СПОСОБ ИСТОЩЕНИЯ КАЛЛИКРЕИН-КИНИНОВОЙ СИСТЕМЫ КРОВИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ Российский патент 1997 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано в экспериментальной физиологии, фармакологии, кардиологии для изучения патогенеза сердечно-сосудистых заболеваний и разработки способов диагностики и лечения, и способов коррекции истощения калликреин-кининовой системы крови.

Известен способ истощения системы калликреина крови, при котором ежедневно экспериментальным животным подкожно вводят 20 мг/100 г массы тела L-тироксин в течении 28 дней. Это вызывает значительное снижение активности калликреина ключевого фермента образования активных кининов, его предшественника прекалликреина, и вследствие этого значительно снижается количество активных кининов в крови, то есть происходит угнетение кининообразования. Сниженное количество активных кининов в крови и отсутствие возможности образования их остаточного количества по потребности организма из-за сниженной активности калликреина может расцениваться как один из вариантов истощения калликреин-кининовой системы крови.

Недостаток указанного известного способа заключается в длительности истощения калликреин-кининовой системы крови и наличие возможности образования активных кининов под действием других протеолитических ферментов (трипсин, урокиназа и т.п.). Наличие этой возможности обусловлено повышенным содержанием предшественников активных кининов кининогенов.

Целью изобретения является увеличение степени и ускорение истощения калликреин-кининовой системы крови.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу истощения калликреин-кининовой системы крови экспериментальному животному вводят одновременно в кровеносное русло калликреин в дозе, вызывающей его увеличение в крови в 2-3 раза, и кининазы в дозе, вызывающей повышение их активности в крови в 3-6 раз. Новым в изобретении является то, что экспериментальному животному одновременно вводят в кровеносное русло калликреин и кининазы.

Способ осуществляется следующим образом: экспериментальному животному вводят в кровеносное русло (внутривенно) одновременно препарат, содержащий калликреин в дозе, вызывающей его увеличение в крови в 2-3 раза, и киниказы в дозе, вызывающей повышение их активности в крови в 3-6 раз.

Пример.

22 белым беспородным крысам массой 200-230 г внутривенно вводили разные дозы калликреина и кининаз: 1 группа вводили калликреин в дозе, вызывающей повышение их в крови в 1,7 раза, и кининазы в дозе, вызывающей повышение их активности в крови в 1,4 раза; 2 группа внутривенно вводили калликреин в дозе, вызывающей увеличение в крови в 2,5 раза, и кининазы в дозе, вызывающей повышение их активности в крови в 3,6 раз; 3 группа вводили калликреин в дозе, вызывающей увеличение в крови в 5,1 раза, и кининазы в дозе, вызывающей повышение их активности в крови в 5,7 раз. Контролем служили 10 интактных крыс. Результаты исследования компонентов калликреин-кининовой системы крови приведены в таблице.

Из представленных в таблице результатов видно, что при введении малых доз калликреина и кининаз (1 группа) происходит активация процессов кининообразования, на что указывает повышение эстеразной и кининогеназной активности калликреина и снижение содержания общего кининогена. Наряду с этим происходит увеличение скорости кининоразрушения. При этом происходит увеличение содержания брадикинина, что можно расценивать только как активацию кининовой системы.

При введении средних и больших доз калликреина и кининаз (2 и 3 группы) происходит активация кининообразования, вызывающая истощение предшественников активных кининов кининогенов и значительное увеличение скорости кининоразрушения, что приводит к невозможности образования активных кининов по потребности организма, то есть к истощению калликреин-кининовой системы крови.

Обоснование режимов способа:
По способу прототипу в течение 28 дней подкожно вводят L-тироксин в дозе 20 мг/100 г массы тела, что приводит к снижению содержания прекалликреина и активного калликреина и невозможности образования кининов. Однако значительно увеличивается содержание кининогенов, из которых в экстремальных условиях все таки могут образовываться кинины под действием других кининогеназ. В предлагаемом способе добиваются одновременной активации кининообразования и увеличения скорости кининоразрушения, что приводит к истинному истощению и невозможности образования активных кининов по потребности организма ни при каких экстремальных воздействиях.

Положительный эффект заключается в том, использование предложенного изобретения позволяет:
значительно (с нескольких суток до нескольких часов) ускорить истощение калликреин-кининовой системы крови, вследствие чего повышается производительность экспериментальных исследований;
получить более выраженное истощение калликреин-кининовой системы крови и вследствие этого адекватно исследовать действие изучаемого или патологического процесса.

Использование: экспериментальная медицина, физиология, фармакология, кардиология для изучения патогенеза сердечно-сосудистых и других заболеваний, разработки способов диагностики и лечения, скрининга лекарственных препаратов. Сущность изобретения: осуществляют одновременную активацию процессов кининообразования и кининоразрушения. Одновременная активация этих процессов приводит к быстрому истощению предшественников активных кининов-кининогенов и устранению возможности образования активных кининов по потребности организма. Активацию кининообразования наиболее физиологично и целесообразно осуществлять введением в кровеносное русло калликреина в дозах, вызывающих увеличение его содержания в крови в 2-3 раза. Для активации кининоразрушения, позволяющей поддерживать низкое содержание активных кининов, также по соображениям физиологичности, целесообразно применять кининазы в дозах, вызывающих увеличение их активности в крови в 3-6 раз. 1 табл.

1 Способ истощения калликреин-кининовой системы крови в эксперименте, включающий введение животному препарата, отличающийся тем, что в качестве препарата используют калликреин и кининазу, при этом калликреин вводят в дозе, вызывающей его увеличение в крови в 2 - 3 раза, а кининазу в дозе, вызывающей повышение ее активности в крови в 3 6 раз.