Штамм RавIеS VIRUS N777-м,используемый для контроля иммуногенной активности антирабических вакцин Советский патент 1982 года по МПК C12N7/00 A61K39/205 

ИзоОретение относится к ветеринарной вирусологии и предназначается для контроля им1 1уногенной активности антирабических вакцин.

Известно, что при определении иммуногенных свойств вакцины отклонения в результатах зависят от штамма вируса, применйемого для заражения иммунизированных подопытных животных. Использование случайных недостаточно изученных изолятов вируса бешенства существенно отражается на объективной оценке вакцины.

В настоящее время существует потребность в стабильном, стандартном шта14ме, применение которого способствовало бы унификации методов контроля иммуногенностн антнрабических вакцин и обеспечило бы однородность результатов в различных лабораториях. Таким штаммом отчасти- является применяемый штамм фиксированного вируса бешенства CVS 1.

Недостатком штамма CVS является его ограниченная патогенность для мелких лабораторных животных.Вместе с тем, штамм полностью апатогенен для крупных животных при переферическом заражении. Это обстоятельство

1искл1бчает возможность использования в тех случаях, когда возникает необходимость испытать иммуногенные свойства антирабической вакцины на тех видах животных, для которых она предназначается (крупный рогатый скот, овцы, собаки и т. д.).

Цель изобретения - изыскание штамма Rabies virus W777-M, исполь10зуемого для контроля иммуно1-енной активности антирабических вакцин.

Штамм Rabies virus № 777-М выделен в 1977 на территории Азербайджанской ССР из головного мозга собаки, пав- ,

15 шей с проявлением характерных клинических симптомов бешенства. Рабическая природа вируса доказана в реакции нейтрализации с коммерческим гам-маглобулином методом иммунофлюоресценции.

Предлагаемый штамм 777-М обладает следующими свойствами.

Морфологические свойства. Зре.пые 25 J:. .рионы имеют пулевидную форму, один ,конец которой закруглен, другой плос|кий. Длина вирионов 80 - 180 нм, ширина 60 - 80 нм. В мозге павших животных образуются тельца Бабешд30 негри. Адаптационные свойства. Пассирование вируса через мозг мьлией показало его высокую адаптационную способность к этому виду животных. При первом заражении инкубационный перио равнялся 9-ти дням, при последующих пассажах 6-7 дням. Титр вируса первого пассажа при заражении в моз составил 4,5 LD 50/0,03 мл/ при даль нейшем пассировании значения титров .стабильно установились в пределах 5,2 - 5,6 LD 50/0,03 мл. Патогенные свойства. Штамм 777-м испытан с положительными результатами на ряде теплокровных животных. При переферическом заражении мы, шей титр вируса составляет при под кожном введении инокулята 2,0 - 2,6 LD 50/03 мл, в мышцу 1,9 - 2,2 LD 50/03 мл, внутрибрюшинно - 2,0-2 LD 50/03 мл, в губу 1,8-2,3 LD 50/01 мл. Показатель индекса инвазивности мышей не превьшает 3,0, ; Высокая патогенная активность штамма № 777-М обнаруживается также при заражении других видов животных Собаки заболевают на 15-й день посл инокуляции вируса, лисы на 9-10-й день, овцы на 9 - 13-й день. Продолжительность клинических симптомов. У овец в течение 1 дня, лис 1-2 дней, собак 1-3 дней. Вирус вводится животном в область жевател ной мышцы в дозе, составлякадей 200 250 тыс, мышиных LD50/1,0 мл при интрацеребральном титровании и 220 240 мышиных LD 50/1,0 мл при титровании в губу. Указанная доза определена как разрешающая для овец, собак и лис и скоррелирована путем одновременного сравнительного титро ания вируса на этих животных и белых мышах. Объем вируссодержащей извеси должен быть физиологически оптимальным для каждого вида животных и определяться согласно возрастным, весовым и другим особенностям организма животного. Серологический свойства. Штамм обладает ант21генной специфичностью, не нейтрализуется в реакции нейтрализации с коммерческим гаммаглобулином и специфической сывороткой. При исследовании мозга павших животных методом иммунофлуоресценции обнаруживаются специфические светящиеся тельца - включения. Штамм хранится в виде 20 %-ной суспензии мышиного мозга, приготовленной на физиологическом растворе с добавлением 2%-ной нормальной бычьей сыворотки, или в виде погруженных в 50 %-ный раствор глицерина отдельных мозгов кадшей при ,причем крактически не снижает патогенной активности в течение года. Формула изобретения Штамм Rabies virus 777-М (хранится в коллекции вирусов Всесоюзного государственного научно-контрольного института ветеринарных препаратов мех СССР), используемый для контроля иммуногенной активности антирабических вакцин. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Методы лабораторных исследований по бешенству, ВОЗ, Женева, 1975, с. 269.