Устройство для диск-электрофорезаВ пОлиАКРилАМидНОМ гЕлЕ Советский патент 1981 года по МПК G01N27/26 

1

Изобретение относится к медицине кой и биохимической аппаратуре и предназначено для проведения электрофореза различных биологических ве-. ществ в полиакриламидном геле.в биохимических и клинических лабораториях .

Известны устройства для электрофореза в полиакрилс1мидном геле с наслаиванием анализируемых растворов над слоем геля 1.

Известно также устройство для электрофореза в полиакрилгмидном геле, состоящее из двух пластин из плексигласа, наверху которых имеются углубления. В одной пластине с внутренней сторюны имеются параллельные прямоугольные каналы для геля, в углублении которой зафиксирован электрод. В обеих пластинах по бокам имеются отверстия для барашковых винтов. Расположение отверстий и углублений в пластинах идентично и при наклсщывании пластин одна на другую внутренними поверхностями и скреплении их винтами вверху образуется резервуар для буферного раствора (за счет углублений) и прямоугольные каналы для геля. В состав устройства входит нижняя камера с злекТ

родом, в которую вставляется образованный из двух пластин блок с каналами для геля из полиакриламида L2J. Недостатком устройства является

5 то, что оно изготовляется из плекси г гласа, который является гидрофобным веществом, и это отрицательно отражается на проведении очень важной (даже определякяцей весь процесс эле к тО рофореза) операции наслаивания дистиллированной воды или других растворов на поверхность раствора полиак-« риламида или других растворов. Наслаиваемая жидкость медленно и осторожно подается из шприца на стенку канала, и, стекая по ней, она должна наслаиваться без смещения на другой раствор (например полиакриламидный). Йа гидрофобной поверхности плексигласа жидкость собирается в виде капли. Капля падает как бомба и смешивается с жидкостью, на которую идет наслаивание. Это ведет к нарушению точности электрофореза, к искажению его

25 результатов. Извлеченные из каналов для гелей гелевые столбики после электрофореза помещают в отдельные пробирки,так как каждый из них представляет собой отдельный исследуемый 30 образец. Затем с гелевыми столбиками

роделывают мнохократные операции ромывания, проявления, фиксации, енситометрии и др. Для их осуществления пользуются параллельными рядами пробирок, в каждом из которых для Каждого гелевого столбика имеется своя пробирка. Это приводит к неэкономному использованию дорогостоящих реактивов, большое количество пробиок занимает много места в лаборатоии при всегда возможной путанице робирок.

Цель изобретения - повышение точности электрофореза, ускорения процесса анализа и экономии химреактивов.

Указанная цель достигается тем, что в известном устройстве, содержащем углубления для буфера и каналы для геля, в верхней части каналов для гелей делают углубления-пазухи с помещенными в них стеклянными пластинками, а в нижней части каналов у самого края на их поверхности - углубления-штампы обратных цифр-номеров каналов. Каналы для геля соединены между собой ходами, образованными косыми срезами промежутков между каналами.

На фиг. 1 изображен общий вид устройства; на фиг. 2 - верхняя искровная пластина; на фиг. 3 - нижняя пластина с каналами для геля; на фиг. 4 - поперечный разрез нижней пластины в верхней части; на фиг.5 вид сбоку соединенных пластин с косыми срезами промежутков между каналами внизу; на фиг. 6 - вид гелевого столбика с обозначенным на нем номером канала.

Верхняя 1 и нижняя 4 пластины из плексигласа.имеют углубление 3 с одной стороны во всю ширину, не доходя до краев 5-7 мм. Ниже углубления 3по бокам пластин симметрично расположено по три отверстия для барашковых винтов 2. Пластина 4 имеет шесть или более прямоугольных параллельных каналов 8 для геля,,разделенных промежутками 7, ширина каждого из которых составляет приблизительно половину ширины канала (ширину промежутков можно варьировать). Основное требование к ним - обеспечение герметизации каналов. Нижние концы промежутков 7 срезаны под углом 45 , образуя ходы-сообщения 13 между каналами, нижняя часть каналов сразу у края имеет углубления:- штампы 9 обратных цифр-номеров каналов длиной 3-4 мм,.в верхней части каналов есть углубления- пазухи 11 для стеклянных пластин 6. Пазухи на 1 мм больше ширины каналов с каждой стороны и углублены относительно поверхности канала на толщину стеклянных пластин. Последние должны плотно входить в углубления-пазухи, чтобы не выпадать при опрокидывании

пластины. В углублении 3 пластины 4,. отступив от верхнего края на 4-5 мм и как можно ближе к середине (по ширине) углубления, герметично вставлен электрод 5, электрод.16 аналогично вставлен в камеру 15,

Пластины 1 и 4 герметизируют силиконовой смазкой и скрепляют винтами, нижние отверстия каналов закрывают. пленкой, каналы заполняют раствором

геля на требуемую высоту, на поверхность полиакриламида в каналах наслаивают по стеклянным пластинам 6 воду. После образования геля в каналах свободную верхнюю часть их над гелем заполняют раствором исследуемого образца и буферным раствором путем аналогичного наслаивания, заполняют буфером углубление 3. Удалив пленку с нижних концов каналов, вставляют блок в камеру 15 на под-ставки из плексигласа 17, заливают в камеру 15 буферный раствор. Подводя к электродам постоянный ток, проводят электрофорез. Столбики геля,, имеющие в нижней части Номера каналов, соответственно номерам различных исследуемых образцов, после электрофореза помещают в один стакан для дальнейшей обработки (промывают, проявляют, фиксируют и др.)После обработки хранят в том же сосуде.

Наличие стеклянных пластин и углублений-штампов, обратных цифр на поверхности каналов для гелей приводит к ускорению в два раза всего

процесса электрофореза, повышению

его точности,на 30-40% экономит расходование дорогостоящих реактивов.

Формула изобретения

1. Устройство для диск-электрофореза в полиакриламидном геле, состоящее из двух пластин с углублением для буферного раствора и каналами для геля, отличающеес я тем, что, с целью повышения точности электрофореза, в верхней части каналов для гелей имеются углубления-пазухи с помещенными в них

стеклянными пластинками.

2, Устройство ПОП.1, отличающееся тем, что, с целью ускорения процесса анализа и экономии химреактивов, в нижней части каналов

у саглого края на их поверхности сделаны углубления-штампы обратных цифрномеров каналов.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1.Маурер Г. Диск-электрофорез. М., Мир, 1971, с.66-73.

2.Naraycm К.А., Vogel М., Lawrence J.M. Anal. Biochim, ,

12, p.526-541.

Фиг.1

f -%

Ч

Фиг.З.

Фиг.з

.V