ПРОТИВОГИСТАМИННОЕ И АНТИАЛЛЕРГИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО И СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ГЛУТАМИНАТА ХИНУКЛИДИЛ-3-ДИФЕНИЛКАРБИНОЛА В ВИДЕ РАСТВОРА ДЛЯ ИНЪЕКЦИЙ Российский патент 1995 года по МПК A61K31/435 

Изобретение относится к медицине и касается нового противогистаминного и антиаллергического средства, содержащего соль хинуклидил-3-дифенилкарбинола, и способа приготовления его инъекционного раствора.

В литературе из солей хинуклидил-3-дифенилкарбинола описан только его гидрохлорид, известный в качестве антиаллергического препарата под названием фенкарол. В отечественной аллергологической практике используют препараты диазалин в виде драже (по 0,1 г) и димедрол в виде таблеток по 0,05 г (50 мг) и ампульных растворов (1% по 1 мл в ампуле). В ходе клинического изучения оригинального отечественного противогистаминного антиаллергического препарата фенкарол (гидрохлорид хинуклидил-3-дифенилкарбинола) в виде таблеток по 0,025 г (25 мг) выявлены его преимущества по лечебной эффективности и переносимости по сравнению с димедролом, диазалином и ограниченно поступающими по импорту пипольфеном, супрастином, тавегилом. На этом основании было рекомендовано широкое медицинское применение фенкарола (номер по Государственному реестру лекарственных препаратов 76/788/2), вместе с тем было указано на необходимость разработки инъекционной формы эффективного отечественного препарата фенкарол для применения при острых и тяжелых аллергических реакциях и в случаях, когда невозможно его применение в виде таблеток. Однако физико-химические свойства гидрохлорида (хинуклидил-3)дифенилкарбинола, т. е. фенкарола, (в первую очередь низкая растворимость в воде и в фармацевтических растворителях) не позволили получить инъекционный раствор с необходимыми свойствами.

Цель изобретения новый противогистаминный и антиаллергический препарат ряда хинуклидил-3-дифенилкарбинола, обладающий улучшенными свойствами, и способ приготовления раствора его для инъекций.

В результате химических, фармакологических, и фармацевтических исследований большой группы новых синтезированных солей ряда хинуклидил-3-дифенилкарбинола отобран глутаминат хинуклидил-3-дифенилкарбинола.

Таким образом, поставленная цель достигается новым химическим соединением, представляющим собой глутаминат хинуклидил-3-дифенилкарбинола формулы I

Глутаминат хинуклидил-3-дифенилкарбинола (госрегистрационный N 8155187) соединение новое, в литературе не описано. Соединение термически неустойчиво, но его водный раствор (по растворимости в воде он в 20 раз превосходит соответствующий гидрохлорид) представляет собой бесцветную прозрачную жидкость, устойчивую на свету и при нагревании (выдерживает стерилизацию, 120^оС), замерзает при пониженной температуре, но при комнатной вновь образует прозрачный раствор. По данным ТСХ не содержит примесей, содержание хинуклидил-3-дифенилкарбинола в 1 мл раствора составляет 0,0095 0,0105 г, содержание глутаминовой кислоты в 1 мл раствора 0,00595 0,00657 г.

Способ приготовления глутамината хинуклидил-3-дифенилкарбинола в виде раствора для инъекций заключается в том, то хинуклидил-3-дифенилкарбинол смешивают с глутаминовой кислотой и водой для инъекций в массовом соотношении 1: (1,25-1,3): 0,25 при температуре 40 50^оС, к полученному раствору образовавшейся соли глутамината хинуклидил-3-дифеникарбинола добавляют 0,75 мас. ч. воды для инъекций. Полученный раствор фильтруют, разливают в ампулы и подвергают стерилизации.

Исходные продукты глутаминовая кислота и хинукоидил-3-дифенилкарбинол являются доступными веществами.

Глутаминовая кислота выпускается промышленностью и разрешена к применению в качестве лекарственного средства. Хинуклидил-3-дифенилкарбинол тоже является отечественным сырьем и получают его обработкой фаpмакопейного фенкарола (гидрохлорида хинуклидил-3-дифенилкарбинола) водным раствором аммиака с последующим выделением его (экстракция органическим раствоpителем, упаривание экстракта) и очисткой путем перекристаллизации (см. пример 7).

