Способ выявления кровеносных сосудов на гистологических препаратах Советский патент 1982 года по МПК G01N33/483 A61B10/00 

(54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ КРОВЕНОСНЫХ СОСУДОВ НА ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТАХ

1

Изобретение относится к медицине, а именно к морфологии, и может быть использовано при гистохимическом исследовании срезов кровеносных сосудов.

Известен способ выявления кровеносных сосудов на гистологических препаратах путем окраски их протравными красителями (гематоксилином, бразилином, кармином) и последующую дифференцировку солями трехвалентного железа 1.

Однако известный способ длителен по времени и не позволяет получить необходимого уровня контрастности структур кровеносных сосудов.

Известен также способ выявления кровеносных сосудов на гистологических препаратах железным гематоксилином по Гегквисту, заключающийся в окраске 1%-ным раствором гематоксилина до выявления желательных структур в срезах, предварительно протравленных в 5%-ном растворе хлорного железа в течение 5 мин. Вся процедура выявления занимает 8-10 мин 2.

Однако существующий способ выявления не позволяет достаточно контрастно дифференцировать нужные структуры кровеносных сосудов.

Целью изобретения является повышение качества гистологических препаратов.

Цель достигается тем, что согласно способу выявления кровеносных сосудов на гистологических препаратах путем их протравливания солями трехвалентного железа и окраски отличительной особенностью является то, что срезы после окраски обрабатывают 1%-ным раствором трилона В при 45-50°С.

,Q Предлагаемый способ осуществляется следующим образом.

Срезы кровеносных сосудов протравливают солями трехвалентного железа (например, хлористым железом, железо-аммонийными квасцами). Концентрация растворов и время протравливания зависит от выбора соли, типа кровеносного сосуда и толщины среза. Затем срезы окрашивают одним из протравных красителей, например гематоксилином или бразилином. Причем

2Q окраску проводят с небольшим перекрашиванием изучаемых структур. После этого на срезы наносят 1°/о-ный раствор трилона В при 45-50°С, с помощью которого производят дифференцировку нужных структур.

Пример. Проводят выявление коронарных артерий сердца человека на гистологических препаратах. Парафиновые срезы коронарных артерий, фиксированных в кальций-формоле, монтируют на предметных стеклах, после отводки окисляют в 0,5%-ном растворе марганцевокислого калия - 2 мин, промывают дистиллированной водой, отбеливают 50%-ной щавелевой кислотой - 1-2 мин и снова промывают дистиллированной водой. Окисление и отбеливание проводят для повышения качества окра-ски. Затем для протравливания наносят на срезы 6%ный раствор железо-аммонийных квасцов, подогревают над пламенем спиртовки до 45-50°С - 2-3 мин, сливают квасцы и, не промывая, наносят на срезы для окраски 1%-ный раствор свежеприготовленного гематоксилина, также подогревают над пламенем спиртовки до 45-50°С - 2-3 мин, добиваясь небольшой перекраски изучаемых структур. После промывки срезов дистиллированной водой для дифференцировки наносят на них 1°/о-ный раствор трилона В, и предметное стекло снова подогревают до 45-50°С . Дифференцировку нужных структур проводят под контролем микроскопа в течение 1-3-х мин.

В результате такого способа выявления коронарных артерий сердца человека на гистологических препаратах были получены контрастные изображения нужных структур данных артерий на неокрашенном фоне. Использование предлагаемого способа выявления кровеносных сосудов на гистологических препаратах обеспечивает возможность получения высокого качества гистологических препаратов не только единичных, но и серийных при небольших затратах времени и без участия высококвалифицированных лаборантов, а также выявление более тонких тканевых и клеточных структур кровеносных сосудов.

Формула изобретения

Способ выявления кровеносных сосудов на гистологических препаратах путем их протравливания солями трехвалентного железа и окраски, отличающийся тем, что, с целью повышения качества гистологических препаратов, срезы после окраски обрабатывают 1%-ным раствором трилона В при 45-50°С.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

2.Ромейе Б. Микроскопическая техника. М., Изд-во «Иностранная литература, 1953, с. 164-165.