Штамм SтRертомусеS аLвоахIаLIS "с", используемый для очистки сточных вод от нефти и нефтепродуктов Советский патент 1983 года по МПК C12N1/20 C02F3/34 C12N1/20 C12R1/465 C02F3/34 C02F101/32 

3 . sgtss

(260 г/л ) пластовых вод Пермской об- Данный штамм характеризуетсяелеласти, депонирован в ИННИ АН СССР, дующими культу рал ьными признаками,

№ ВКМ А-691.которые представлены в табл. 1.

. Т а б л и ц а 1

Морфологические признаки. Споромосцы спиральные, расположены мутовками, споры продолговатые с гладкой оболочкой.

Физиолого-биохимические признаки. Растворимых пигментов и меланоидов не образует, желатину разжижает полностью на 14-е сут-. Молоко не коагулирует и не пептонизирует. Крахмал гидролизует слабо гидролиза 3 мм на 10 сут.). Потребляет глюкозу, ксилозу, арабинозу, фруктозу, сахарозу, рамнозу, не потребляет маннит, инозит, раффинозу., Восстанавливает нитраты. В составе клеточных стенок содержит мезо-диаминопимелиновую кислоту, дифференцирующие- сахара отсутствуют (1 тип клеточной стенки ). Усваивает углеводороды нефти и вазелинового масла.

Предлагаеммый штамм испытывают на минеральной среде при различных концентрациях NaC, а именно 3% NaCI, 5 NaCi; без NaCf, что соответствует 30 г/л, 50 г/л и до 1 г/л минерализации сточных вод.

Исследования проводятся параллельно с 10 NaCI по той же методике. Во есе варианты эксперимента вводятся бактериальная суспензия с плотностью 10 KlieTOK .

Количественное потребление нефти и нефтепродуктов определяется по сухому остатку весовым методом.

Полученные результаты биогенного окисления нефти и вазелинового масла предлагаемым штаммом за 1 сут приведены в табл.. 2.

м

«о

г S с; ю

(О

ООо

г- -яOJТ

voо

мсм

сэ

«S

оо

см о

см

Г-. г

Iff

Г

см

1

см оо

S

м

ОО О

о «м

о

°

«ь

Iо

00

NO

см

о

ь

о

vO

1/Чо

п п

см го

«-о

cr

м

о

СП

00

«Ti

о

vO

смо

оо «п

ем СП

r

-«

PJ

са г«

«м

С4

en

ТЧ(П

п

«k

о

о

о

flb оо

оо ао

оо

оо

Jft со

е

«

м

о сг

| -3о

1 о

см см

м

го

чо

00

о

J00 см

г

см П см

г

чО

г

1Л

«ъ

«

k

«k

ел со

ff

гл Tf

Г.чО

г-«оо

ол

r

v е

смсм м CM 1

смсм

г

М«t.

Данные табл. 2 показывают, что в контрольных вариантах опыта количест во нефти и вазелинового масла остает ся без изменения. В опытных вариантах по сравнению с контрольными количест венное содержание нефти и вазелинового масла уменьшается. Предлагаемый штамм способен окислять нефть и Вазелиновое масло на высокоминерализованных средах (от 30 до 100 г/л ) в количествах 0,32 0,0б7 мл и 0,33 - 0,068 мл за 1 сут соответственно. На средах с низкой минерализацией (до 1 г/л,среда без соли) количество окисленной штаммом, нефти составляет О, мл, вазелиново го масла 0,46 мл. Активность штамма иллюстрируют сл дующие примеры. Пример. Стерильную минерал ную среду Норенковой следующего состава: (NH4)2HP04, г1 ,г0,2 К2НР04, г0,25 КН2Р04, г

Стерильная среда

стерильная.

нефть5,9228 3,7277

Стерильная среда

+ стерильная

нефть + бактери-альная культура 5,9228 3,7256

Как видно из табл.3, в контрольном варианте нефть остается без изменений.

Под действием бактериальной культуры нефть становится более вязкой, исчезает ее характерный запах. Высота слоя нефти уменьшается в два раза, что составляет 50 (по сухому веществу) .

П р и м е р 2. Стерильную среду

3,7267

50,54

1,8428

Норенковой 10 NaCl заражают культурой стерптомицета и вносят стерильное вазелиновое масло в количестве 8 мл (7,1927 г ) на 50 мл среды. Параллельно ставится контроль (без цНокулята ). Термостатирование проводится при . После двухмесячного испытания под слоем вазелинового масла образовывается бактериальная пленка. Результаты испытаний даны в табл.А Соль Мора, г CaCla .fNH4)2Mo04 Вода водопроводная, л1 РН 7-7,2 заражают суспензией стрептомицета и вносят стерильную нефть в количестве 8 мл (5,9228 г) на 50 мл среды. Для получения сравнительных данных проводят контрольный вариант (без инокуляции культурой стрепт,омицета). Для испытания активности штамма сосуды контрольного и опытного вариантов помещают в термостат при 33°С. По истечении двух месяцев в сосудах, зараженных культурой стрептомицета, наблюдается нарастаниебактериальной массы (в виде пленки ) под слоем нефти. На дне емкости образовывается хлопьевидный осадок (старые клетки ). Результаты испытаний представлены в табл.3. Таблица 3

