Способ определения крайне тяжелой формы менингококковой инфекции у детей Советский патент 1991 года по МПК G01N33/68 

Изобретение относится к области медицины, в частности к педиатрии, и найдет применение в клинической практике для объективной оценки тяжести и исхода заболевания, как тест, указывающий на необходимость проведения экстренных мероприятий (гемосорбции) и позволяющий оценить эффективность осуществляемого лечения.

Целью изобретения является ускорение и повышение точности способа

Способ осуществляют следующим образом.

Производят забор цельной крови из вены больного с соблюдением правил асептики и антисептики, в количестве 1 мл в силиконированную пробирку. Для определения содержания прекалликреина и активности калликреина 0,25 мл сыворотки

(плазмы) крови разводят в 3 раза 0,02 М фосфатным буфером рН 7,0 и добавляют к 2,5-3,0 мл густой суспензии ДЭАЭ-сефадек- са А-50, уравновешенного тем же буфером. Смесь осторожно перемешивают, добавляют через 10 мин еще 3,0 мл и 0,02 М калий- натрийфосфатного буфера рН 7,0, Снова перемешивают и через 2 мин переносят на фильтр. Фильтрат собирают в мерную пробирку на 5 мл, объем доводят до метки 0,02 М фосфатным буфером.

О 44 xj О

N1

Определение активности калликреина.

К 1 мл фильтрата добавляют 1 мл 0,05 М трис-HCI буфера рН 8,0 и 1 мл 1,5 М раствора БАЭЭ в этом буфере В контрольную пробу берут 2,0 трис-HCI буфера рН 8 О и 1 мл раствора субстрата. Прирост оптической плотности измеряется в кюветах (1 см)

спектрофотометра СФ - 26 при 253 нм а течение 15 мин.

Определение содержания прекаллик- реина.

К 1 мл неадсорбированной фракции добавляют 0,8 мл 0,05 М трис-HCi буфера рН 8,0 и 0,1 мл 0,1% раствора трипсина в 0,002 М HCI. Пробу перемешивают и через 2 мин добавляют 0,1 мл 2 % раствора овому- коида в 0,05 М трис-HCI буфере рН 8,0 для инактивации трипсина. Через 15 мин к пробе добавляют 1 мл 1,5 М БАЭЭ. Эстеро- литическую активность пробы измеряют по приросту оптической плотности при 253 нм в течение 15 мин.

Содержание прекалликреина и активность калликреина выражают в миллиеди- ницах в 1 мл сыворотки, За 1 миллиединицу (мед) принято количество фермента, которое расщепляет 1 мкмоль субстрата за 1 мин и при содержании про- калмекреина 185,5 мед/мл на фоне нормальной активности калликреина (0-22 мед/мл) определяют крайне тяжелую форму менингококковой инфекции.

Пример 1. Больная Катя Б,, 5 лет, поступила в тяжелом состоянии, на 3 день болезни. При опросе родителей и осмотре ребенка в приемнике выяснено, что заболевание началось остро с повышения температуры, появления головной боли, повторной рвоты, выраженной вялости, сопровождалось появлением геморрагической сыпи на коже. На основании полученных данных был поставлен предварительный диагноз: менингококковзя инфекция; менингококцемия, гнойный менингит. Высказано предположение о разт витии инфекционно-токсического шока.

При исследовании крови, взятой у больной при поступлении, обнаружено: содержание прекалликреина 130 мед/мл; активность калликреина 0 мед/мл.

Полученные результаты выявили резкое снижение содержания прекалликреина (в 2,6 раза), при нормальной активности калликреина, что является признаком истощения кининовой системы, срыва адаптационных реакций,указывает на развитие инфекционно-токсического шока, слабый эффект проводимого лечения. Это позволило поставить диагноз крайне тяжелой формы заболевания,

Для усиления дезинтоксикационного лечения произведена гемосорбция. На следующий день после проведения интенсивной терапии состояние девочки стабилизировалось, прояснилось сознание,

прекратились высыпания. В крови на следующий день выявлены следующие изменения: содержание прекалликреина 185,50 мед/мл; активность калликреина 25,10

мед/мл.

Таким образом, полученные данные позволили уточнить диагноз, своевременно включить в комплексную терапию гемосор- бцию. Исход заболевания благоприятный.

П р и м е р 2. Больная Оксана Г., 1 год

10 мес., поступила в очень тяжелом состоянии. Наличие подъема температуры до 39°С, вялости, отказа от еды, геморрагической с некрозами сыпи на коже туловища и

конечностей, позволило поставить диагноз: менингококковая инфекция, менингококцемия. Гнойный менингит был исключен после проведения люмбзльной пункции. При исследовании крови, взятой при поступлении,

получены следующие результаты: содержание прекалликреина 412 мед/мл; активность калликреина 32,80 мед/мл.

Полученные данные свидетельствовали об активации кининовой системы, способствовавшей мобилизации защитных сил организма. Это позволило говорить об отсутствии крайне тяжелой формы болезни, прогнозировать благоприятный исход и отказаться от гемосорбции. В дальнейшем течение заболевания благоприятное, лихорадка сохранялась одни сутки, симптомы интоксикации исчезли на 2 день, выписана из отделения на 11 день от начала лечения. Способ доступен для выполнения в любом лечебном учреждении, располагающем спектрофотометром. Предлагаемый способ наиболее информативен в остром периоде заболевания.

По сравнению с прототипом предлагаемый способ позволяет в 3 раза сократить время исследования, в 2 раза уменьшить количество крови, забираемой у больного, и повысить точность определения до 100%, исключить применение дорогостоящих реактивов.

Формула изобретения Способ определения крайне тяжелой формы менингококковой инфекции у детей путем биохимического исследования крови,

отличающийся тем, что, с целью ускорения и повышения точности способа, определяют содержание прекалликреина и активность калликреина и при значении первого показателя 185,4 мед/мл и менее и

второго показателя, соответствующего норме, определяют крайне тяжелую форму менингококковой инфекции.

Изобретение относится к медицине, в частности к педиатрии, и найдет применение в клинической практике для своевременной точной диагностики крайне тяжелых форм менингококковой инфекции, выбора метода лечения, контроля эффективности проводимой терапии. С целью упрощения способа, повышения его точности проводят лабораторное определение в крови, взятой из вены больного, содержания прекаллик- реина и активности калликреина. Содержание прекалликреина 185,5 мед/мл и менее при нормальной активности калликреина