Исходные компоненты и температурный режим приготовления заявляемого лекарственного средства являются необходимыми и достаточными условиями для получения глутамината хинуклидил-3-дифенилкарбинола, обладающего улучшенными, чем соответствующий гидрохлорид, свойствами.

При не соблюдении указанных условий наблюдается следующее:
в случае уменьшения заявленного количества глутаминовой кислоты (< 1,25) раствор не образуется (пример 6) и таким образом препарат получить нельзя;
увеличение количества глутаминовой кислоты (> 1,3 мас. ч) недопустимо, так как кислота глутаминовая (2-аминоглутаровая кислота) является самостоятельным высокоактивным лекарственным препаратом, который находит применение при лечении заболеваний центральной нервной системы (эпилепсии, психозов, реактивных состояний, других психических и нервных заболеваниях). При применении глутаминовой кислоты отмечен ряд побочных эффектов, в том числе явления диспепсии, возбуждение.

Также существенным условием заявляемого способа является порядок смешения исходных компонентов с водой, а именно, после смешения исходных компонентов воду необходимо вводить частями: сначала в количестве 0,25 мас. ч. а после получения раствора остальную часть (0,75 мас. ч.).

Несоблюдение этого условия, например увеличение количества 1-й порции воды, приводит к значительному замедлению процесс образования раствора (до 60 мин).

Приготовление заявленного средства при температуре ниже 40^оС и выше 50^оС приводит к тому, что в первом случае раствор не образуется (исходные компоненты находятся во взвешенном состоянии), а во втором случае нецелесообразно увеличение температуры, так как исходные компоненты полностью вступают в реакцию уже при температуре 40 50^оС с образованием нового соединения (водорастворимой соли) глутамината хинуклидил-3-дифенилкарбинола.

Получение указанного нового соединения в заявляемых условиях неочевидно.

Известно, что глутаминовая кислота мало растворима в холодной воде и растворима в горячей воде (80 90^оС). Кроме того, также известно, что основание хинуклидил-3-дифенилкарбинол в воде практически нерастворимо. В связи с этим возможность образования нового соединения соли глутаминовой кислоты при более низкой температуре (40 50^оС), чем температура растворения самой глутаминовой кислоты (80 90^оС), оказалась неожиданной.

Следующие примеры иллюстрируют заявляемый способ приготовления глутамината хинуклидил-3-дифенилкарбинола в виде раствора для инъекций и получение исходного основания хинуклидил-3-дифенилкарбинола.

П р и м е р 1. Хинуклидил-3-дифенил- карбинол (фармако- пейный) 1,0 г (1 мас. ч.) Кислота глутаминовая 0,626 г (1,25
мас. ч.) Вода для инъекций 25 мл I порция
(0,25 мас. ч.)
75 мл II порция
(0,75 мас. ч.)
Методика приготовления заявляемого средства.

Хинуклидил-3-дифенилкарбинола 1,0 г и кислоты глутаминовой 0,626 г растворяют в 25 мл воды для инъекций при температуре 40 50^оС в течение 20 мин при постоянном перемешивании. Полученный раствор доводят водой для инъекций до 100 мл, снова перемешивают, после чего раствор фильтруют, разливают в подготовленные чистые ампулы, запаивают и стерилизуют (120^оС 8 мин).

Получают глутаминат хинуклидил-3-дифенилкарбинола в виде раствора для инъекций. Это бесцветная прозрачная стерильная жидкость, содержащая хинуклидил-3-дифенилкарбинола 0,0098 г/мл, кислоту глутаминовую 0,00625 г/мл.

П р и м е р 2. Хинуклидил-3-дифенил- карбинол(фармако- пейный) 1,0 г (1 мас. ч.) Кислота глутаминовая 0,65 (1,3 мас. ч.) Вода для инъекций I порция 25 мл
(0,25 мас. ч.)
II порция 75 мл
(0,75 мас. ч.)
Приготовление раствора осуществляют методом, аналогичным примеру 1.

