ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЕ СРЕДСТВО Российский патент 1997 года по МПК A61K31/405 

Изобретение относится к новому противовоспалительному средству, представляющему собой трис-/2-гидроксиэтил/аммониевую соль 3-индолилтиоуксусной кислоты, которое может быть использовано в медицине для лечения воспалительных процессов при остром асептическом воспалении.

Противовоспалительные свойства трис-/2-гидроксиэтил/аммониевой соли 3-индолилтиоуксусной кислоты в литературе не описаны.

В настоящее время в клинической практике применяется широкий ряд противовоспалительных препаратов с разными механизмами действия. Одними из самых мощных противовоспалительных средств считаются глюкокортикоидные гормоны. Их противовоспалительный эффект выражается в ингибировании практически всех фаз противовоспалительного процесса, в том числе они снижают сосудистую проницаемость, фагоцитарную активность нейтрофилов и макрофагов и угнетают все процессы репаративной фазы: рост и деление фибробластов, синтез коллагена, неоваскуляризацию и рубцевание. Эти эффекты глюкокортикоидных гормонов ограничивают сферу их применения только асептическим воспалительным и только в том случае, если следует подавлять процесс рубцевания. Например, глюкокортикоиды успешно применяются при заболеваниях глаз, бурситах или воспалениях суставов и т. п. Несмотря на выраженное противовоспалительное действие стероидные препараты не могут рассматриваться как оптимальные противовоспалительные средства, так как их применение сопровождается значительным числом побочных явлений и осложнений.

Из нестероидных препаратов, обладающих противовоспалительным эффектом, наиболее широко применяются индометацин, ацетилсалициловая кислота и др. действия которых направлено на подавление простагландин-синтетазы. Однако, и эти препараты имеют побочное действие, обусловленное нарушением синтеза простагландинов в организме, что приводит к повреждению слизистой оболочки желудка, желудочным кровотечением, обострению хронических заболеваний желудка и кишечника. Кроме того, ингибирование синтеза простагландинов способствует переходу острого воспаления в хроническую форму.

Наиболее близким по противовоспалительному действию и строению к заявляемому препарату является индометацин /производное индола/, который и выбран нами в качестве прототипа. Индометацин высокоэффективный препарат и широко используется в клинической практике, однако для него отмечен ряд недостатков: препарат высокотоксичен, вызывает аллергические реакции и головокружение, а при продолжительном приеме его наблюдается повреждение слизистой оболочки желудка, желудочные кровотечения, обострения хронических заболеваний желудка и кишечника и др. поскольку действие препарата направлено на подавление простагландинсинтетазы. Кроме того, данный препарат не растворяется в воде, труднодоступен, не производится в России.

Целью изобретения является создание препарата, обладающего противовоспалительной активностью в низкой дозе, нетоксичного для теплокровных, водорастворимого, действие которого направлено на оптимизацию воспалительного процесса.

Поставленная цель достигается новым противовоспалительным средством, представляющим собой трис-/2-гидроксиэтил/аммониевую соль 3-индолилтиоуксусной кислоты, внутренний шифр ВМ-2-84.

Противовоспалительные свойства для него в литературе не описаны.

Трис-/2-гидроксиэтил/аммониевая соль 3-индолилтиоуксусной кислоты получена при взаимодействии индолил-3-тиоуксусной кислоты с триэтаноламином в этаноле или другом низшем спирте при 70-80^oC и соотношении 1:1 при нагревании в течение 5 мин по схеме:

Соединение ВМ-2-84 представляет собой окрашенное в желтоватый цвет кристаллическое вещество, со слабым запахом, неограниченно растворяется в воде, спирте, водном ацетоне и диоксане, не растворяется в эфире и углеводородах. Состав и строение его доказаны методом ИК-спектроскопии, элементным анализом. В ИК спектре ВМ-2-84 содержатся полосы поглощения в области 1610/COO^-/, 3220/NH гетерил/, 3300 / / 2990/CH алкил/, 3430/OH/ см^-1.

Способ получения препарата основан на доступном промышленном сырье: крупнотоннажном продукте триэтаноламине и доступной индолил-3-тиоуксусной кислоте. Он прост в исполнении, не требует применения катализаторов, спецоборудования, дорогих и дефицитных растворителей, выделение целевых продуктов осуществляется известными приемами с высоким выходом.

Исследование противовоспалительной активности трис-/2-гидроксиэтил/аммониевой соли 3-индолилтиоуксусной кислоты.

Испытания противовоспалительной активности проведены на 100 белых крысах-самцах. Асептическое воспаление моделировали введением под кожу голени стерильной целлоидиновой пластинки стандартного размера 1x5 мм. Материал для исследования брали через 12 ч, 1, 2, 3, 5, 7 и 10 сут после введения целлоидиновой пластинки от 5 животных для каждого срока наблюдений. Динамику воспаления изучали на гистологических препаратах, окрашенных гематоксин-эозином. В очаге воспаления измеряли толщину клеточного вала вокруг инородного тела, подсчитывали плотность клеток в нем /кол-во клеток на 1000 мкм²/, а также число слоев фибробластов в фибробластической капсуле. В периферической зоне очага воспаления подсчитывали количество малодифференцированных фибропластов на 5000 мкм², отражающее из пролиферативную активность. На препаратах, окрашенных пикрофуксином по Ван Гизону, морфометрически /с помощью окулярной сетки/ определяли количество коллагена в фибробластической капсуле /Г. Г. Автандилов. Медицинская морфометрия. М.1990/. Результаты исследований обработаны статистически и представлены в виде акта испытаний и графиков.

