Способ количественного определения кислых полисахаридов Советский патент 1980 года по МПК G01N31/02 C08B15/04 

1

Изобретение относится к медицинской промьвиленности и касается анализа природных соединений, в особенности лекарственных соединений из растительного сырья.

Известен способ количественного определения натрий-карбоксиметилцеллгалозы (КМЦ ) осаждением сульфатом меди в виде ее медной соли, отделением осадка и титрованием не вступившего в реакцию избытка сульфата меди Iji .

Однако указанный способ является продолжительным и трудоемким, так как требуется точное соблюдение кислотности растворов вначаше при рН 2,2-2,4 и затем доведение до рН 4,0-4,1; несколько часов занимает фильтрование и прокывание получаемого аморфного осадка. Кроме того, метод характеризуется нечетким изменением окраски раствора при титровании ввиду обильного осадка иодида меди, который адсорбирует крахмал, применяемый в качестве индикатора. Метод дает удовлетворительные результаты только при определении больших навесок КМЦ (0,5-1,0 г) и непригоден для полумикроопределений , кО,01-0,1 г вещества), что необходимо при анализе КМЦ и кислых полисахаридов (пектина, альгина) в смесях с другими веществс1ми, например в лекарственной смеси с флавансидами (гранулы Флакарбин и др.) .

Цель изобретения - упрощение и ускорение анализа и повышение его точности.

Поставленная цель достигается

10 тем, что полисахариды ( пектин, альгин и др.) осаждгиот 0,5-1,5%-ным водным или метанольным раствором ацетата свинца, осадок отделяют центрифугированием и после промывания проводят комплексонометрическое титрование свинца раствором трилона В в присутствии соответствующего для ионов свинца металлиндикатора.

20

Способ осуществляют следующим образом.

Около 20 мг КМЦ или других кислых полисахаридов осаждают 3-5-кратным весовым избытком раствора ацетата 25 свинцаj осадок отделяют центрифугированием, отмывают от маточного раствора и проводят комплексонометрическое титрование свинца раствором трилона Б в присутствии индикатора кси30 ленолового оранжевого.

Пример l.B центрифужную пробирку емкостью ,25-50 мл помещают 10 мл исследуемого водного раствора -и прибавляют 5 мл 0,5%-ного водного раствора уксуснокислого свинца. Смес реагеитов в цент1 ифужной пробирке перемешивгиот стеклянной палочкой, которую затем промывают 5 мл воды, присоединяя ее к центрифугируемой смеси. Через 20-30 мин взвесь центрифугируют 5-10 мин со скоростью 5-6 тыс. оборотов в минуту, жидкость над осадком осторожно сливают в колбу для титрования, а осадок промывают взмучиванием с 20 мл водно-спиртовой смеси с помощью той .же палочки, промывая ее 5 мл указанной смеси. После

центрифугирования прокывную жидкость осторожно сливают в колбу для титрования, туда же прибавляют 100 мл воды, 10 мл ацетатного буфера рН 5,5 около 0,5 мл 0,1%-ного .водного раствора ксиленолового оранжевого и титруют 0,01 моль раствором трилона Б до изменения красно-фиолетового окрашивания в желтое. Разность между титрованием реактива и фильтрата соответствует расходу титранта на осаждаемый полисахарид.

Результаты количественного определения КМЦ и кистшх полиса харидов комплексонометрическим методом и известным способом представлены в

5 табл. 1.Таблица 1

Комплексонометрический метод КМЦ очищенная15,23 15,51 +1,82

Пектин чистый 20,34 20,77 +2,12 В случае определения 1ФЩ и кислых полисахаридов в смеси с флаваноидс1ми или мешающими определению веществами смесь предварительно обрабатывают горячим спиртом. При анализе гранул Флакарбин кроме обработки смеси спиртом КМЦ осаждают из подкисленного уксусной кислотой водного раствора метанольным раствором уксуснокислого свинца в смеси с триэтаноламином. Это позволяет унифицировать реактив для послед ую щего осгикдения кверцетина в метилово спирте. Кроме того, определение КМЦ проводят титрованием свинца в осгщке после растворения его в азотной кислоте .

20,44 20,11 -1,61

25,1625,49+1,33 Пример 2. Определение КМЦ в гранулах Флакарбин. Около 1 г порошка растертых гранул (точная навеска) в мерной колбе емкостью 50 мл обрабатывает 2-3 раза горячим этиловым спиртом, сливг1Я спиртовый раствор через стеклянный фильтр пор 40. Фильтр промывают 10-15 мл горячей воды, которую помещают в мерную колбу, с промытой навеской препарата. Затем в эту же колбу прибавляют 20 мл воды и взбгштывают в течение 15-20 мин до получения однородного раствора и доводят водой до метки. 10 МП полученного раствора помещают в центрифужную пробирку, прибавляют 2,5 мл разведенной уксусной кислоты, 5 мл 1,5%-ного метанольного раствора ацетата свинца с 10%-ным триэтаноламином, жидкость перемешивают и оставляют на 20-30 мин. Затем проводят центрифугирование и прокивание осадка указанным способом. Осадок в центрифужной пробирке взмучивают стеклянной папочкой с 1 мл разведенной азотиой кислоты до растворения осадка. Содержимое пробирки с помощью 70-80 МП воды количественно пеПектин

Альгин

Преиму1цеством предлагаемого метода является простота, меньшая продолжительность, большая точность и йозможность проведения полумикроопределений КМЦ и кислых полисахаридов В исходных препаратах и в смесях с другими веществами( моносахаридами, флавоноидами, нейтральными полисахаридами и др.) .

Формула изобретения

Способ количественного определения кислых полисахаридов из раствора

реносят в колбу емкостью 200-300 мп, прибавляют раствор ацетата натрия до рН 5-6, и проводят титрование 0,01 моль раствором трилона Б указанным способом.

Результаты количественного определения КМЦ и кислых полисахаридов в искусственных смесях гранул Флакарбин (состав смеси,%: глюкоза 76, КМЦ и пектин 10, кварцетин и ликуразид 2) представлены в табл. 2. Таблица 2

осаждением раствором соли металла, отделением осадка и титрованием ионов металла, отличающийся тем,

что, с целью упрощения и ускорения анализа и повышения его точности, « осс1ждение проводят 0,5-1,5%-ным водным или метанольным раствором ацетата свинца, а титрование проводят комплексонометрическим методом.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. ОСТ 6-05-386-73 (прототип).