Получают глутаминат хинуклидил-3-дифенилкарбинола в виде раствора для инъекций, представляющего собой бесцветную прозрачную стерильную жидкость, содержащую хинуклидил-3-дифенилкарбинола 0,0099 г/мл, кислоту глутаминовую 0,00649 г/мл.

П р и м е р 3. Хинуклидил-3-дифенил- карбинол(фармако- пейный) 1,0 г (1 мас. ч.) Кислота глутаминовая 0,751 г (1,5
мас. ч.) Вода для инъекций I порция 25 мл
(0,25 мас. ч.)
II порция 75 мл
(0,75 мас. ч.)
Приготовление раствора осуществляют методом, аналогичным примеру 1. Время образования раствора 20 мин.

Полученный раствор глутамината хинуклидил-3-дифенилкарбинола представляет собой бесцветную прозрачную стерильную жидкость. Содержание хинуклидил-3-дифенилкарбинола 0,0099 г/мл, кислоты глутаминовой 0,0075 г/мл. Раствор обладает раздражающим действием.

П р и м е р 4 (на использование уменьшенного количества воды). Хинуклидил-3-дифенил- карбинол(фармако- пейный) 1,0 г (1 мас. ч.) Кислота глутаминовая 0,626 г (1,25
мас. ч.) Вода для инъекций I порция 20 мл
(0,2 мас. ч.)
II порция 80 мл
(0,8 мас.ч.)
1,0 г Хинуклидил-3-дифенилкарбинола и 0,626 г кислоты глутаминовой растворяют при перемешивании в 20 мл воды для инъекций, нагретой до температуры 40 50^оС. Образование гомогенного раствора не наблюдается, так как жидкой фазы 20 мл (воды для инъекций) недостаточно для получения раствора.

П р и м е р 5 (на использование увеличенного количества воды). Хинуклидил-3-дифенил- карбинол(фармако- пейный) 1,0 г (1 мас. ч.) Кислота глутаминовая 0,626 г (1,25
мас. ч.) Вода для инъекций I порция 50 мл
(0,5 мас. ч.)
II порция 50 мл
(0,5 мас. ч.)
Приготовление раствора осуществляют методом, аналогичным примеру 1, с тем отличием, что I порцию воды для инъекций при получении раствора берут 50 мл, подогревают до 40 50^оС и перемешивают. При этом время образования раствора увеличивается до 50 60 мин. После полного растворения ингредиентов доводят раствор водой для инъекций до 100 мл (II порция 50 мл) и снова перемешивают. Затем раствор фильтруют и разливают в подготовленные ампулы, запаивают и стерилизуют при температуре 120^оС 8 мин.

Получают глутаминат хинуклидил-3-дифенилкарбинола в виде раствора для инъекций, представляющего собой бесцветную прозрачную стерильную жидкость. Содержание хинуклидил-3-дифенилкарбинола 0,001 г/мл, кислоты глутаминовой 0,006098 г/мл.

П р и м е р 6. Хинуклидил-3-дифенил- карбинол(фармако- пейный) 1,0 г (1 мас. ч.) Кислота глутаминовая 0,6 г (1,2 мас. ч.) Вода для инъекций I порция 25 мл
(0,25 мас. ч.)
II порция 72 мл
(0,75 мас.ч.)
Приготовление раствора осуществляют методом, аналогичным примеру 1.

При этом соотношении образования прозрачного раствора не наблюдается, так как часть исходного хинуклидил-3-дифенилкарбинола не вступает в реакцию по данным количественного определения и находится во взвешенном состоянии.

П р и м е р 7. Получение исходного основания хинуклидил-3-дифенилкарбинола.

Смешивают 40 г 99,1% (или 39,6 г 100% ) фармакопейного фенкарола (гидрохлорида хинуклидил-3-дифенилкарбинола), 100 мл воды, 200 мл 25%-ного водного аммиака.

Смесь экстрагируют хлороформом (10 х 300 мл). Хлороформный экстракт упаривают досуха
Получают 34 г хинуклидил-3-дифенилкарбинола, к которому добавляют 850 мл абсолютного этилового спирта, 1,7 г активированного угля, кипятят 1 ч, отфильтровывают уголь, раствор охлаждают сначала до комнатной температуры, затем до 0 ± 4^оС и выдерживают при этой температуре 30 ч. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают, отжимают и сушат до постоянной массы.

