КАЛИЕВАЯ СОЛЬ КАУЛОЗИДА C, СТИМУЛИРУЮЩАЯ РЕПАРАТИВНУЮ РЕГЕНЕРАЦИЮ КОЖИ Российский патент 1997 года по МПК C07J63/00 A61K31/705 

Изобретение касается производных каулозида С, в частности калиевой соли каулозида С формулы 1, стимулирующей репаративную регенерацию кожи после ожога и линейной раны

Соединение 1, его свойства и способ получения в литературе не описаны.

Среди аналогов предлагаемого к патентованию соединения 1 следует отметить упоминаемые в научной литературе гликозиды олеаноловой кислоты, которые значительно усиливают пролиферацию клеток in vitro [1] и мононатриевую соль 18 β-глицирризиновой кислоты, обладающую противоязвенным действием и стимулирующую репаративную регенерацию кожи после ожога [2]
Наиболее близким по строению и биологической активности к 1 соединением является тритерпеновый пентациклический гликозид, имеющий структуру 3-0- b-D-глюкопиранозил-(1-2)- a -L-арабинопиранозида хедерагенида (каулозид С), выделяемый из корней стеблелиста мощного Caulophyllum robustum Maxim.[3]
В лабораторных экспериментах было показано, что каулозид С в концентрациях 1-100 нг/мл способен стимулировать пролиферацию эмбриональных фибробластов человека в культуре клеток in vitro, в более значительных концентрациях (5-10 мгм/мл) обладает цитостатическим эффектом. Кроме того, было показано, что Na-соль каулозида С в концентрации 1 мг/л стимулирует пролиферацию растительных клеток, в частности рост каллусов женьшеня [4]
Основным недостатком каулозида С как терапевтического средства является его плохая растворимость в воде, что затрудняет его введение в организм.

Медицина имеет широкий набор препаратов, применяемых для лечения ожогов, ран, например синтомициновая эмульсия, линетол. Однако поиск новых лекарственных средств, стимулирующих репаративную регенерацию кожи, то есть обладающих ранозаживляющим действием, до сих пор остается актуальным. Это связано с тем, что кожные покровы представляют довольно уязвимую часть организма для повреждений и заболеваний и зачастую деструкция даже незначительного участка кожного покрова может привести к очень серьезным осложнениям здоровья человека.

Кроме того, потребность в расширении арсенала лекарственных средств, в создании новых существует еще и потому, что всякое новое средство отличается от известных по своему механизму действия и переносимости для больных.

Для решения задачи, направленной на удовлетворение этой потребности, нами был проведен скрининг препаратов на ранозаживляющую активность.

Предлагаемое соединение калиевая соль каулозида С обладает выраженной способностью усиливать репаративную регенерацию кожи. Соединение это термостабильно, что важно при стерилизации, хорошо растворимо в воде, что дает возможность применять его не только в виде эмульсий и мазей, но и в виде растворов.

Калиевую соль каулозида С получают обработкой горячего спиртового раствора каулозида С спиртовым раствором КОН с последующим центрифугированием и промыванием осадка охлажденным этиловым спиртом. После высушивания осадка получают калиевую соль каулозида С. Выход 17%
Пример 1. Получение калиевой соли каулозида С.

1,2 г каулозида С, выделенного из корней стеблелиста мощного (Caulophyllum robustum Maxim), растворяют в 200 мл 96% этилового спирта при нагревании на кипящей водяной бане. К раствору прибавляют по каплям 1,6 мл спиртового раствора 1^N KOH. Выпавший осадок калиевой соли каулозида С (0,2 г) отделяют центрифугированием, промывают охлажденным этиловым спиртом (96% -ным) до нейтральной реакции промывных вод и высушивают под вакуумом. Т пл. 291-294^oC,
[α]19578

Влияние калиевой соли каулозида С на заживление линейной кожной раны изучено на белых крысах линии Вистар массой 130-150 г. На участке предварительно обезволошенной кожи проводят полнослойный прямой разрез длиной 5 см до собственно фасции. На равном расстоянии накладывают 3 шелковых шва, сближающие края раны. Ежедневно однократно проводят аппликацию на рану препарата (в виде водного раствора калиевой соли каулозида С) в различных концентрациях в течение 1 мин. Через 10 сут после травмы тщательно осматривают и пальпируют швы, вычисляют процент сросшейся ткани по отношению ко всей длине рамы. Результаты приведены в табл. 1.

Калиевая соль каулозида С обладает стимулирующим действием на заживление раневого повреждения кожи при местном применении препарата в виде аппликации водного раствора. Эффективность действия калиевой соли каулозида С зависит от концентрации соединения в растворе и наиболее выражена для концентрации 100 мкг/л.

Пример 3. Изучение влияния калиевой соли каулозида С на репаративную регенерацию кожи после ожога.

Ожог у крыс вызывают прикладыванием к обезволошенному заранее участку кожи массивного металлического предмета (80^oC, диметр поверхности 20 мм) в течение 3 с. Непосредственно перед ожогом шприцем под кожу вводят 3 см³ воздуха для образования воздушной подушки в месте контакта. Сразу после ожога и ежедневно рану обрабатывают раствором калиевой соли каулозида С в виде аппликаций в течение 1 мин. Ежедневно проводят осмотр и описание отдельных патологических элементов, образующихся в результате эволюции раны. Статическую обработку результатов проводят, сравнивая каждую опытную группу животных с контрольной группой, по формуле [5]

где x² критерий соответствия (согласия);
f₁f₂ частота классов первого и второго рядов;
n₁, n₂ число особей в каждом из них.

В качестве референс препарата применяют линетол, широко используемый в медицине для лечения ожогов.

Результаты опытов приведены в табл. 2.

Калиевая соль каулозида С в виде аппликации водного раствора на кожу в концентрации 0,1 и 100 мкг/л оказывает выраженное стимулирующее действие на регенерацию кожи после ожога. Действие калиевой соли каулозида С отличается от действия известного препарата линетола, эффект которого проявляется в течение первых трех суток, в то время как калиевая соль каулозида С имеет более отдаленный эффект, но превышающий таковой линетола.

Острую токсичность калиевой соли каулозида С определяют на белых беспородных мышах. Установлено, что данное вещество при внутрибрюшинном введении водного раствора обладает токсичностью с LD₅₀=32 мг/кг, что свидетельствует о малой токсичности предлагаемого соединения.

Таким образом, предлагаемое соединения калиевая соль каулозида С является малотоксичным соединением, обладающим стимулирующим репаративную регенерацию кожи эффектом при раневых и ожоговых поражениях. К достоинству этого соединения можно отнести его хорошую растворимость, термостабильность и малые эффективные дозы.

Использование: в медицине, для лечения ожогов, ран. Сущность изобретения: производное каулозида С формулы

Реагент 1: каулозид С; реагент 2: КОН. Реакцию ведут в среде этилового спирта. Соединение малотоксично, термостабильно, хорошо растворимо в воде. 2 табл.

Калиевая соль каулозида С формулы

стимулирующая репаративную регенерацию кожи.