СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ ФОТОТЕРАПИИ Российский патент 1994 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, и может быть использовано для оценки эффективности лечения низкоинтенсивным светом видимого диапазона. Способ применим при различных заболеваниях (заболеваниях суставов воспалительного и дегенеративного характера, кардиопатиях, язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки, и разных способах облучения (наружном, через эндоскоп, внутрисердечном).

Выраженная зависимость между физиологическим состоянием живых организмов и направленностью биологического действия лазеров демонстрируется многими клиническими и экспериментальными наблюдениями. Известно, что с помощью низкоинтенсивного лазерного излучения можно получить как стимуляцию, так и угнетение активности ферментов, пролиферации клеток, интенсивности перекисного окисления липидов и резистентности эритроцитов. В связи с этим становится актуальным вопрос о разработке методов прогнозирования индивидуальной реакции пациента на облучение.

До сих пор не существует универсального способа индивидуального тестирования эффективности фотовоздействия для разовых доз и определения оптимального времени между процедурами при проведении курсового лечения. Быстрое распространение фототерапии низкоинтенсивным светом видимого диапазона обосновывает актуальность данной работы. Прямых аналогов нашей работе, позволяющей предсказать эффективность воздействия до его начала, не нашли. Известны работы, в которых приводятся оценочные критерии эффективности лечения в процессе фототерапии. Для этого определяют содержание уроканиновой кислоты в смывах с поверхности кожи или определяют иммунологические показатели после курса облучений больного. Методы довольно трудоемки и требуют специального лабораторного оснащения. Прототип изобретения не выявлен.

Целью предлагаемого способа является повышение эффективности фототерапии при лечении различных заболеваний и разных способах облучения путем динамического управления режимом фотовоздействия с учетом индивидуальных особенностей реактивности больного. Поставленная цель достигается тем, что в данном способе лабораторной оценки эффективности фототерапии перед сеансом фототерапии у больного берут кровь, делят ее на две серии, одну из которых облучают дозой 10²-10⁴Дж/м², после чего пробы инкубируют в течение часа в темноте, центрифугируют, плазму разбавляют физиологическим раствором до объемного соотношения 1:40, фотометрируют на длинах волн 370 и 410 нм, вычисляют коэффициент эффективности биологического действия (К_э), и при К_э= 1 делают вывод об отсутствии реакции крови на облучение и возможности прекращения фототерапии, при К_э<1 продолжают лечение, при К_э>1 ожидают обострения процесса. Диапазон биологически активных доз для облучения крови ин витро подобран экспериментально. Разведение плазмы физиологическим раствором производится для снижения ее оптической плотности, что необходимо для фотометрии. Диапазон допустимых объемных соотношений плазмы и физиологического раствора (1:20)-(1:70), однако оптимальным соотношением считают 1:40, поскольку оно обеспечивает достаточную прозрачность пробы и дает возможность выявлять очень небольшие изменения свободного гемоглобина в сравниваемых образцах.

Способ базируется на представлении, что локальное облучение больного вызывает общую реакцию организма, о величине и направленности которой можно достоверно судить по реакции его крови. С другой стороны, информацию об уровне реактивности больного к фотовоздействию можно получить по результату облучения его крови ин витро в диапазоне подобранных доз.

В качестве критерия эффективности воздействия низкоинтенсивного света видимого диапазона предлагают изменение содержания свободного гемоглобина в плазме крови, отражающее изменение структурно-функциональных свойств клеточных мембран, на примере мембран эритроцитов, используемых как тестовый объект. Выявлена корреляция положительного клинического эффекта при лечении низкоинтенсивным красным светом со снижением этого показателя, а также возможность прогнозирования реакции интенсивности эритродиереза на облучение пациента по реакции его крови на облучение ин витро.

Резистентность эритроцитов признана чутким показателем реактивности организма при самых различных заболеваниях и экстремальных воздействиях. Сопоставление скорости гемолиза и интенсивности перекисного окисления липидов (ПОЛ) в мембранах эритроцитов при ультрафиолетовом облучении показало наличие параллелизма между этими процессами. Известно, что железосодержащие продукты распада эритроцитов являются мощными индукторами ПОЛ.

Способ осуществляют следующим образом.

