Способ диспергирования биомассы бактерий Советский патент 1982 года по МПК C12N1/00 

Изобретение относится к микро- биологической промышленности, а именно к способам диспергирования биомассьГ, осажденной с помощью катионактивных флокулянтов., Известен способ диспергирования биомассы бактерий путем перемешивания L 1 1. Однако известный способ не обеспечивает достаточной эффективности диспергирования биомассы, что отрицательно сказывается при последующе высеве микроорганизмов. Цель изобретения - повышение эффективности диспергирования биомасс осажденной катионактивными флокулян тами. Указанная цель достигается тем, что по способу диспергирования биомассы бактерий, предусматривающему перемешивание, в биомассу при перемешивании вводят полиакриловую или полиметакриловую кислоту в количестве О, моль на 1 моль флокулянта. Улучшение диспергирования биомассы обусловлено тем, что полиакриловая и полиметакриловая кислоты являются анионактивными полиэлектролитами, образующими полимерные комплексы с катионактивными флокулянтами. Пример 1. Клетки Escherichia coli, осажденные из культуральной жидкости (объем пробы - 20 мл) с помощью полиэтиленимина (ПЭИ), помещают в стакане на магнитную мешалку. При перемешивании в сфлокулированную (5иомассу вводят водный раствор диспергатора - полиакриловой кислоты (ПАК) из расчета на 1 моль введенного флокулянта 0,5 (1, 2, 3, 5, 10) моль диспергатора. Пробу перемешивают 15 мин. Эффективность редиспёргирования оценивают высевами на плотные питательные среды, а также по изменению

оптической плотности надосадочной жидкости спустя 2А ч с момента ввeдe имя полиакриловой кислоты. Измерив оптическую плотность надосадочной жидкости и определив по калибровочному графику.концентрацию микробных . клеток, эффективность диспергирования (Q) рассчитывают по следующей формуле:

О - nc|i

о где п. - концентрация микробных кле ток в надосадочной иидкости после обработки пробы диспергатором, кл/мл;

n - концентрация микробных клеток в контроле, кл/мл;

ср концентрация микробных клеток 8 надосадочной иидкости после осаждения биомассы с помощью флокулянта, кл/мл.

В качестве контроля используют исходную культуральную жидкость.

Результаты по эффективности редиспергирования биомассы, осажденной 10 и 30.мкг/млрд клеток ПЭИ, полиакриловой кислотой, определенные 2-я методами, приведены в табл. 1.

Приведенные экспериментальные дан ные показывают, что в результате перемешивания без использования диспер гатора концентрация микробных клеток в надосадочной жидкости не увеличивается и, следовательно, не происходит распад флокул микроорганизмов. При дополнительной обработке сфлокулированной биомассы с помощью ПАК концентрация клеток в надосадочной жидкости увеличивается до величины исходной концентрации микроорганизмов в культуральной жидкости (что со ответствует 1й. Высевы на 11лотные питательные среды также показывают, что число колониеобразующих единиц (КОЕ) увеличивается при введении диспергатора по сравнению с обычно используемым способом перемешивания. Пример 2. В биомассу бактерий Escherichia coli, сфлокулированную с помощью полиэтиленимина (объем пробы 20 мл), при перемешивании на магнитной мешалке вводят водный раствор диспергатора - полиметакриловой кислоты (ПМАК) из расчета на 1 моль введенного флокулянта 1 (j,10) моль

диспергатора. Прову перемешивают 15 мин. Результаты эффективности дисперги- молярных соотношений флокулинта и дисрования, оцененные по изменению опти-$ пергатора).

Пример 3«В биомассу Escherichia coll, сфлокулированную с помощью полупромышленного катионактивного флокулянта в количестве 20 мкг/млрд клеток (объем пробы . 10 мл), при перемешивании на магнитной мешалке вводят водный раствор

Биологическая концентрация.

975793

ческой плотности надосадочной жидкости спустя ч с момента введения ПМАК, приведены в табл. 2 (для разных

Таблица 2W ПАК из расчета на 1 моль введенного флокулянта 1(5) моль диспергатора. Пробу перемешивают 15 мин.

Результаты эффективности диспергирования, оцененные по высевам на

2 плотные питательные среды, представ1лены в табл. 3.

.

Таблица 3