Способ получения липидов Советский патент 1983 года по МПК C12P7/64 

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к способу получения липидов путем выращивания дрожжей на углеводородсодержаишх средах. Известен способ получения липидов, предусматривающий культивирование дрожжей на питательной среде содержащей источники азота, фосфора, минеральные соли и смесь углеводородов , включающую н-алкаиы в качестве источника углерода, в усло виях аэрации при изменении соотношения источников питания с последую щим выделением липидов заданного состава f . Согласно известному способу, изменяя в питательной сред соотношение C:N, С , Pj Oj , концентрац источника углерода и скорость пото ка среды, получают Липиды, в соста ве которых в зависимости от заданного соотношения источников питаНИН преобладают либо триглицериды свободные жирные кислоты, либо фос фолипиды. Недостатком способа является невысокий выход биомассы и отдельных липидных фракций. Цель изобретения - увеличение выхода биомассы и отдельных липидных фракций. Цель достигается тем, что при осуществлении способа получения ли пидов, предусматривающего культив рование дрожжей на питательной сре де, содержащей источники азота, фо фора, минеральные соли и смесь угл водородов, включающую н-алканы в ка честве источника углерода, в условиях аэрации при изменении соотношения источников питания с последую щим выделением липидов заданного состава, в процессе культивировани изменяют соотношение содержания углерода н-алканов и кислорода, пр этом для получения липидной фракции, обогащенной фосфолипидами и жирными кислотами или глицеридами и стеринами, соотношение составляе 1:10 - 1:60 или 1:0,5 - 1:12,5 соо ветственно. Способ осуществляют следующим образом. Дрожжи культивируют при аэрации на питательной среде, содержащей ис точники азота, фосфора, калия и маг НИН в количествах, оптимальных для активного роста микроорганизма продуцента. В качестве источника углерода используют нефтяные дистил ляты. При этом подачу воздуха регулируют в зависимости от концентрации в среде нефтяного дистиллята и содержания в нем н-алканов таким образом, чтобы соблюдалось соотношение содержания углерода н-алканов и кислорода. Ферментацию ведут при температуре ЗО-ЗЭ С, рН 3,8-5,0, коэффициенте разбавления 0,35-0,07 ч . По окончании культивирования биомассу отделяют и экстрагируют ЛИПИДЫ органическими растворителями. При мер 1. Дрожжи Candida gui 1 1 iеrmondIi культивировали в ферментере с рабочим заполнением М-15 кг на питательной среде следующего состава, мг/л: 70%-ная фосфорная кислота930,0 Хлорид калия990,0 Сульфат магния 330,0 Хлорид железа9,0 Сульфат цинка31,0 Сульфат марганца 25,5 Сульфат меди7,2 Источником азота служил титрующий агент - 6%-ный раствор гидроокиси аг оиония. В качестве источника углерода использовали нефтяной дистиллят (фракции 240-360%) в концентрации 10%, содержащий 20% н-алканоз Концентрация н-алканов в среде 2%. Скорость разбавления 0,25 . Интенсивность аэрации среды воздухом 200 л/кг, ч. Заданные параметры культивирования давали соотнесение углерод н-алканов: кислород, равное 1г14.. Культивирование проводили при рН 4-4,5 и температуре 30-32 с. Дрожжевую суспензию из ферментера сгущали декантацией и сепариро:ванием. Биомассу сушили на распылительной сушилке и экстрагировали ЛИПИДЫ смесью бензин - этанол - вода в соотношении 80:19:1. После отгонки экстрагента анализировали состав липидов. Содержание липидов в биомассе до экстракции было 12,7%. Состав липидов,%: Фосфолипиды28,9 Глицериды36,0 Свободные жирные кислоты28,5 Стерины2,6 Стериновые эфиры воска4,О П р и м е р 2. Способ осуществляи согласно примеру 1, но скорость азбавления составляла 0,1 , а нтенсивность аэрации воздухом 50 л/кг.ч. При этом соотношение одержания углерода н-алканов и кисорода составляет 1:44. После культивирования содержание ипидов в биомассе До экстракции ыло 15,2%. Состав липидов,%: Фосфолипиды32,6 Глицериды 27,8 Свободные жирные кислоты25,0 Стерины2,3 Стериновые эфиры воска2,3 3 83925 Пример 3. Дрожжи o.ndida salmonicola культивировали согласно примеру 1, но концентрация нефтякого дистиллята в среде была 20%, содержание н-алканов в дистилляте 35%, что составляло концентрацию5 н-алканов 7%. Скорость разбавления среды 0,3 , интенсивность аэрации 360 . При этом соотношение содержания углерода н-алканов и кислорода составляет 1:6.10 Содержание липидов в биомассе до экстракции было 11,3%. . 84 Состав липидов, %: Фосфолипиды 15 Глицериды 67,6 Свободные жирные кислоты 9,9 Стерины 5,7 Стериновые эфиры воска 1,8 Таким образом, предлагаемой спосоС позволяет увеличить выход биОмассы с высоким содержанием липидов определенной фракции.

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИПИДОВ,, предусматривающий культивирование дрожжей.на питательной среде, содержащей источники азота, фосфора,.минеральные ооли и смесь углеводородов, включающую н-алканы в качестве источника углерода, в условиях аэрации при изменении соотношения источников питания с последующим . выделением липидов заданного состава, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода отдельных липидных фракций, в процессе культивирования изменяют соотношение содержания углерода н-алка- нов и кислорода, при этом для получения липидной фракции, обогащенной фосфолипидами и жирными кислотами или глицеридами и стеринами, соот- нсмиение составляет 1:10 - 1:60 или 1:0,5-1:12,5 соответственно.§