Средство,обладающее противогипоксической активностью Советский патент 1983 года по МПК A61K31/4412 A61P11/00 

(54) СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ ПРОТИВОГИПОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ Изобретение относится к медицине, а именно патофизиологии сердца. В качестве средства, обладающего противогипоксической активностью, используют естественный жирорастворимый ингибитор перикисного окисления липидовЫ-токо ферол 1. Однако известное средство недостаточно эффективно и частично защищает сердце от гипоксической контрактуры. Известно применение хлоргидрата 2-этил -6-метил-З-оксипиридина в качестве средства, увеличивающего продолжительность жизни 2 . Целью изобретения является расщирение ассортимента средств, обладающих противогипоксической активностью. Поставленная цель достигается применением хлоргидрата 2-этил-6-метил - 3-оксипиридина в качестве средства, обладающего противогипоксической активностью. Препарат хлоргидрат 2-этил-6-метил-3-ок сипиридина представляет собой белое кристаллическое вещество, хорощо растворимое в воде и обладающее щироким спектром биологического действия. Исследование действия хлоргидрата 2-этил-6-метил-3-окси пиридина проводили в экспериментах на крысах, которым invivo вводился препарат в дозе 100 мг/кг массы тела 1 раз в сут внутрибрюшинно в течение трех сут. Затем у животных удаляли сердце и по принятой методике Fallen изучали сократительную функцию, подвергая при этом работающее сердце гипоксии, а затем реоксигенации. Пример 1. 10 крыс-самцов линии Вистар весом 180-200 г получали хлоргидрат 2-этил-6-метил-З-оксипкридин в указанной выще дозе. 12 таких же крыс не получали препарата. Взятие сердца у животных обеих серий проводили под уретановым наркозом. Сердце помещали в холодный раствор Кребса-Хензелайта, а затем перфузировали тем же раствором при 37С. Раствор оксигенировали газовой смесью, содержащей 95% О2 и 5°/о СО. В этих условиях исследовали сократительную функцию сердца в изоволюмических условиях по методике Fallen. При этом правое предсердие удалялось, а в полость левого желудочка помещали латексный балончик с постоянным объемом, сжимая который желудочек осуществлял

изоволюмические сокращения. Сокращения определенной частоты навязывали с помощью электростимулятора ЭСЛ-1, давление в латексном балончике регистрировали с помощью электроманометра аппарата «Mingograf-34. На основе регистрируемых кривых определяли систолическое, диастолическое и развиваемое давления, а также скорости сокращения и расслабления. В процессе опытов навязывали стабильную частоту сокращений - 120 в мин и измеРЯ.ЛИ коронарный поток. После 90 мин работы сердца в условиях нормальной оксигенации, заменяли оксигенированный и сэдержащий глюкозу раствор Кребса-Хензелайта раствором неоксигенированпым и не содержащим глюкозу. Это гипоксическое воздействие продолжалось 20 мин, а затем осуществляли реоксигенацию. В условиях изоволюмического сокращения сердца динамика давления.в полной мере отражает динамику систолического и диастолического напряжения сердечной мыщцы, соответственно, в этом эксперименте кривая нарастающего диастолического давления во время гипоксической пробы была прямым количественным критерием развивающейся гипоксической контрактуры сердца.

Результаты эксперимента представлены в табл. 1. Из таблицы видно, что главное различие между сериями состоит в том, что у животных, не получавщих антиоксидант, в ответ на гипоксию развивается контрактура, а у животных, получавщих антиоксидант, этого Не происходит. Данные свидетельствуют, что диастолическое давление у контрольных животных возрастает и на 20-й мин действия гипоксии достигает 40 мм рт. ст., при этом скорость расслабления падает в 4 раза. Поскольку развиваемое давление в высокой степени определяет величину ударного объема сердца, такое его уменьщение в условиях целого организма означает развитие сердечной недостаточности. В сердцах животных защищенных хлоргидратом 2-э7ил-6-метил-3-оксипиридином диастолическое давление к 20-й мин гипоксии составляло 5-6 мм рт.ст., н, следовательно, контрактура не развивалась.

Таким образом, введение хлоргидрата 2-этил-6-метил-3-оксипиридина полностью предупредило развитие гипоксической контрактуры у контрольных животных.

Данные таблицы свидетельствуют далее, что при реоксигенации выход из гипоксической контактуры и восстановление сокраг тительной функции сердец у животных, не защищенных хлоргидратом 2-этил-6-метил-3-окснпиридина, происходит медленно и к

20-й мин не заверщается: У животных, защищенных препаратом, контрактура отсутствует, а восстановление сократительной функции к 20-й мин заверщается.

Защита хлоргидратом 2-этил-6-метил-3-оксипиридина обеспечила соверщенное восстановление сократительной функции в условиях реоксигенации.

