Способ выделения биологически активных веществ из прополиса Советский патент 1981 года по МПК A61K35/64 

(54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ-АКТИВНЫХ Изобретение относится к технолог получения биологически активных веществ для косметических препаратовиз прополиса путем экстракции. Известен способ получения биологически активных веществ из прополи са экстрагированием со смесью этило вого спирта и воды с последующей фильтрацией 1. Однако этот способ не .обеспечивает полного наделения флавоноидов, что связайо с выбором растворителей (спирт, вода.). Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату является способ вьщеления биологически-активных веществ из прополиса путем экстракции смесью этилового спирта и воды 2. ; , Недостаток известного способа неполное отделение биологическиактивных веществ, так как применени в К1ачестве растворителей только этилового с/тирта и воды не обеспёчи вает вьщеления широкой гаммы биолог чески активных составных частей про полиса, кроме этого этот спосов нё обеспечивает полного отделения меха нических примесей и естественных загрязнений. ВЕЩЕСТВ ИЗ ПРОПОЛИСА Цель изобретения - более полное выделение биологически - активных веществ из прополиса. Поставленная цель достигается тем, что в смесь этилового спирта и воды добавляют глицерин, обеспечивая соотношение в смеси этилового спирта, глицерина и воды 75-85, 5-10 и 1015 вес.% соответственно, а соотношение прополис: экстрагент - 1:5, экстракцию ведут при 35-45°С с последующим охлаждением до (-5) (-8 )С, а остаток после экстракции обрабатывают норковым маслом при 75-85°С и соотноиюнии остаток: норковое масло - 1:2. Способ осуществляется следующим образом. Натуральный прополис охлаждают до температуры не ниже -ЮЯС,затем измельчают до величины гранул 2-4 см. Измельченный прополис и растворитель - глицерин и этиловый спирт загружают в реактор и при перемешивании нагревают до 40t . При этой температуре проводят экс тракцию прополиса в течение 4ч. Потом экстрагируемую смесь охлаждают холодной водой до 20 i 5С и пересасывают в другой реактор. При перемешивании охлаждают экстрагируемую смесь в течение 5-6 ч до (-5)-(-8 )С Охлажденную смесь фильтруют на нутчфильтре при вакууме 0, 0,01 МПа (0,6± 0,1 кгс/см).

Экстракцию остатка прополиса норковым маслом проводят при 80 ± 5°С в течение 3ч. Горячую смесь фильтруют при sot нутч-фильтром при вакууме 0,06to,01 МПа (0,6 ±0,1 кгс/см).

Горячий фильтрат - масляный экстракт прополиса выпускают в емкость для хранения.

Для полного выделения биологичес ки активных веществ из прополиса проделана серия опытов с целью подбора растворителей и оптимальных их соотношений, а также для сравнения с известным способом.

Таблица 1

Из приведенных испытаний видно. что наиболее -полное вьщеление флавоноидов (до 70%) достигнуто при раст-, ворителе, содержащем, вес.%: , Спирт этиловый 75-85 . Вода 10-15 Глицерин 5-10 63,0 65,0 68,0 70,0

23,9 17,8 16,0 13,2

Из опытов видно, что оптимальное соотношение прополис : растворитель 1:5, так как при соотношении 1:2, 1:3, 1:4 происходит неполное выделение флавоноидов, а при соотношении 1:6 и 1:7 повышается расход раствори70,0 70,0

10,4 9,1

40 теля и соответственно снижается концентрация флавоноидов.

Для определения оптимальной температуры наиболее полного выделения восков, бальзамов и смол из водно6 спирто-глицеринового экстракта,проПри использовании растворителя, состоящего из этилового спирта и глицерина, выход флавоноидов снижается., Для определения соотношения полис: растворитель проведены опыты, результаты которых даны в табл. 2. Таблица 2

ведены опыты, результаты которых даиы в табл.3.

