СПОСОБ ПОДГОТОВКИ ПЛАЦЕНТЫ К ОПРЕДЕЛЕНИЮ ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНОГО ВЕЩЕСТВА СТАЛАГМОМЕТРИЧЕСКИМ СПОСОБОМ Российский патент 1997 года по МПК G01N33/483 

Изобретение относится к медицине, а именно к физиологии и патофизиологии, и может быть использовано в практике акушеров и педиатров.

Известен способ определения поверхностного натяжения на автоматических весах [1]
Однако использование автоматических весов требует наличия и поверки специального оборудования, значительных затрат времени и внимания при проведении определения и последующих расчетов поверхностного натяжения.

Известен способ определения поверхностно-активного вещества (ПАВ) в ателектазированном легком сталагмометрическим способом [2]
Этот способ рассчитан только на определение ПАВ в легком и сразу после забоя животного, не предусматривая возможности хранения биологического материала. Другим недостатком этого метода является ручное измельчение биоматериала с применением песка.

Задача изобретения разработка нового способа подготовки биоматериала к определению ПАВ, позволяющего хранить исследуемый материал в течение длительного времени.

Это достигается тем, что в отличие от прототипа плаценту хранят в течение 2-4 ч, гомогенизируют в физиологическом растворе, фильтруют и подсчитывают количество капель гомогената.

Следовательно, предлагаемый способ соответствует критерию "новизна".

Сравнение предлагаемого способа с другими источниками информации в данной области указывает на отсутствие в них отличительных признаков предлагаемого способа. Следовательно, данный способ соответствует критерию "изобретательский уровень".

Способ осуществляется следующим способом.

Под эфирным наркозом декапитируют беременную крысу-самку, выполняют лапаратомию и извлечение плацент из матки. Определение ПАВ в каждой плаценте может проводиться сразу или после хранения плаценты при t=0-4^oC не более 4 ч. Плацента гомогенизируется в небольшом объеме физиологического раствора 2-4 мл, затем полученный гомогенат плаценты доразводят физиологическим раствором до соотношения 1:20 по первоначальной массе плаценты. Приготовленный гомогенат фильтруют через 1 слой бинта (марли) и приступают к определению поверхностного натяжения гомогената плаценты способом подсчета капель.

Пример. После наркотизации, декапитации и лапаратомии беременной крысы-самки получены плаценты. Определение ПАВ в плацентах на сталагмометре с подсчетом капель из гомогенатов плацент и физиологического раствора, равного по объему соответствующему гомогенату, проводили на трех группах экспериментальных крыс: N1 контрольная группа (физиологическое течение беременности), N2 группа с отягощенным течением первой половины беременности (1-10 дни беременности), N3 группа с отягощенным течением второй половины беременности (11-20 дни беременности). Отягощающим фактором являлась навязанная ежедневная гипердинамия, создаваемая в тредбане (линейная скорость движения дорожки 10 м/ч, длительность двигательной нагрузки 10 ч/сут).

Результаты проведенного эксперимента показали, что сталагмометрический способ выявляет содержание ПАВ в плаценте (табл.1).

В табл. 2 представлены результаты определения ПАВ при хранении плацент при температуре 0-4^oC.

Таким образом, выявляется возможность хранения плаценты 2-4 ч от момента декапитации животного до подсчета капель. Выбранный температурный режим необходим для хранения плацент, так как в случае более низких температур определение ПАВ после хранения затрудняется наличием повреждающего воздействия микрокристаллов льда на клеточные и мембранные структуры, а более высокие не останавливают гнилостного разложения биоматериала.

Преимуществом предлагаемого способа определения ПАВ в плаценте является возможность хранения плаценты, более простой и надежный способ измельчения биоматериала на гомогенизаторе, устранение применения песка с необходимостью последующего центрифугирования, что выгодно отличает предлагаемый нами способ от предыдущего.

Результаты экспериментальных исследований на белых крысах дают возможность в дальнейшем определения ПАВ и в плаценте человека. Способ дает возможность быстрого и точного определения ПАВ в плаценте при минимуме материальных и временных затрат. Замена ручного измельчения в песке с последующим центрифугированием на гомогенизацию с последующей фильтрацией через 1 слой бинта упрощает выполняемое исследование и устраняет применение песка при ручном измельчении. Возможность хранения плаценты позволяет проводить определение ПАВ по мере возможности, связанной с проведением параллельных исследований в эксперименте или выполнением обязательных и (или) неотложных манипуляций в медицинской практике. Температурный режим хранения биоматериала доступен и прост для его создания.

Изучение ПАВ в плаценте позволит расширить базу знаний о механизме формирующихся отклонений в системе "мать-плацента-плод".

К достоинствам предлагаемого способа можно отнести простоту, доступность и минимум материальных затрат при проведении исследований.

Источники информации:
1. Громова З. З. Давыдов В.Т. Взаимосвязь поверхностного натяжения и структурных изменений плаценты при некоторой перинатальной патологии. Медико-социальные проблемы охраны здоровья детей. Материалы 2-го съезда педиатров Киргизии. Фрунзе, декабрь 1988, с.142-143.

2. Очеленко Л. Н. Шатохин В.А. Определение поверхностно-активного вещества в ателектазированном легком. Патологическая физиология и экспериментальная терапия, 1969, N4 с.80-81.

Использование: медицина, физиология, патофизиология, для подготовки плаценты к определению поверхностно-активного вещества сталагмометрическим способом. Сущность изобретения: биоматериал измельчают, полученный осадок удаляют с последующим определением поверхностно-активного вещества сталагмометрически, при этом в качестве биоматериала используют плаценту, которую предварительно хранят в течение 2-4 ч при температуре 0-4^oC, а измельчение осуществляют гомогенизацей в физиологическом растворе. Способ прост, доступен, требует минимальных материальных затрат при проведении исследования. 2 табл.

Способ подготовки плаценты к определению поверхностно-активного вещества сталагмометрическим способом, включающий измельчение биоматериала, удаление осадка, отличающийся тем, что плаценту хранят при 0 14^oС в течение 2 4 ч, а измельчение осуществляют гомогенизацией в физиологическом растворе.