Получают 24,5 г хинуклидил-3-дифенилкарбинола в виде бесцветных кристаллов с температурой плавления 233 235^оС (в интервале 1,5^оС). Содержание основного вещества 99,5% Выход 69% считая на исходный фенкарол.

Биологическая активность заявляемого средства изучена в сравнении с фенкаролом и димедролом. Исследование проведено по тестам, характеризующим противогистаминное, антисеротониновое, холинолитическое действие, определена токсичность (ЛД₅₀) при однократном введении разным видам животных при различных путях введения.

Исследованию подвергались водные растворы заявляемого препарата в различных концентрациях.

1. Антиаллергическая активность заявляемого соединения.

1.1. Опыты на изолированных органах.

Противогистаминную, антисеротониновую и холиноблокирующую активность заявляемого соединения изучали в опытах на изолированном отрезке подвздошной кишки морской свинки. Сокращения, вызванные: гистамином 1 ˙ 10^-8 г/мл; ацетилхолином 1 ˙ 10^-8 1 ˙ 10^-7 г/мл; серотонином 1 ˙ 10^-7 г/мл, регистрировали в изометрическом режиме.

Заявляемое соединение, фенкарол и димедрол вводили в раствор в концентрациях (от 1 ˙ 10^-9 до 1 ˙ 10^-5 г/мл) за 3 мин до введения агониста (гистамина, ацетилхолина или серотонина).

О противогистаминной, холинолитической и антисеротониновой активности препаратов судили по их способности уменьшать спазм кишки. Эффективную концентрацию исследуемого препарата, уменьшающую спазм кишки на 50% (ЭК₅₀) рассчитывали методом Литчфилда-Уилкоксона на основании 4 6 экспериментов.

Результаты исследования представлены в табл. 1.

1.2. Опыты на наркотизированных животных.

Влияние заявляемого соединения в сравнении с фенкаролом и димедролом на бронхоконстрикторное действие гистамина (10 мкг/кг), серотонина (5 мкг/кг) и ацетилхолина (10 мкг/кг), введенных внутривенно, изучали модифицированным методом Концетта-Росслера на 19 наркотизированных морских свинках массой 300 400 г.

Об активности препаратов судили по их способности предотвращать развитие бронхоспазма; затем рассчитывали величину ЭД₅₀ и стандартную ошибку средней арифметической по методу Литчфилда-Уилкоксона на основании 4 6 опытов.

Результаты представлены в табл. 2.

1.3. Опыты на ненаркотизированных животных.

На 96 морских свинках массой 300 350 г изучали противогистаминную активность заявляемого соединения в сравнении с фенкаролом и димедролом при внутримышечном введении. Животных помещали в специальную камеру, в которой осуществляли ингаляцию аэрозоля 1%-ного раствора гистамина в течение 300 с.

О противогистаминной активности судили по способности препаратов защищать животных от действия гистамина, т.е. увеличивать латентный период гистаминной интоксикации (от начала ингаляции гистамина до появления клонико-тонических судорог, с) и предотвращать гибель животных, вызванную гистамином. Заявляемое соединение, фенкарол и димедрол вводили внутримышечно за 30 мин до начала ингаляции гистамина.

Результаты исследования даны в табл. 3.

2. Антиэкссудативная активность.

В опытах на 370 белых крысах обоего пола массой 140 160 г определяли влияние заявляемого соединения в сравнении с фенкаролом и димедролом на нарушение проницаемости сосудов и развитие отека, вызванные субплантарным введением;
1 мкг серотонина креатининсульфата в 0,1 мл 0,9%-ного раствора NaCl;
5 мкг соединения 48/80 (либератора гистамина) в 0,1 мл 0,9%-ного раствора NaCl;
0,1 мл 6%-ного раствора декстрана;
1%-ного раствора каррагенина в 0,1 мл 0,9%-ного раствора NaCl.

Заявляемое соединение и препараты сравнения вводили внутрь и внутримышечно за 1 ч до опыта. Отек измеряли плетизмометрически через 30 мин после введения декстрана, серотонина или соединения 48/80 и через 3 ч после введения каррагенина.