Т а б л и ц а 3

Содержание носков, бальзатлемов, смол в спиртоглице риновой смеси, вес. %

5 0,5

Из опытов видно, что снижение температуры способствует полному вьщелению носков, бальзамов, смол в спиртоглицериновую смесь. Уже при -5°С вьщеляются все воска, бальзамы и смолы, а при повышенной температуре еще есть воска, бальзамы и смолы в спиртоглицериновой смеси.

Для определения оптимальных соотношений остаток прополиса:норковое масло проведены опыты, результаты

которых даны в табл,4,

Т а б л и ц а 4

:i

Извлекаемые вещества

Экстрация

Флавоноидная фракция прополиса

, Флавоны - хризин,тектохризин и другие Флавонолы - галангин,изальпин рамноцитрин, кемферид.

Флавононы- пиноцембрин, пиностробинпроизводные кверцетина Ароматические кислоты - кофейная, феруловая, коричная, бензойная кислоты Ароматические альдегиды - ванилин, изованилин

Воднорастворимые витамины В, С, РР Восковая часть прополиса: .

свободные углеводороды 10%, жирные кислоты 15%

сложные эфиры, в главнём производные церотиновой кислоты 70%;

бсшьэамы маслоцаствовимый вйтами

Из опытов видно,.что оптимальное соотношение остаток прополиса: норковое масло - 1:2, так как соотношении 1:1 растворимость бальзамов, восков и смол неполное, а при соотношении 1:3 повышается расход нормального масла и соответственно снижается концентрация восков, бальзамов и смол в экстракте.

датя определения оптимальной

0 температуры в процессе экстракции остатка прополиса норковьм маслом проведены опыты, результаты которых даны в табл. 5.

Таблица 5

5

Т,«С

Растворение восков, бальзамов, смол в норковом масле, вес.%

20

Из опытов видно, что температур

30 до не обеспечивает полную, экстракцию восков, бальзамов и смол, поэтому снижается выход. Применение же температуры выше снижает качество про35дукции..

Вещества, извлекаемые на каждом этапа экстракции, указаны в табл. 6.

Таблица

П ji и Me р 1. Натуральный прополис охлаждают в холодильнике не ниже ,затем измельчают на измельчителе до величины гранул 2-4 см. В чи тый эмалированный реактор с пароводяной рубашкой вместимостью 100 л, снабженный эмалированной якорной мешалкой и термометром, загружают 10 кг измельченного прополиса и растворитель следующего состава:

кг вес,% .Этиловый спирт

96%-ный,в/о 41,35 82,7

Вода6,00 12,0

Глицерин

94%-ный 2,65 5,3

Включают мешалку и обогрев реактора. Нагревают содержимое реактора до .40 t 5 С. При этой температуре проводят экстракцию прополиса при перемешивании в течение 4ч. Экстрагируемую смесь охлаждают холодной вбдой до 20 ± 5С и пересасывают в другой реактор, снабженный якорной мешалкой и водяной рубашкой. При перемешивании охлаждают экстрагируемую смесь в течение 5-6 ч до (-5)-(-8)с.Охлажденную смесь фильтруют на нутч-фильтре при вакууме C,06t 0,01 МПа (0,6 ± 0,1 ксг/смД ).

Фильтрат - водно-спиртовой экстракт прополиса в количестве 53 кг, содержащий 7 кг флавоноидной фракции прополиса или 70% прополиса, собираю в емкость для хранения. .

Нерастворимый в смеси растворителей остаток прополиса составляет 3 кг или 30% от взятого прополиса.

В общем объеме раствора фильтрата содержится вес.%: вода и этиловый спирт 81,8.; глицерин 5,0; Флавоноидная фракция 13,2.

В чистый эмалированный реактор с пароводяной, рубашкой вместимостью 25 л, снабженный якорной мешалкой и термометром, загружают 3 кг высушенного остатка прополиса и 6 кг норкового масла. Включают мешалку и обогрев реактора. Содержимое реактора нагревают при перемешивании при sot 5°С в течение 3 ч. Горячую смесь выпускают из реактора и при 80 фильтруют на нутч-фильтре при вакууме р,06±0,01 МПа (0,6 t 0,1 ксг/см

Горячий фильтрат - масляный .экстракт прополиса в количестве 7 ,1 кг, содержащий 16% прополиса или 1,6 кг восковой части прополиса,выпускают в емкость для хранения.

