Способ определения карбамида Советский патент 1982 года по МПК G01N27/48 

I

Изобретение относится к аналиIтической химии, в частности к определению карбамида в растворах, сточных водах и плавах, и может быть использовано в биологии, медицине и других областях.

Известны способы определения карбамида в растворе путем гидролиза карбамида в присутствии фермента уреазы до углекислого аммония с последующим определением иона аммония титриметрическим методом ll.

Однако титриметричёский метод определения карбамида недостаточно чувствителен.

Наиболее близким техническим решением является способ определения карбамида, основанный на реакции гидролиза карбамида в присутствии фермента уреазы до углекислого аммония. В способе концентрация карбамида определяется фотометрически по реакции иона аммония с реактивом Неслера Г23 .

Однако способ из-за сложности реакций и неустойчивости реактивов длителен, трудоемок и недостаточно воспроизводим.

Цель способа - повышение воспрсизводимости определения и сокращение времени анализа.

Поставленная цель достигается тем, что, согласно способу определения карбамида, основанном на реакции гидролиза карбамида в присутствии фермента уреазы до углекислого аммония, в пробу после гидролиза добавляют раствор формальдегида в количестве k,8-S,2% к взятому объему и универсальную буферную смесь до остановления конечного рН 5,05,5 и снимают полярограмму полученного раствора.

Сущность способа состоит в измерении предельного тока продукта двойного превращения карбамида: гидролиз до (МН)лСО,и реакция иона .аммония с. формальдегидом с образоваием полярографически активных меилольных производных.

П р и м-е р. 20 мл анализируеого раствора карбамида (З-О 510 М) с рН близким к нейтральному помещают в мерную колбу емкостью 2$ мл, добавляют 0,3 мл раствора реазы приготовленного известным способом. Раствор после перемешивания термостатируют при 37-«0 с в течение 20 мин. После охлаждения раствора до комнатной температуры объем доводят до метки дистиллированной водой. 15 мл полученного раствора помещают в мерную колбу емкостью 25 мл.добавляют 2,5 мл универсального буферного раствора с рН 5,0 и десятикратной по сравнению с табличной концентрацией компонентов буферной смеси, мл раствора формальдегида 0) и доводят объем до метки дистиллированной водой. Раствор полярографируют в интервале потенциа;1ов (-0,5)-(1.3) В относительно нормального каломельного электрода, потенциал полуволны -0,97 В. Концентрацию карбамида находят методом добавки стандартного раствора (1-10 -0,1 М). Измерение высот волн проводят с учетом фонового тока,, полученного в том же растворе, но без карбамида.

Предлагаемый способ позволяет определять концентрацию карбамида 5, М с относительным стандартным отклонением 0,03 в течение 0 мин.

Формула изобретения

Способ определения карбамида, основанный на реакции гидролиза карбамида в присутствии фермента уреазы до углекислого аммония, о тличающийся тем, что, с ,целью повышения воспроизводимости определения и сокращения времени анализа, в пробу после гидролиза добавляют раствор формальдегида в количестве 4,8-5,2 к взятому объем и универсальную буферную смесь до установления конечного рН раствора 5,0-5,5 и снимают полярограмму полученного раствора.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Кольтгоф И.М., Стенгер В.А. Объемный анализ, т.2. Л., Госхимиздат, 1952, с. 217.

2. Колб В.Г., Камышников B.C. Клиническая биохимия. Минск, Белорусь, 1976, с. (прртотип).