ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ НАРАЩИВАНИЯ БИОМАССЫ БИФИДОБАКТЕРИЙ И ЛАКТОБАКТЕРИЙ Российский патент 1996 года по МПК C12N1/20 

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к производству бактерийных биологических препаратов и продуктов питания.

Известна питательная среда для наращивания биомассы бифидобактерий, гидролизатно-молочная питательная среда, содержащая в качестве питательной основы ферментативный гидролизат обрата молока при следующем количественном соотношении компонентов, г/л: Пептон семипалатинский 2,0-2,5 Натрий хлористый 2,0-3,0 Цистеин (L-цистеин) солянокислый 0,1-0,15 Лактоза 8,0-10,0 Агар-агар 0,7-0,8 Гидролизат обрата молока до 1 л pH 7,2-7,4
Недостатком питательной среды является ее высокая себестоимость и непригодность для наращивания биомассы лактобактерий.

Предложена питательная среда для наращивания биомассы бифидобактерий и лактобактерий, содержащая в качестве питательной основы гидролизат гороха с содержанием аминного азота 130-150 мг. при следующем соотношении компонентов, мас. Пептон 0,15-0,25 Хлористый натрий 0,2-0,4 Агар-агар 0,075-0,1 Лактоза 0,5-2,0 Гидролизат гороха, разведенный водой до содержания аминного азота 130-150 мг%/л Остальное
Питательную среду готовят следующим образом.

В исходном гидролизате гороха определяют содержание аминного азота. Дистиллированной водой доводят содержание аминного азота до 140 мг. Пептон, агар-агар, хлористый натрий и гидролизат гороха нагревают до полного расплавления ингредиентов, доводят pH до 7,2. Фильтруют раствор через бумажный фильтр, добавляют лактозу, разливают в стерильную посуду и стерилизуют текучим паром в течение 30 мин при 0,5 атм.

П р и м е р 1. Наращивание биомассы бифидобактерий. Во флакон с 5 дозами лиофилизированной культуры бифидобактерий В. longum В379М вносят 5 мл дистиллированной воды. 1 мл полученной суспензии растворяют в 9 мл среды Блаурокка. Готовят ряд десятикратных разведений, культивируют в течение 48 ч при 37,5-38^оС. Разведения, где отмечен рост изолированных колоний в количестве не менее 6-8 и не более 20, вносят в гидролизатно-гороховую питательную среду в количестве 5-10% от объема питательной среды. Культивируют при 37,5-38^оС в течение 18-24 ч. Культуру второго пассажа перемешивают и вносят в гидролизатно-гороховую питательную среду в количестве 5-10% от объема среды. Культивируют при температуре 37,5-38^оС в течение 18-24 ч. После завершения культивирования определяют количество жизнеспособных бифидобактерий оно составляет 4,5х10⁸ КОЕ/мл.

П р и м е р 2. Наращивание биомассы лактобактерий. 1 мл культуры лактобактерий L.plantarum ЛТСС 9338 вносят в гидролизатно-гороховую питательную среду, готовят серийные десятикратные разведения, культивируют при температуре 37^оС в течение 24 ч. Определяют количество жизнеспособных клеток лактобактерий оно составляет в 7 разведении 6х10⁸ КОЕ/мл.

Использование: в биотехнологии, в частности в производстве бактерийных биологических препаратов и продуктов питания. Сущность способа: готовят питательную среду, содержащую следующие компоненты, мас.%: пептон 0,15-0,25, хлористый натрий 0,2-0,4, агар-агар 0,075-0,1, лактоза 0,5-2,0, гидролизат гороха, разведенный водой остальное.

Питательная среда для наращивания биомассы бифидобактерий и лактобактерий, содержащая питательную основу, пептон, агар-агар, лактозу, хлористый натрий и воду, отличающаяся тем, что в качестве питательной основы используют гидролизат гороха, полученный путем разведения последнего водой, необходимой для приготовления питательной среды, и выдержки полученной смеси до содержания аминного азота 130 150 мг при следующем соотношении компонентов, мас.

Пептон 0,15 0,25
Агар-агар 0,075 0,1
Лактоза 0,5 2,0
Хлористый натрий 0,2 0,4
Гидролизат гороха, разведенный водой, необходимой для приготовления питательной среды Остальное