Масляный фильтрат содержит,вес.%: BOCKOByidT частв прополиса 22,0; норковое масло 78,0/на фильтре остаются механические примеси в количестве 1,4 кг или 14% от взятого прополиса, которые выбрасываются.

Пример 2. Натуральный прополис охлаждают в холодильнике не иже (-10)С, затем измельчают на

измельчителе до величины гранул - , 2.-4 см.

В чистый эмалированный реактор с пароводяной рубашкой вместимостью 5 100 л, снабженный эйалированн-ой мешалкой и термометром, загружают 10 кг измельченного прополиса и растворитель следующего состава;

кг вес.% Q Этиловый спирт

96%-ный, в/о 34,0 85,0 Вода - 4,0 10., О Глицерин 2,0 5,0 ВКлю.чают мешалку и обогрев реактора. Нагревают содержимое реактора до 40± 5°С; При этой температуре проводят экстракцию прополиса при перемешивании в течение 4ч.

Экстрагируемую смесь охлаждают холодной водой до 20 t и пересасывают в другой реактор,снабженный якорной мешалкой и водяной рубашкой. Прл перемешивании, охлаждают экстрагируемую смеси в течение 5-6 ч до (-5) - (-8)с. Охлажденную смесь фильт- 5 РУют на нутч-фильтре при вакууме 0,0610,01 МПа (0,610,1 кгс/см -).

Фильтра.т - водно-спиртовой экстракт прополиса в количестве 42,8 кг,сЬдержащий 6,8 кг флавоноидQ ной фракции прополиса или 68% от

взятого пропрлиса, собирают в емкость -для хранения.

Нерастворимый в смеси растворителей остаток прополис.а составляет . 3,2 кг или 32% от взятого прополиса. , В общем объеме раствора фильтрата содержится, вес.%: вода и этиловый спирт 79,0; глицерин 5,0; фланоидная фракция прополиса 16,0.

В чистый эмалированный реактор 0 с пароводяной рубашкой вместимостью 25 л, снабженный якорной мешалкой и термометром, загружают 3,2 кг высушенного остатка пропсэлиса и 6,4 кг норкового масла. Включают мешалку и обогрев реактора. Содержимое реактора нагревают, перемешивая при 801 5с в течение 3ч.

Горячую смесь выпускают из реактора и при фильтруют на нутч0 фильтре при вакууме 0,06 ± 0,01 МПа (0,610,1 кгс/см).

Горячий фильтрат - масляный экстракт прополиса в количестве 7,5 кг содержащий 16% от взятого прополиса или 1,6 кг восковой части прополиса, выпускают в емкость для хранения.

В масляном фильтрате содержится, вес.%: звосковая часть прополиса 21,0; норковое масло 79,0..

0 На фильтре остаются механические примеси в количестве 1,4 кг или 14% от взятого прополиса, которые выбрасываются

