Способ оценки качества спермы Советский патент 1992 года по МПК A61D19/02 

Изобретение относится к искусственному осеменению сельскохозяйственных животных, а именно к объективным способам оценки качества спермы, и может быть широко использовано на племпредприятиях и станциях искусственного осеменения животных.

Цель изобретения - повышение точности и сокращение времени оценки качества спермы.

Способ осуществляют следующим образом.

Предварительно разбавленную спер- му в кювете освещают лучом лазера. Рассе- янный на спермиях лазерный свет.

имеющий доплеровский сдвиг по частоте, регистрируют фотоприемником, выход которого соединен с входом прибора для измерения корреляционных характеристик (коррелятор). В результате накопления и обработки сигнала коррелятор строит корреляционную функцию рассеянного света, которая содержит информацию о скоростях, частотах вращения головки и проценте подвижных клеток. Концентрация спермиев определяется по величине среднеквадратичных флуктуации тока фотоприемника, отвечающим флуктуации количества частиц в зоне наблюдения. Цифровая информация о форме корреляционной функции поступает на ЭВМ, которая производит необходимые

sj СА)

Ю О V

вычисления и выдает результат обсчета в виде цифр, таблиц или графиков.

Пример. Оценку качества проводят на сперме быка Жучок (ина. № 5638), замороженной в гранулах и хранившейся в жидком азоте при -196°С согласно действующей инструкции. Оттаивание гранул осуществляют при 40° С в подогретом 2,9%- ном растворе лимонно-кислого трехзаме- щенного пятиводного натрия. Оттаянную, сперму помещают в термостат при 38 С. Оценку качества спермы проводят сразу же после оттаивания, а затем через каждый час - до полной гибели.

Для оценки предлагаемым способом образец оттаянной спермы разбавляют в 20 раз и в кювете облучают лазерным светом (633 нм). Рассеянный на 16° свет попадает на фотоприемник (ФЭУ). фототек от ФЭУ усиливают и подают на коррелятор, управление которым происходит в автоматическом режиме от микроЭВМ. По завершении операции съема корреляционной функции данные попадают в оперативную память микроЭВМ, готовые для дальнейшей обработки. Вычисление параметров качества спермы проводят по методу наименьших квадратов, достоверность полученных данных оценивают по критерию Фишера. Все подгонки для приведенного опыта имеют достоверность выше 99,9%. Качество спермы оценивают по следующим показателям: подвижность выражают по 10-балльной шкале; концентрация, млн. спермиев в грануле или млн. спермиев в 1 мл оттаянной спермы; скорость прямолинейного движения спермиев (трансляционная), мкм/с; скорость движения спермиев по спирали (спиральная), мкм/с; частота вращения головки спермиев, ГЦ.

Параллельно с оценкой спермы предлагаемым способом проводят сравнительные измерения по известному методу. При этом регистрируют спектр рассеянного лазерного света; данные визуальной оценки подвижности сопоставляют с полушириной полученного спектра, выраженной в герцах.

В качестве базового способа оценки качества спермы используют способы оценки концентрации и подвижности, применяемые в практике искусственного осеменения согласно действующей инструкции. Концентрацию определяют при помощи счетной камеры Горяева после предварительного разбавления в специальных меланжерах, выражают в млн. спермиев в грануле или млн. спермиев в 1 мл оттаянной спермы. Подвижность определяют визуально- в раздавленной капле спермы под микроскопом в проходящем

свете при увеличении в 100-180 раз с использованием нагревательного столика при 40-41°С и выражают в баллах (по 10-балльной шкале).

Результаты сравнительной оценки подвижности оттаянной спермы представлены в табл.1.

Данные табл.1 свидетельствуют о том, что показатели подвижности, определяемые предлагаемым способом, более точно соответствуют данным ГОСТа (базовый способ) в сравнении с известным способом.

Преимуществом предлагаемого способа в сравнении с базовым является более высокая точность измерений, а также объективность метода. Время измерения одного образца спермы предлагаемым способом

составляет 32 с, известным способом 10 мин, а базовым: для определения подвижности - 2,5 мин., концентрации - 10 мин. Кроме того, за эти же 32 с при измерении предлагаемым способом получают дополнительную информацию о качестве спермы, которое не определяется одновременно при оценке известным способом. Эти данные представлены в табл.2.

Приведенные в табл.2 результаты свидетельствуют о преимуществе предлагаемого способа оценки качества спермы в сравнении с известными. Это проявляется в повышенной скорости съема информации: так, предлагаемым способом она составляет 32 с, по известному 10 мин, т.е. скорость измерений повышается в 20 раз. Кроме того, более высокая точность предлагаемого способа, что объясняется значительным снижением зашумленности корреляционной функции рассеянного света в сравнении с его спектром, регистрируемым в соответствии с известным способом, и подтверждается данными табл.1, свидетельствующими об отсутствии линейной

зависимости между данными известного базового способов. При этом, большая полнота получаемой цифровой информации, т.е. в более широкие функциональные возможности оценки качества спермы. Так, помимо подвижности, одновременно получают информацию о концентрации спермы, прямолинейной и спиральной скоростях движения спермиев, частот вращения головки (табл.2), а также распределении спермиев

по скоростям их движения, а это позволяет более строго подойти к суждению о биологической полноценности оцениваемой спермы, что, в конечном счете, повысит эффективность искусственного осеменения.

Формула изобретения

1. Способ оценки качества спермы, включающий ее отбор, разбавление, облучение лучом лазера при длине волны 633 нм, измерение рассеянного света и последующую оценку качества спермы, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и сокращения времени оценки качества спермы, после облучения спермы лучом лазера регистрируют и измеряют флуктуации рассеянного света, определяют корреляционную функцию рассеянного света и по ней определяют скорость движения и число подвижных спермиев, по которым судят о качестве спермы.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что облучение спермы лучом лазера осуществляют при 38,0 ±0,5°С.

Таблица 1

Изобретение относится к искусственному осеменению сельскохозяйственных животных, а именно к объективным способам оценки качества спермы. Целью изобретения является повышение точности и сокращение времени оценки. Рассеянный на спермиях лазерный свет, имеющий допле- ровский сдвиг по частоте, регистрируют фотоприемником, выход которого соединен с входом прибора для измерения корреляционных характеристик. В результате накопления и обработки сигнала коррелятор строит корреляционную функцию рассеянного света, которая содержит информацию о скоростях, частотах вращения головки и проценте подвижных клеток. Концентрация спермиев определяется по величине среднеквадратичных флуктуации тока фотоприемника, соответствующих флуктуации количества частиц в зоне наблюдения. Цифровая информация о форме корреляционной функции поступает на ЭВМ. Результат обсчета выдается в виде цифр, таблиц или графиков. 1 з.п.ф-лы, 2 табл. & 6

Таблица 2