Способ определения бактерицидности производственных сточных вод Советский патент 1982 года по МПК G01N21/77 C02F5/10 C02F5/10 C02F101/30 C02F103/02 

(5) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БАКТЕРИЦИДНОСТИ ПРОИЗВОДСТВЕННЫХ СТОЧНЫХ ВОД

1

Изобретение относится к Ьиохимичес кой очистке сточных вод и может быть использовано для быстрого определения бактерицидности производственных сточных вод и их компонентов, а также для контроля за работой сооружений.

Известен способ контроля качества биохимической очистки сточных вод, заключающийся в,сравнении двух видов дегидрогеназной активности исходной иловой смеси с добавлением 1-21 иеочи щенной сточной воды и оценке качества биохимической очистки по разности во времени появления окрашивания сравниваемых образцов l J.

Количество/добавляемой неочищенной сточной воды устанавливают в зависимости от значения ее БПКролиКонтроль за изменением дегидрогеназной активности осуществляют, используя известное свойство трифенилтетразолия хлористого изменять окраску при переходе из бесцветной окисленной формы в окрашенную (формазан) восстановленную, когда в образце возникают анаэробные условия.

Способ может быть применен для контроля качества процесса биохимической очистки промышленных сточных вод.

Однако использование визуального метода фиксирования момента окрашивания приводит к снижению точности

10 определения.

Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату к предлагаемому является способ определения бактерицидности производ15ственных сточных вод и их компонентов, который включает следующие операции: наливают в ряд пробирок по 10 мл исследуемой сточной воды или искусственного раствора с исследуе20мым бактерицидным соединением в раз- личных разведениях. В контрольную пробирку наливают по 2 мл иловой жиакпсти с адаптированным активным илом и после тщательного перемешивания по.1,5 мл U-Horo раствора 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида (ТТХ), что соответствует 0, 810 моль/л в конечном объеме исследуемого раствора. Содержимое пробирок вновь перемешивают и проби ки ставят в термостат или водяную баню с температурой 37°С, Через определенный промежуток времени в зависимости от степени развития бактериальной флоры активный ил приобретает окраску от розового до рубинового цвета за счет образовани кристаллов формазана Zj. Недостатки известного способа заключаются в сравнительно низкой чувствительности и недостаточной скорости определения (продолжительность анализа 2 ч). Цель изобретения - увеличение точности и чувствительности с одновр менным сокращением времени определения бактерицидности производственных сточных вод. Указанная цель достигается тем, что в способе, основанном на сравнении различных видов дегидрогеназной активности иловой смеси при С включающем операцию добавления в образць раствора соли тетразолив) с последующей оценкой бактерицидности по окрашиванию сравниваемых образцов, в качестве соли тетразолия используют раствор бромистого ЗЧ 5диметилтиазолил-2)-2,5-дифенилтетразолия (МТТ) концентрации 0, 0,56 Ю моль/л в конечном объеме исследуемого рартвора. На фиг. 1 представлено изменение дегидрогеназной активности с ростом концентрации МТТ; на фиг. 2 - зависи мость накопления формазана от времени: а - при применении соли МТТ, «Г- соли ТТХ. С ростом концентрации МТТ (фиг.1) наблюдается увеличение дегидрогеназной активности. Однако при концентра ции более О,5б«10 моль/л отмечено ингибирование микроорганизмов актизного ила, и кривая дегидрогеназной активности падает, в связи с чем в качестве рабочих пределов выбраны концентрации МТТ в конечном объеме исследуемого раствора 0, 0,5б- моль/л. Для ТТХ предельно допустимой концентрацией, при которой не наблюдает ся ингибированич, является 0, мол.ь/л, а рабочей концентрацией выбрана концентрация O.fBIO моль/л в конечном объеме исследуемого раствора. Наблюдаемое явление можно объяснить гораздо большей проницаемостью МТТ в микробную клетку и подключения этого акцептора в более глубокие места дыхательной цепи. Следовательно, в предлагаемом способе расходуется меньше реактивов и возрастает чувствительность. В,табл. 1 приведены результаты определения общей дегидрогеназной активности микроорганизмов активного ила предлагаемым и известным способами. Из табл. 1 видно, что ошибка воспроизводимости результатов по предлагаемому способу почти вдвое ниже, чем по известному. В табл. 2 приведены сравнительные исследования зависимости накопления формазана от времени-при использоваНИИ МТТ и ТТХ, показывающие, что использование МТТ в предлагаемых пределах позволяет сократить время определения до мин вместо 2 ч с ТТХ. Способ осуществляют следующим образом. Наливают в пробирки одинаковые объемы (10 мл) сточной воды или искусственного раствора. В контрольную пробирку наливают такой же объем разбавляющей воды. Затем доливают во все пробирки по 2 мл иловой жидкости с адаптированным активным илом (содержание 9,2-10 мг). Содержимое пробирок тщательно перемешивают и добавляют раствор МТТ из расчета 0,,56-10 моль/л в конечном объеме исследуемого раствора. Содержимое пробирок вновь тщательно перемешивают и термостатируют при . Через 15 мин процесс восстановления прекращают добавлением к испытуемой, смеси 1 мл ледяной уксусной кислоты, которую вносят непосредственно в осадок, и смесЬ центрифугируют 10 мин при 5000 об/мин. Осадок выдерживают в растворителе, например спирте,до полного обесцвечивания. Затем вновь центрифугируют и окрашенные вытяжки калориметрируют на фотоэлектрическом абсорциометре-нефелометре-б9 со светофильтром № 1в кювете 10 мм. Пример 1. В первую пробирк помещают 10 мл сточной воды Белгородского витаминного комбината, во вторую 10 мл воды (контроль). Затем в каждую пробирку вносят по 2 мл иловой жидкости с адаптированным активным илом (содержание 9,2-10 мг Перемешивают и добавляют по 1 мл 0,1%-ного раствора-МТТ (т.е. О,10 10 моль/л в конечном объеме) повторно перемешивают, помещают в термостат при . Через 15 мин добавляют к испытуемой смеси 1 мл ледяной уксусной кислоты. П р м е р 2. Определение ведут аналогично примеру 1. В табл. 3 приведены результаты анализа исследуемой и контрольной п бы сточной воды по примерам 1 и 2. Ингибирование дегидрогеназной активности больше чем на 20% указывает на токсичность промышленных сточных вод. Применение предлагаемого способа для ускоренного определения бактерицидности производственных сточных вод позволит повысить в два раза точность определения, снизить расход реагентов и повысить чувствительность метода. При этом время определения сокращается с 2 ч до 15 мин, т.е.: приблизительно в восемь раз. ( Его использование на очистных вооружениях обеспечит санитарный эффект за счет оперативного контроля за состоянием активного ила и определением токсичности воды при биохимической очистке. Таблица 1

37,8 37,7 Ю.З З.О 3.,9

34,5 Ср.36,5

Таблица 2

Ср.65,2 1 Сточ- У, 2,68 0,382 17,3 мая 2 Сточ- 7, 2,69 0,296 13,5 ная

КонтрольФормула изобретения Способ определения бактерицидности производственных сточных вод путе сравнения различных видов дегидрогеназной активности иловой при 35-37 0, включающий введение в о разец соли тетразрлия с последующей оценкой бактерицидности по интенсивности окраски, отли чающий с я тем, что, с целью сокращения времени и пов.ышения точности анализа, в качестве соли тетразолия используют раствор бромистого 3-(,5Таблица 3

0,388 17,8 0,372 0,3б5 1,88 0,282 2,2 диметилтиазолил-2)-2,5 дифенилтетразолия концентрации 0,,56-10 моль/л в конечном объеме исследуемого раствора. Источники информации, принятые.во внимание при экспертизе 1.Авторское свидетельство СССР № , кл. С 02 С 1/02, 1976. 2.Зотов В. Ускоренное определение бактерицидности производственных сточных вод и их компонентов. - Водоснабжение и санитарная техника, 1972, № 3 (прототип).

Ю

ю-ргЗ «м/й

Г0 Фиг{

W во 90 120 150 180 210 2ifO ин Фиг. 2