О антиэкссудативной активности судили по расчетной величине (ЭД₅₀).

Результаты исследования даны в табл. 4.

3. Токсичность (ЛД₅₀) заявляемого соединения при однократном введении.

Заявляемое соединение, фенкарол и димедрол вводили мышам внутрь в дозах 150 140 мг/кг в виде 1%-ного и 2%-ного водного раствора с интервалом между дозами 50 мг/кг; внутривенно в дозах от 15 до 75 мг/кг (в концентрациях 0,1 0,5%) с интервалом между дозами 5 мг/кг. Всего использовали 160 мышей.

Крысам заявляемое соединение вводили внутривенно в дозах 30; 40; 50; 60; 70 мг/кг (концентрация растворов 1 1,5%); внутримышечно (в мышцу бедра) в дозах 100 200 мг/кг с интервалом между дозами 25 мг/кг (концентрация растворов 2%).

Внутрь крысам заявляемое соединение вводили в виде 1 2%-ного раствора в дозах 200 400 мг/кг (с интервалом между дозами 50 мг/кг), а фенкарол в тех же дозах и концентрациях в виде гомогенной взвеси в воде с добавлением в качестве эмульгатора твина-80.

Всего было использовано 120 крыс.

Учитывали гибель животных в течение 5 сут. Величину ЛД₅₀ рассчитывали по методу Литчфилда-Уилкоксона.

Результаты исследования представлены в табл. 5.

Полученные в этих опытах результаты свидетельствуют о том, что заявляемое соединение практически не отличается от фенкарола и димедрола по противогистаминной, холиноблокирующей и антисеротониновой активности (имеющиеся различия в величине ЭК₅₀ статически не значимы).

Из табл. 2 видно, что по противогистаминной и антисеротониновой активности заявляемое соединение превосходит димедрол, а по влиянию на бронхоконстрикторное действие уступает ему.

В сравнении с фенкаролом заявляемое соединение по противогистаминной и антисеротониновой активности превосходит фенкарол, а по влиянию на бронхоконстрикторное действие ацетилхолина сопоставимо с ним.

Эти данные свидетельствуют о большей, чем у димедрола избирательности действия (противогистаминного и антисеротонинового) заявляемого соединения и, как следствие этого, о возможности его применения у аллергических больных с сопутствующими заболеваниями, при которых противопоказано назначение холиноблокаторов.

Как видно из табл. 3, на противогистаминной активности заявляемое средство в 1% концентрациях сопоставимо с фенкаролом, а в остальных концентрациях превосходит фенкарол и димедрол.

Из данных табл. 4 видно, что заявляемое соединение при обоих путях введения по антиэкссудативной активности на декстрановой и каррагениновой моделях асептического воспаления сопоставимо с фенкаролом и превосходит димедрол.

Из табл. 5 видно, что заявляемые соединение также, как фенкарол и димедрол, можно отнести к категории умеренно токсичных веществ.

Изучение фармакокинетики глутамината хинуклидил-3-дифенилкарбинола.

Проведено изучение содержания хинуклидил-3-дифенилкарбинола в сыворотке крови крыс после внутримышечного введения: статистически значимой разницы как в величине концентрации исследуемого вещества в сыворотке крови, так и в динамике ее изменений при внутримышечном введении двух различных солей нет. Препарат быстро всасывается в кровь и быстро выводится. Максимальная концентрация хинуклидил-3-дифенилкарбинола в крови наблюдается через 30 мин после введения, через 1 ч в крови остаются лишь незначительные его количества.

Изучение острой токсичности и местно-раздражающего действия заявляемого препарата.

Изучение острой токсичности в эксперименте проведено на 60 нелинейных белых мышах-самцах массой 18 20 г. Препарат вводили внутривенно однократно в дозах 40; 50; 60; 80; 100 и 120 мг/кг.

Установлено, что ЛД₅₀ заявляемого препарата составляет 64 мг/кг, фенкарола 62 мг/кг, димедрола 29 мг/кг.

Изучение переносимости и местнораздражающего действия заявляемого препарата проведено на 80 нелинейных белых крысах-самцах массой 140 150 г.

