем лиофилизации и расфасовку (Ij.

Однако лиофилизация имеет ряд существенных недостатков, свя амных прежде всего с трудоемкостью процесса и использованием дорогостоящего вакуумного оборудования, замораживающих и защитных суспензионных сред, а также с необходимостью

изготовления специальных ампул из нейтрального стекла для расфасовки микроорганизмов. Таким образом, лиофилизация может быть применима для хранения больщих коллекций микробных культур в крупных лабораториях, располагающих специально обученным персоналом.

Эти недостатки весьма затрудняют использование способа лиофилизации для хранения микроорганизмов в обычных лабораториях или отдельными исследователями.

Цель изобретения - упрощение способа и удлинение сроков хранения микробных культур.

Это достигается .тем, что выращивание микроорганизмов осуществляют на пропитанных питательной средой пластннах полиакрилЕМИдного геля с последующим делением пластин на цилиндрические блоки диаметром 1,0-1,2 см, а высущивание проводят при температуре 37°С.

Микроорганизмы выращивают на пластинах полиакриламидного геля, пропитанных оптимальной для данного вида микроорганизма питательной средой, с после. щим делением.пластин геля с выросшими на

НИХ культурами микроорганизмов стериль ным скальпелем или специальным цилиндром на отдельные блоки диаметром 1,0- 1,2 см и высушиванием их в термостате при 37°С. Для этого чашки Петри, содержащие блоки с выросшими культурами, вместо крышек покрывают стерильными листами фильтровальной бумаги и оставляют в термостате на 2-3 сут. Блоки с высушенными культурами стерильным пинцетом переносят в стерильные пробирки или флаконы и сохраняют при 4°С до упофреблення.

При необходимости последующего выращивания микроорганизмов на плотных Т1итательных средах блок с высушенными микроорганизмами стерильным пинцетом переносят в пробирку со стерильным физиологическим раствором и выдерживают в нем до полного набухания (30-50 мин). Затем пробирку слегка встряхивают и бактериальной петлей или пастеровской пипеткой огбирвют необходимое количество полученной взвеси клеток,.которой засеивают плотные питательные среды обычным методом.

Для выращивания микроорганизмов в жидких питательных средах блоки с микроорганизмами стерильным пинцетом помещают непосредственно в жидкую среду и подвергают инкубации.

Пробирки или флаконы с культурами высушенных данным способом микроорганизмов могут храниться продолжительное время и Использоваться для многократных последующих пересевов.

Пример. В стерильную чашку Петри помещают круглую, диаметром 7,5-8,0 см стерильную, пропитанную мясо-пептонным бульоном пластину полиакриламидного геля. На свободную поверхность пластины стеклянным шпателем, газоном засевают золотистый стафилококк, штамм 209 Р (StaphjloQoccus aureus 209Р) и чашку помещают в термостат при ЗТС на 48 ч. Пластину с выросшей культурой стафилоккока затем делят стерильным сверлом для пробок диаметром l4 см. на 25 круглых блоков. Крышку чашки Петри снимают, а дно, на кото ром находятся блоки с выросшей культурой стафнлоккока, сверху покрывают сгерильным листом фильтровальной бумаги и помешают в термостат при 37°С на 72 ч.

За это время блоки высыхают и в четыре раза уменьшаются в размерах.

Высушенные блоки стерильным пинцетом переносят в стерильную пробирку, которую закрывают пробкой, помешают в холодильник при 4°С или оставляют при комнатной температуре на период хранения.

Проведенные исследования показали, что при последующем выращивании хранившиеся предлагаемым способом микроорганизмы сохраняли присущие нм морфологические, тинкториальные, культуральные, биохимические, антнгениые свойства, фаголизабильность и т. д.

Таким образом, данный способ хранення не оказывает существенного влияния на основные биологические свойства микроорганизмов.

Формула изобретения

Способ поддержания жизнеспособности, микроо ;ганизмов в процессе их хранения, предусматривающий выращивание микроорганизмов, высушивание н расфасовку, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа и удлинения сроков хранения микробных культур, выращивание микроорганизмов осуществляют на пропитанных питательной средой пластинах полнакриламидного геля с последующим делением пластин на цилиндрические блоки д.иаметром 1,0-

1,2 см, а высушивание проводят при температуре 37°С.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Бланков Б. И. и Клебанов Д. Л, Применение лиофилизаиии в микробиологии. М., Ме.агиз, 1961.