За 1,5-2 ч до сеанса фототерапии у обследуемого из локтевой вены получают 9 мл крови, стабилизированной гепарином. Половину полученной крови подвергают облучению низкоинтенсивным видимым излучением, применение которого предполагается, например, излучением гелий-неонового лазера в дозе 10²-10⁴ Дж/м², другую половину полученной крови инкубируют в аналогичных условиях без облучения. Выдерживают облученные и необлученные образцы крови в течение 1 ч при комнатной температуре в темноте. Центрифугируют их при 1500 об/мин на клинической центрифуге ОПН-3 или аналогичной в течение 15 мин, отделяют плазму крови, разводят ее физиологическим раствором в соотношении 1: 40 и фотометрируют при 370 и 410 нм. Определяют разность оптических плотностей при 410 и 370 нм для каждого облученного и необлученного образца крови. Рассчитывают коэффициент эффективности действия тестируемого излучения (К_э) по формуле
K_Э= , где (Д₄₁₀-Д₃₇₀)_о - разность оптических плотностей плазмы облученных образцов крови при 410 и 370 нм, а (Д₄₁₀-Д₃₇₀)_к - аналогичная разность для плазмы необлученных образцов. Для более точного определения К_э рекомендуется делить облучаемую и контрольную порции крови на 4-8 частей и использовать средние значения разностей (Д₄₁₀-Д₃₇₀) для облученной и необлученной крови. При значениях К_э<1 прогнозируют высокую эффективность фототерапии, при К_э>1 - ее неэффективность. Контроль эффективности фототерапии проводят с помощью определения разности оптических плотностей разведенной в соотношении 1:40 физиологическим раствором плазмы крови больного при 410 и 370 нм - снижение этого показателя в ходе лечения указывает на эффективность терапии, увеличение или стабилизация - на неэффективность.

П р и м е р 1. Больная Ф., 59 лет. История болезни N 2146. Диагноз: первичный деформирующий полиостеоартроз, узелковая форма медленно прогрессирующего течения с вторичными синовитами. Комплекс терапии включал нестероидные противовоспалительные средства в низких дозах без включения хондропротекторов. Физиотерапевтическое лечение - в виде облучения поверхности суставов некогерентным излучением гелий-неонового лазера.

За 1,5 ч до облучения согласно описанному определен К_э для излучения гелий-неонового лазера, оказавшийся больше.

Прогнозирована высокая эффективность фототерапии. Контроль разности оптических плотностей плазмы крови больной при 410 им 370 нм в ходе терапии выявил стабилизацию этого показателя после 10-го сеанса фототерапии. Повторное определение К_э показало, что К_э=1. Вывод: дальнейшая фототерапия неэффективна. Состояние больной улучшилось: уменьшились боли в суставах, исчезли синовины. Больная выписана в удовлетворительном состоянии.

П р и м е р 2. Больная С., 21 год. История болезни N 2734. Диагноз: ревматоидный полиартрит серонегативный медленно прогрессирующего течения, активность II ст., III ст., НФ 1. Жалобы на боли в суставах верхних и нижних конечностей, скованность по утрам, тугоподвижность суставов. Множественные деформации мелких суставов кистей рук. Лечение НИКС проводили на фоне нестероидных противовоспалительных средств, базовой терапии хинолиновыми средствами. Предварительное облучение крови больной ин витро показало величину К_з<1. Прогнозирована неэффективность фототерапии низкоинтенсивным видимым излучением. При использовании для лечения излучения гелий-неонового лазера отмечена плохая переносимость процедуры: головная боль, артериальная гипертензия. Усилились экссудативные изменения в лучезапястных суставах, увеличился суставной индекс. Фототерапия НИКС была отменена. После завершения курса лекарственной терапии больная была выписана с незначительным положительным эффектом.

Предлагаемый способ достаточно прост, выполним в любой клинической лаборатории, имеющей центрифуги и спектрофотометр. Точность прогнозирования эффективности фототерапии данным способом 80%.

Способ относится к области медицины, а именно к терапии, и может быть использован для оценки эффективности лечения низкоинтенсивным светом видимого диапазона. Способ позволяет осуществлять динамическое управление режимом фотовоздействия в зависимости от индивидуальных особенностей реактивности больного при разных заболеваниях и видах облучения пациентов. Для этого перед сеансом фототерапии у больного берут кровь, делят ее на две серии, одну из которых облучают дозой 10² - 10⁴ Дж/м² , после чего пробы инкубируют в течение часа в темноте, центрифугируют, плазму отделяют от клеточных элементов, разбавляют физиологическим раствором до объемного соотношения 1 : 40, фотометрируют на длинах волн 370 и 410 нм, вычисляют величину K_э , при K_э= 1 делают вывод об отсутствии реакции крови на облучение и возможности прекращения фототерапии, при K_э< 1 продолжают лечение с ожидаемым положительным эффектом, при K_э> 1 ожидают обострения процесса после облучения больного.

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ ФОТОТЕРАПИИ путем исследования крови, отличающийся тем, что до лечения берут две порции крови, одну из них облучают дозой 10² - 10⁴ Дж/м², затем пробы инкубируют в течение 1 ч, отделяют плазму, определяют содержание свободного гемоглобина, рассчитывают диагностический коэффициент по формуле
K_э = h_o^-/h_к^-,
где K_э - диагностический коэффициент;
h_o^- - свободный гемоглобин в облученной пробе;
h_к^- - свободный гемоглобин в контрольной пробе,
и при значениях K_э = 1 диагностируют отсутствие реакции на фототерапию, при K_э < 1 - положительный эффект и K_э > 1 - отрицательный эффект фототерапии.