Штамм @ @ ВСБ-874-продуцент биомассы Советский патент 1987 года по МПК C12N15/00 

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к метанассимилирукяцему штамму бактерий Methylococcus capsulatus ВСБ-874 проценту биомассы. Известен штамм вида Methylococcus capsulatus. При оптимальных условиях роста, а именно при температуре рН 6,1, скорости протока 0,18 ход биомассы составляет 14 г/л. дуктивность 2,5 г/л ч, содержание белка в биомассе менее 70%. Недостатками известного штамма являются небольшая скорость роста в условиях протока, низкая продуктивность, невысокое содержание белка в биомассе. Цель изобретения - штамм микроорганизмов, способный расти с высоко продуктивностью, в условиях протока, производящий биомассу с большим содержанием белка. Штамм Methylococcus capsulatus ВСБ-874 выделен ступенчатой автоселекцией в непрерывном процессе из сточных вод нефтяной скважины. Штамм обладает способностью расти при кислых значениях рН среды (4,45,6) и температуре 42-49 при больше скорости протока (D (),2-0,3 ч ). Штамм растет при повьш1енном давлении (7-12 атм), вьщерживает перепады давления. Штамм устойчив к примесям гомологов метана и сернистых соединений в природном газе. Выход биомас сы при оптимальных условиях роста в зависимости от давления составляет 30-60 г/л, продуктивность 8-10 г/л при этом содержание сырого протеина в биомассе 77%. Штамм Methylococcus capsulatus ВСБ-874 хранится в музее культур ин ститута ВНИИгенетика под коллекцион ным номером ЦМПМ В-1743 и имеет сле дующую характеристику. Морфологические признаки. Клетки в оптимальных условиях роста имеют форму кокка или диплококка диаметром 1 мкм, неподвижны, окружены микрокадсулой, грамотрицательны, В старой кульутре (10 сут образуют микрокапсулу В зависимости от условий роста диаметр кокков варьирует от 0,7 до 1,4 мкм. При неблагоприятных услови ях роста клетки имеют форму тетракокка диаметром 2 мкм, темные в фа.зовом контрасте. Культуральные признаки. Колонии на минеральном агаре выпуклые, блестящие, гладкие, плотные, кремовые, окрутлые с ровном краем, . диаметром 1 мм на вторые сутки и 2,5 мм на пятые сутки. Водорастворимый пигмент не вьщеляют. Физиологические признаки. Аэроб способен развиваться в интервале температур 30-50 С и рН 4-8. Оптимальные при непрерьгеном культивировании температура 42-45 С и рН 5-5,6. Используют в качестве источника углерода метан чистый или в составе природного газа и метанол в концентрации 0,01-0,025%, не растет на органических средах (мясопентонном, картофельном и сусло-агаре), т.е. является облигатным метилотрофом. Метан ассимилирует гексулозафосфатным путем. Отношение к источникам азота. Используют аммонийную, нитратную, аминную и амидную формы источника азота, фиксирует азот атмосферы. Padтет при малых дозах азота в среде; Штамм не нуждается в витаминах и других стимуляторах роста. Он непатогёнен и конкурентоспособен по отношению к метанокисляющим мцкроорганизмам других видов. - Особенности штамма обеспечивают стабильный рост его в непрерывном процессе с высокой скоростью и продуктивностью, а также конкурентоспособность, устойчивость к инфицированию, высокое качество биомассы, и повьш1енйе экономичности процесса. Приме, р 1. Выращивание культуры Methylococcus capsulatus штамм ВСБ-874 проводили в ферментере турбоэжекционного типа объемом 40 л (рабочий объем 20 л) с использованием минеральной питательной среды следующего состава, г/л: Н,Р04 (80%) 0,05; MgS047H20 0,02; КС1 0,025; микрозлемёнты, мг/л: 0,3; MnS044H,,0 1,9; CuS045H O 1,0; 008047Н20 0,048; NiSO, О, 10; A1(S04) О, 20; Сг ,0 0,085; Н,ВОэ 1,25; FeSO -7H20 2,1; и 2115,0 0,045. В качестве источника азота и для регулирования величины рН применяли аммиачную воду. Расходы природного газа и воздуха на 1 л культуральной среды составляли 15 и 45 л/ч соответственно. 3 Выращивание осуществляли при атмосферном давлении, температуре 45 величине рН 5,0 и скорости протока 0,25 . При этом концентрация био массы составляла 11 г/л абсолютно с кого вещества (АСВ), содержание сырого протеина 77%, . В нестерильных условиях инфицирование посторонней микрофлорой сос тавляло 8 об,%. Пример 2, Выращийание штам осуществляли.на питательной среде, указанной в примере 1, при температуре 45°С и рН 5,5-5,6. Расход природного газа и воздуха составляет 25 и 100 м/ч на 1 м среды соответ ственно. Выращивание штамма осуществляли под давлением 7 ата. При этом была 0 получена продуктивность 6,2 кг/м ч при скорости протока 0,27 ч и концентрации биомассы 23 кг/м АСВ, Степень инфицированности посторонней микрофлорой 10%. Содержание сырого протеина 77%. Пример 3. Вьфащивание бактерий проводили в периодическом процессе на питательной среде, указанной в примере 1, при температуре 42 и рН 5,5, под давлением 5 ата. Расход природного газа и воздуха составляет 30 и 120 м/ч на 1 м среды соответственно. Давление повышали после достижения концентрации биомассы 10 кг/м АСВ. При этом концентрация биомассы 100 кг/м АСВ за 40 ч.

ШТАММ METHYLOCOCCUS CAPSULATUS ВСБ-874-ПРОДУЦЕНТ БИОМАССЫ. Хранится в музее культур института , ВНИИгенетика под коллекционным номером ЦМПМ В-1743. Морфологические признаки. Клетки в оптимальных условиях-роста имеют форму кокка или диплоккока, диаметром 1 мкм, неподвижны, окружены микрокапсулой, грамотрицательны. Б старой культуре