Способ анализа активности спермы Советский патент 1982 года по МПК G01N33/48 A61D7/02 

1

Изобретение относится к биологии, медицине, животноводству и может быть использовано для диагностики бесплодия, повышения эффективности искусственного осеменения и изучения поведения спермиев в изменяющихся условиях.

Известен способ визуального балльного анализа активности спермы под микроскопом, включающий отбор спермы, I разбавление, нанесение капли спермы на подложку и визуальный анализ под микроскопом по десятибалльной системе 1 и

Однако для получения воспроизводимых результатов капля спермы должна быть строго определенного одинакового объема. Сама методика нанесения капли спермы вызывает гибель части спермиев, что вносит дополнительную погрешность. При реализации способа возникают сложности в стабилизации и контролируемом изменении условий нахождения спермиев (температура, давление, рН, среды и т, д.). Балльная оценка

является субъективной и требует привлечения высококвалифицированных операторов. Кроме того, известный способ не дает возможности сделать заключение о распределении спермиев по скоростям.

Цель изобретения - повышение томности анализа активности спермы.

Цель достигается тем, что согласно способу анализа активности спермы,

10 включающему отбор, разбавление спермы и последующую оценку жизнеспособности спермиев, после разбавления сперму подвергают облучению лумом лазера при длине (ВОЛНЫ 633 нм, а оценку

15 жизнеспособности спермиев определяют по величине полуширины спектра.

Облучение спермы лучом лазера проводят при 39,0±0,5С.

Пример. Измерения проводили

20 на сперме быков, замороженной в гранулах при . Оттаивание гранул осуществляли при ЦО°С в подогретом растворе лимоннокислого нат397tрия трехзамещенного .пятиводного. В качестве разбавителя использовали раствор: 100 мл дистиллированной воды, 11,5 г лактозы, 20,0 мл желтка куриных яиц и мл глицерина. Активность спермиев после оттаивания замороженной спермы по визуальной балльной оценке была 5 баллов, что было подтверждено подсчетом процента живых и мертвых спермиев (50 живых, 50 мертвых). На протяжении всего эксперимента поддерживали температуру 39+0,С. Спектр рассеянного спермой света получали на экспериментальной установ(ке методом спектроскопии оптического смешения в гомогенном варианте.Лри работе использовали мощность излучения лазера, не вызывающую изменение активности спермы за время эксперимен та, что было подтверждено визуальной балльной оценкой подвижности спермиев до и после облучения. Активность спермы определяли по полуширине Г усредненного спектра. Значения полуширины спектра Г характеризуют среднюю подвижность спермиев. Большие значения Г соответствуют боль шей активности спермы. Ширина регистрируемого спектра может быть сопоставлена с результатами визуальной оценки Способ анализа активности спермы отличается объективностью, точностью, гибкостью и позволяет получить дополнительную информацию о свойствах спермы. Это обеспечивается следующими npeимуществами предлагаемого способа: в рассеивающем объеме находится 10 спер миев (в способе, принятом за прототип оценку обычно производят по 10 спермиям); в кювете спермии не подвергают СИ воздействию краевых эффектрв, иска жающих истинную активность спермы, изменение полуширины спектра Г обеспечивает количественный анализ активности спермы; из измеренного спектра можно получить распределение спермиев по скоростям, что является важной характеристикой активности спермы способ позволяет производить анализ спермы в различных условиях (температура, рН среды и т. д.), а также стабилизировать эти условия, Предлагаемый способ предполагает возможность полной автоматизации анализа активности спермы и создание простых и надежных приборов, а также позволяет расширить возможности диагностики бесплодия и повысить эффективность искусственного осеменения. Формула изобретения 1.Способ анализа активности спермы, включающий отбор, разбавление спермы и последующую оценку жизнеспособйости спермиев, отличающийс я тем, что, с целью повышения точности анализа, после разбавления сперму подвергают облучению лучом лазера при длине волны 633 нм, а оценку жизнеспособности спермиев определяют по величине полуширины спектра. 2.Способ по п. 1,отличающ и и с я тем, что облучение спермы лучом лазера проводят при ,5С. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1: Иванов И. И. Основные директивы по проведению искусственного осеменения в совхозах. Изд-во Скотовод, 1930. 2. Справочник по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных. 2 Изд. М,, Россельхозиздат, 1977, с. 88-90.