Пример 2. Схема эксперимента была такой же как в примере 1, но предметом исследования была активность фермента креа тинфосфокиназы в коронарном протоке изолированных сердец крыс, защищенных и не защищенных хлоргидратом 2-этил-6-метил-3-оксипиридина. В каждой серии были использованы сердца 12 животных. Активность креатинфосфокиназы определяли на 90-й мин нормального оксигенирования, на 20-й мин гипоксии и на 2-й мин последующей реоксигенации по методу Bergmeyer.

Результаты эксперимента представлены в табл. 2.

Влияние хлоргидрата 2-этил-6-метил-3-оксипиридина, гипоксии и реоксигенации на активность креатинфосфокиназы в перфузате изолированных сердец крыс (М± т)

Из таблицы видно, что после длительного периода нормальной оксигенации выход креатинфосфокиназы в перфузат оказался минимальным и одинаковым для животных обонх серий. В ответ на гипоксию выход креатинфосфокиназы из сердец животных не защищенных антиоксидантом возрос в 3 раза. Сердца животных, получавщих антиоксидант, не реагировали на гипоксию увеличенным выходом фермента.

Активация перикисного окисления липидов составляет необходимое звено в патогенезе гипоксической контрактуры и поэтому хлоргидрат 2-этил-6-метил-3-оксипиридина - ингибитор перекисного окисления липидов предупреждает как гипокснческую контрактуру, так и выход креатинфосфокиназы из подвергщегося действию гипоксии сердца.

Хлоргидрат 2-этил-6-метил-3-оксипиридина не нарущая поведение животных вызывают в сердце такие изменения,, которые делают его устойчивым к развитию гипоксической контрактуры и реоксигенационных нарущений сократительной функции, а также предупреждают повреждения, выражающиеся увеличенным выходом в коронарный проток фермента креатинфосфокиназы.

Применение хлоргидрата 2-этил-6-метил-3-оксипиридина позволит расширить ассортимент средств, обладающих противогипоксической активностью.

3 оксипиридина хлоргидрата на сократительную функцию сердца

Влияние 2-этил-6-метил гипоксии и реоксигенации (Mlm)-Таблица во время

106,8+5,1 71,7±5,2 Систолическое 1-Контроль давление мм {п-11) рт.ст. П-2-этил-6-метил8Ь4±3,8 70,715, -3-оксипиридин 5,811,1 Диастолимеское 1-Контроль давление П-2-этил-6-метил3,ttO,8 мм рт.ст. -З-оксипиридин х.г. 0,05 0,01 1 -Контроль Развиваемое П-2-этил-6-метилдавление-З-оксипиридина мм рт.ст. х.г. Э,05 Скорость 1-Контроль П-2-этил-6-метилсокращениямм рт.ст ./с -3-оксипиридин х.г. Скорость1-Контроль расслабления П-2-этил-6-метилмм рт.ст.с-З-оксипиридин 0,05

1 - контроль (п 5 )

Э,±2,2

П - хлоргидрат 2-этил-6-метил-3 оксипиридина10,,6

(п 7)

. 0,05

Р, -п 9,7+1,7 3,7±1 62 ± 3,5 67 ± , 955412 П78110 375±оО

т а б л и 2

45,5±10

23,8 3,9 0;05 55,5±7.5 65,lt10,3 8 ± 12,7 95,3112 ,5 52 ±3,8 50,2111,11 I09,7:f8,2 &6±Ц,Ц 90,7±6,8 0,,05 0,,,05 11),512,,115,5 30 1 1),525,S13,617 i 2,8 1| i 0,6 5,211,1 7,711,17 ± 1,76,711,5 0,,001 0,,,01 l|1 ± 1,725 ± 1|,8 57 ± 8,270 ± 8,1)80 ± 6,7 1)8 ± 3,31)5 i 3,3 iUZ ± ;,179 ± 2,78ч 1 5,3 0,,001 0,,05 ,05 )38±83 787±15б11001п812311118 961+61811±1)1) 1711±155133713715itiiilll 0,,05 0,,,05 31)0132228±36 331)50581x68690180 1)б7±281)28±17 867167800±50855155 0,0::1 0,025-0,05

Формула изобретения

Применение хлоргидрата 2-этил-6-метил-3-оксипиридина в качестве средства, обладающего противогипоксической активностью

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Коган А. X., Кудрин А. Н., Николаев С. М. Свободнорадикальное окисление

липидоБ в норме и патологии. Материалы симпозиума, М.МОИП, «Наука, 1976, с. 71-74.

2. Эмануэль Н. М. и др. «Эффект увеличения продолжительности жизни в эксперименте при воздействии хлоргидрата 2-этил-6-метил-З-оксипиридина. Доклады АН СССР, 1976, т. 226, № 4, с. 961-963.