Препарат вводили внутримышечно в объеме 0,1 мл ежедневно в течение 10 дней попеременно в правую и левую заднюю лапу. В течение эксперимента наблюдали за общим состоянием и поведением животных, динамикой массы тела, изменениями в месте введения препарата. Заявляемый препарат сравнивали с известными противогистаминными препаратами: димедролом (1%-ный раствор), супрастином (2%-ный раствор), пипольфеном (2,5%-ный раствор).

Установлено, что животные хорошо переносят десятикратное введение заявляемого соединения: патологических изменений в поведении и общем состоянии не отмечено, функции основных органов и систем не нарушались, масса животных нарастала до 150 160 г. По местно-раздражающему действию заявляемый препарат составим с перечисленными препаратами: во всех случаях в месте введения отмечены отек, множественные кровоизлияния в мышцу. Выявленные изменения обратимы через неделю после отмены препарата ткани бедра практически не изменены.

Таким образом, при сравнении с фенкаролом, заявляемое средство глутаминат хинуклидил-3-дифенилкарбинола имеет преимущества по физико-химическим свойствам, что позволяет получить его в виде лекарственной формы для парентерального введения ампулированных растворов для инъекции.

Проведенное фармакологическое исследование позволяет заключить, что заявляемое соединение в опытах на изолированных органах по спектру действия не отличается от фенкарола и проявляет высокую противогистаминную активность, сочетающуюся с умеренными антисеротониновыми свойствами. При этом показателям фенкарол и заявляемое соединение превосходят димедрол.

При внутривенном и особенно при внутримышечном введении заявляемое соединение превосходит димедрол и фенкарол по противогистаминной и антиэкссудативной активности, т.е. именно по тем показателям, которые определяют антиаллергические свойства препарата. Фенкарол (регистрационный номер 76/788/2) зарекомендовал себя как высокоэффективный лекарственный препарат, превосходящий димедрол.

Инъекционная лекарственная форма глутамината хинуклидил-3-дифенилкарбинола с высокой фармакологической активностью выгодно отличает заявляемое соединение от фенкарола в таблетках и создает возможность использовать препарат для купирования острых и тяжелых аллергических реакций, применять его тогда, когда невозможно использование таблеток (бессознательное состояние больного, аллергический отек гортани, пищевода и т.д.).

Изобретение относится к медицине и касается нового оригинального противогистаминного, антиаллергического препарата, содержащего соль хинуклидил-3-дифенилкарбинола. Цель изобретения - новое противогистаминное и антиаллергическое средство ряда хинуклидил-3-дифенилкарбинола, обладающее улучшенными свойствами и способ приготовления раствора его для инъекций. Поставленная цель достигается предлагаемым новым соединением лекарственным препаратом, представляющим собой глутаминат хинуклидил-3-дифенилкарбинола и способом приготовления его раствора для инъекций, заключающимся в том, что хинуклидил-3-дифенилкарбинол смешивают с глутаминовой кислотой и водой, взятых в массовом соотношении 1:(1,25-1,3):0,25 при температуре 40-50°С, к полученному раствору образовавшейся соли глутамината хинуклидил-3-дифенилкарбинола добавляют 0,75 мас. ч. воды для инъекций. Получаемый глутамината хинуклидил-3-дифенилкарбинола - бесцветная прозрачная жидкость, не содержащая примесей (по данным ТСХ) и содержащая в 1 мл раствора хинуклидил-3-дифенилкарбинола 0,0095-0,0105 г, кислоту глутаминовую 0,00595-0,00657 г. 2 с. п. ф-лы, 5 табл.

1. Глутаминат хинуклидил-3-дифенилкарбинола как противогистаминное и антиаллергическое средство. 2. Способ приготовления глутамината хинуклидил-3-дифенилкарбинола в виде раствора для инъекций, отличающийся тем, что хинуклидил-3-дифенилкарбинол смешивают с глутаминовой кислотой и водой для инъекций в массовом соотношении 1 (1,25 1,3) 0,25 при 40 50^oС, к полученному раствору соли глутамината хинуклидил-3-дифенилкарбинола добавляют 0,75 мас. ч. воды для инъекций.