7,1927

0,9312

0,9280

7,1927

. Как видно из табл. высота слоя вазелинового масла под действием бактерий (бпытный вариант) уменьшилась в два раза.30

В контроле высота слоя вазелиноврго масла остается без изменения. Штамм Streptomyces alboaxialis С по сравнению с известными позволяет добиться

10 Таблица Ц

99Й557

О.Э315

0,

51,02

разрушения сырой нефти (по сухому веществу) на 50 и нефтепродуктов (по сухому веществу) на 50 в высокоминерализованных нефтесодержащих сточных водах за 60 дней.

Сравнительные данные известного и предлагаемого штаммов представлены в табл.5.

I I«

t. II

- &S

- (4e

eo

«

64S

«я

000

о

«

CMо

-4- «M CM VO

-a- « «M О

о о о о

а I I I

o-vo чо о

vO хО NO в

III

О .

ео вово

о очр

« «QЙО

Л

еэ

.- .-S S

« § :

1

1

гг и -

о о о

tn 1А ич Данные.табл. 5 показывают, что плотность бактериальных клеток, необходимая для окисления нефти и неф тепродуктов известного штамма , составляет 10, что в 1000 раз превышае .плотность предлагаемого (10 X Удель ная активность предлагаемого штамма значительно выше по сравнению с известным,, тай как окисление нефти нефтепродуктов происходит при меньшей плотности клеток предлагаемого штамма и большей концентрации нефти и нефтепродуктов в среде. В , предназначенной для кул тивирования известного штамма, приходится 0,2 мл нефти на 200 мл среды, что соответствует разбавлению 1:1000. 8 среде, использ уемой для культивирования предлагаемого штамма, 8 Mji нефти содержится в 50 мл среды, что соответствует разбавлени 1:6, т.е. содержание нефти.в последней среде в 150 раз превышает.со

Полученные результаты убыли нефти предлагаемым штаммом на средах с различной минерализацией показывают, что данный штамм способен окислять нефть и нефтепродукты на еысокоминерализованных средах(30-100 г/л), в количествах 0,32-0,067 мл/сут и 0,33-0,068 мл/сут.

На основании приведенных сравнительных данных окисления нефти и нефтепродуктов известным и предла- гаемым штаммами следует, что предлагаемый штамм способен окислять нефть в количестве 0,4 мл/сут, а , известный - 0,172 мл/сут, что является в 2,5 раза ниже; при меньшей плотности клеток (10), известный штамм (10)и большей концентрации нефти

( ), известный штамм - 0,2 мл нефти; предлагаемый штамм способен окислять нефть и нефтепродукты на средах с высокой минерализацией (30-100 Г/л) а известные штаммы с минерализацией до 1 г/л, т.е. они не способы разлагать нефть и нефтепродукты в высокомиИерализованных сточных водах.

Способность известного штамма окис лять до 86,1 нефти в сутки объясняется благоприятными условиями жизнедеятельности штамма, которые не соответствуют натурным условиям (это аэрация, низкий процент содержания нефти -0,1, что составляет к объему среды 0,2 мл, исходная плотность клеток штамма в 100.0 раз больше, минедержание ее в первой. При вышеперечисленных условиях известным,штаммом за 1 сут окисляется 0,172 мл нефти, что составляет В6% от исходного объема нефти (0,2 мл ). Предлагаемым штаммом при большей концентрации нефти в среде(8 мл )и меньшей плотности клеток .штамма (10 )окис ляется 0, мл нефти, чтосоставляет 5,5% от исходного объема нефти (8 мл). Низкий процент окисления (5,5)предлагаемого штамма по сравнению с процентным отношением окисления нефти известного штамма 86%) объясняется большей концентрацией нефти в среде (8 мл ), предназначенной для культивирования предлагаемого штамма, и меньшим объемом среды(50 мл ). В табл. 6 представлена сравнительная характеристика окисления нефти за 1 сут на среде с различной минерализацией.. Таблицаб

1599 5576

ральная среда без солевой концент- ИНМИ АН СССР, I ВКМ А-б91), испольрации).зуемый для очистки сточных вод от

Кроме того, предлагаемый штамм нефти и нефтепродуктов, обладает большей удельной активностьюИсточники информации,

по сравнению с известным штаммом. 5 принятые во внимание при экспертизе Формула изобретения1. Авторское свидетельство СССР

Штамм Streptomyces albcaxiatis С 2. Авторское свидетельство СССР (коллекция отдела типовых культур (f 785357, кл. С 12 N 15/00, 1978.

f , кл. С 12 N 1/20, 1968.