Пример 3. Натуральный прополис охлаждают в хо.подильнике не ниже температуры () , затем измельчают на измельчителе до величины гранул 2-4 см. В чистый эмалированный реактор с пароводяной рубашко вместимостью 100 л, снабженный эмали рованной якорной мешалкой и термомет ром загружают 30кг измельченного пр полиса и растворитель следующего сос тава:кг вес.% Этиловый спирт 96%-ный,в/о . 42,50 75,0 Глицерин 94%-ный5,00 10,0 Включают мешалку и обогрев реакто ра . Нагревают содержимое реактора до 40t 5°С. При этой температуре проводят экстракцию прополиса при перемешивании в течение 4 ч. Экстрагируемую смесь охлаждают холодной водой до 20 t 5°С и пересасывают в другой реактор, снабженный якорной мешалкой и водяной рубашкой. При перемешивани охлаждают экстрагируемую смесь в течение 5-6 ч до (-5) - (-8)с. Охлажден ную смесь фильтруют на нутч-Лильтре при вакууме 0,0610,01 МПа (6,6 t ±0,1 кгс/см -). Фильтрат - водно-спиртовой экстракт прополиса в количестве 61 кг, содержащий 7,0 кг Ллавоноидной фракции прополиса или 70% от взятого прополиса, собирают в емкость для хранения. Нерастворимый в смеси растворителей остаток прополиса составляет 3 к или 30% от взятого прополиса. В общем объеме раствора фильтрата содержится, вес.%; вода и этиловый спирт 80,5; глицерин 8,0; флавоноидная фракция 11,5. В чистый эмалированный реактор с пароводяной рубашкой -вместимостью 25 л, снабженный якорной мешалкой и термометром, загружают 3 кг высушенного остатка, прополиса и 6 кг норкового масла. Включают мешалку и обогрев реакто ра. Содержимое реактора нагревают, перемешивая, при 80 1 .в течение 3 ч. Горячую смесь выпускают из реак тора и при 80± фильтруют на нутч фильтре при вакууме 0,06 t 0,01 МПа (0,6 i 0,1 кгс/см.), Горячий фильтрат - масляный экстракт прополиса в количестве 7,1 кг, содержащий 16% от взятого прополиса или 1,6 кг восковой части прополиса, выпускают в емкость для хранения. В масляном фильтрате содержится, вес.%: восковая часть прополиса 22,0 норковое масло 72,0. . На фильтре остаются механические примеси в количестве 1,4 кг или 14% от взятого прополиса, которые вьтбрасываются. Использование в качестве растворителя этилового спирта, глицерина и воды позволяет выделить из прополиса более широкий диапазон .биологически активных веществ. выде ления, бальзамов, восков, смол применяетбя норковое масло. Благодаря низкой температуре застывания норковое масло обладает высокой экстрагирующей способностью, что связано с высоким поверхностным натяжением.Поэтому норковое масло является оптимальным экстрагирующш- компонентом при экстракции смол, восков и бальзамов прополиса. Таким образом, при вышеизложен ном разделении прополиса для косметических целей получают, водноспирто-глицериновый экстракт, состоящий из флавоноидов и содержащий в своем составе все биологически активные компоненты прополиса, мягкие режимы экстракции которого обеспечивают сохранение биологически активных компонентов флавоноидов,а оптимальное соотношение растворителей обеспечивает ускорение процесса экстракции, полноту извлечения и оптимальную концентрацию флавоноидов в экстракте; в технологии приготовления косметических препаратов пре-. дусмотрено введение водно-спиртоглицеринового- экстракта в технологический процесс при температуре выше 50 °С. Получают экстракт бальзамов, смол и восков прополиса на норковом масле. Воска прополиса придают крему блеск. В смеси с норковым маслом является полезной добавкой косметических препаратов. В технологии приготовления косметических препаратов предусмотрено введение масляного экстракта, бальзамов, восков и смол в технологический процесс при 8.090°С. А также получают фракции механических примесей и загрязнений прополиса, которые выбрасываются. Формула .изобретения Способ выделения биологически активных веществ из прополиса путем экстракции смесью этилового спирта и эоды, отличающийся тем, что, с целью более полного выделения вещества, в смесь этилового спирта и воды добавляют глицерин, обеспечивая соотношение в смеси этилового спирта, глицерцна и воды 75-85, 5-10 и 10-15 вес.% соответственно, а соотношение прополис:экстракт 1:5, экстракцию ведут при 35-45°С с .последующим охлаждением до (-5)-(-8)С, а остаток после экстракции обрабатывают норковым маслом при и соотнЬшений остаток:норковое масло l.-i-. Источняки информации, ПИШажйе во внимание при экспертизе 1. Научные исследования и мнения о составе, свойствах прополиса и его применение в терапевтических целях. Бухарест, Апимондии, 1975, с. 25 2. Новые исследования по апитерарии (Второй Меяэдународный симпозиум по апитерапии. Бухарестг2 -7 сентября 1976), Апимондий, ьухарест, 1976, с. 155-157 (прототип)