На фиг. 1 приведена динамика концентрации клеточных элементов в клеточном вале и число слоев фибропластов в капсуле у контрольной группы, где 1 -концентрация нейтрофилов, 2 концентрация макрофагов, 3 концентрация фибропластов, 4 число слоев фибропластов в капсуле; на фиг. 2 динамика плотности клеток в клеточном вале в процессе развития асептического воспаления, протекающего на фоне введения ВМ-2-84 в дозе 10 мг/кг; на фиг. 3 - динамика плотности клеток в клеточном вале в процессе развития асептического воспаления, протекающего на фоне введения ВМ-2-84 в дозе 2 мг/кг; на фиг. 4 - динамика концентрации малодифференцированных фибропластов в периферической зоне очага воспаления у контрольной группы животных /1/, в условиях введения ВМ-2-84 в дозе 2 мг/кг /2/ и 10 мг/кг /3/; на фиг. 5 динамика количества коллагена и фибропластов в фибробластической капсуле у контрольной и подопытных групп животных.

Эффект вещества ВМ-2-84 зависит от дозы. При введении средства в дозе 10 и 2 мг/кг через 2 ч после начала воспаления отмечен противовоспалительный эффект его. При этом в дозе 2 мг/кг противовоспалительное действие заявляемого соединения направлено на оптимизацию течения воспалительного процесса, которая проявляется в следующем:
уменьшая интенсивность лейкоцитарной инфильтрации, средство в дозе 2 мг/кг ограничивает альтерацию тканей в очаге воспаления, вызываемую протеолитическими ферментами и перекисными радикалами, секретируемыми лейкоцитами;
сохраняя фагоцитарную активность нейтрофилов и макрофагов на высоком уровне, делает возможным фагоцитоз детрита меньшим количеством фагоцитов;
подавляя пролиферативные процессы, препятствуют переходу острого воспаления в хроническую форму;
стимулируя дифференцировку фибропластов и коллагеногенез, обеспечивает образование прочного рубца. Таким образом, противовоспалительное действие заявляемого соединения в дозе 2 мг/кг заключается в ограничении острой фазы и стимуляции репаративного процесса.

В более высокой дозе 10 мг/кг при однократном введении препарата через 2 ч после начала воспаления противовоспалительный эффект ВМ-2-84 выражается в существенном подавлении всех клеточных реакций воспалительного процесса, включая снижение фагоцитарной активности нейтрофилов и макрофагов и угнетение процессов фиброзирования и осложняется чрезмерной гиперемией очага воспаления с нарушением целостности микрососудистого русла.

Побочных процессов при использовании вещества ВМ-2-84 в дозе 2-10 мг/кг выявлено не было.

Таким образом, заявляемое вещество ВМ-2-84 обладает ярко выраженным противовоспалительным действием, направленным на оптимизацию воспалительного процесса, и имеет более широкую сферу применения, т.к. в дозе 2 мг/кг не снижает фагоцитарную активность клеток, но уменьшает интенсивность острой фазы, не ингибирует репаративную фазу, а напротив, стимулирует ее.

Изучение токсичности. Проведено на беспородных белых мышах весом 20-22 г при внутрибрюшинном, рег. 3. введении препарата. Изучалось резорбтивное действие препарата и хроническая токсичность. При внутрибрюшинном введении LD₅₀ 3000 мг/кг, при введении через рот LD₅₀ 4466 /3937-5001/ мг/кг. Вещество не обладает кожно-нарывным и резорбтивным действием.

В хроническом опыте при длительном применении препарата ВМ-2-84 в течение 5 мес.в дозах 40 и 70 мг/кг отмечены определенные изменения в тканях сердца, печени, легких, почках, которые менее заметны в структурах коры головного мозга и селезенки белых мышей при сравнении с контролем.

В хроническом опыте при введении препарата в дозе 10 мг/кг не выявлено отклонений в тканях органов животных.

Таким образом, заявляемое соединение относится к практически нетоксичным веществам.

Полученные данные свидетельствуют о том, что можно считать заявляемое соединение перспективным для создания лекарственного противовоспалительного средства для лечения травматических повреждений тканей, инфаркта миокарда и прочих асептических воспалений.

Изобретение относится к медицине, а именно к применению новых противовоспалительных средств из класса алканоламмониевых солей гетерилтиоуксусных кислот, конкретно к индолил-3-тиоцетату трис-/2-гидроксиэтил/аммония. Вещество обладает высокой противовоспалительной активностью при остром асептическом воспалении и может быть использовано в лекарственной терапии при травматических повреждениях тканей, инфаркте миокарда, в послеоперационном периоде. 5 ил.

Противовоспалительное средство, отличающееся тем, что оно представляет собой трис-(2-гидроксиэтил)аммониевую соль 3-индолилтиоуксусной кислоты.